包干合同范文
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篇1
承包方:____________(簡稱乙方),地址_________________,企業經營者:____________。
甲乙雙方根據__________________,經協商訂本合同。
一、承包形式為上繳利潤遞增包干。
二、承包期限自_____年_____月_____日止,共______年。
三、上繳利潤數額
1.乙方以________元為上繳利潤包干基數,自______年起,按平均遞增_____%的比例上繳利潤,即_____年為________元,_____年為________元,______年為__________元。
2.上繳利潤后剩余部分,全部留給乙方,由乙方首先歸還國歌,然后建立生產發展基金、獎勵基金和職工福利基金。各項基本比例為:
生產發展基金
獎勵基金
福利基金
備注
年
年
年
3.乙方完不成上繳利潤時,其差額由乙方用當年留利抵交。不足時,用企業資金抵交。
四、承包期間,乙方保證完成國家的指令性計劃:_______________________________。
五、主要經濟技術指標
1.乙方保證______年達到_________企業標準,______年達到_________企業標準。
2.承包期間,新增固定資產總額為________元,其中______年________元,______年_________元,______年________元。
3.新產品開發數分別為:________年_____個,________年_____個,_________年_______個;主要項目是_________新產品產值率為:______年________,_____年________,_____年_________。
4.承包期間技術改造投資總額共________元,新增總產值________元,利潤________元。
5.承包期間產品質量達到______級標準,新創____________________。
六、承包期間,甲方有權對乙方的經營管理活動進行監督和檢查;有權_________________。
承包期間,甲方必須尊重乙方自主權,不干預乙方正常經營活動;并幫助乙方解決下述問題:_______________。
七、承包期間,乙方享有國家法律、法規、政策規定的經營管理自主權。
企業經營者_________為乙方法定代表人,對企業經營管理中的下列事項,有依法自主決定的權利:
(一) ____________________________________________;
(二)_____________________________________________;
(三)_____________________________________________。
八、違約責任
1.甲方無理干擾乙方的生產經營活動,給乙方造成損失的,從上繳利潤中扣除賠償金額。賭償金的計算方法為__________
2.甲方不按合同第_____條規定為乙方解決________問題時,按_________的______%交付違約金,違約金從上交利潤中扣除。
3.乙方未按合同完成上繳利潤總額或年度上繳利潤額,按下述辦法交付違約金:_____________________。
4.乙方未實現第______條規定的經濟技術指標的,按下述辦法納違約金;未實現企業升級時,_________;新增固定資產達不到規定數額時_________;技術改造任務未完成時,____________;產品質量未達到規定標準時,______________。
5.乙方承包期間,給企業財產造成損害的,按下述辦法支付賠償金:____________。
九、企業經營者的獎懲
乙方完不成承包指標時,分別下列情況對企業經營者進行處罰:
1.___________________________________________________。
2.___________________________________________________。
3.___________________________________________________。
4.___________________________________________________。
乙方完成或超額完成承包指標時,分別下列情況,對企業經營者進行獎勵:
1.___________________________________________________。
2.___________________________________________________。
3.___________________________________________________。
4.___________________________________________________。
十、合同的變更和解除
1.___________________________________________________。
2.___________________________________________________。
3.___________________________________________________。
4.___________________________________________________。
十一、爭議的解決方式
因本合同發生爭議時,雙方應協商解決,協商不成時,以下列第______種方式解決
1.交___________仲裁委員會仲裁;
2.交___________法院審判。
十二、本合同自_____時起生效。
合同正本一式2份,甲、乙雙方各執1份,副本一式_____份,分送______________。
甲方:(公章)__________________
地址:__________________________
法定代表人(簽章):____________
人(簽章):________________
乙方:(公章或個人簽章)________
地址:__________________________
企業經營者(簽章):____________
簽約日期:_______年____月_____日
篇2
承包方:_________,簡稱乙方;
企業經營者:_________。
甲、乙雙方根據_________,經協商簽訂本合同。
一、承包形式
上繳利潤定額包干,超額全留。
二、承包期限
自_________年_________月_________日起至_________年_________月_________日止,共_________年。
三、上交利潤定額
1.乙方在_________年內,上交利潤總額為_________元。其中,_________年_________元,_________年_________元,_________年_________元。
2.超出定額部分的利潤,全部留給乙方。
3.乙方應根據留利數額,建立生產發展基金,獎勵基金和福利基金。三項基金的比例為:_________。
四、經濟技術指標
_________。
五、技術改造任務
_________。
六、承包前債權債務的處理辦法
_________。
七、貸款歸還辦法
_________。
八、承包期間,甲方有權根據法律和合同的規定監督檢查乙方的生產經營情況;有權_________;承包期間,甲方不得在法律和合同的規定之外隨意干涉乙方的生產經營活動并有義務_________。
九、承包期間,乙方享有國家法律、法規、政策規定的經營管理自主權。企業經營者為乙方法定代表人,對企業經營管理中的下列事項,有依法自主決定的權利:_________。
十、違約責任
_________。
十一、對企業經營者的獎懲
_________。
十二、爭議的解決辦法
_________。
十三、其他有關事項
_________。
十四、本合同自_________時起生效。合同正本_________,副本_________。
甲方(蓋章):_________乙方(蓋章):_________
法定代表人(簽字):_________ 法定代表人(簽字):_________
_________年____月____日_________年____月____日
簽訂地點:_________簽訂地點:_________
篇3
關鍵詞:公路工程;單價和包干混合式合同;管理模式;應用
引言
采用單價和包干混合式合同管理模式進行公路工程建設時,除了合同所規定的分部分項工程在變更后可以相應調整單價外,其他分部分項工程無論變更與否均實行按固定總價包干。
1 單價和包干混合式合同管理模式的基本做法
1.1 合同有關規定 就公路工程而言,特殊防護加固工程、擋土墻、紅線范圍以外的改路、改河、改渠、管線改移等工程、橋梁結構、橋梁樁基礎、涵洞、通道或渡槽、隧道工程、供、配電工程、收費、監控、通信三大系統工程以及照明和消防工程等分部分項工程都適合采用單價形式進行招標和結算,即構成單價項目,發生變更后允許相應增加或減少單價,從而引起合同總價的變化。
除此之外的分部分項工程構成包干項目。
1.2 合同配套措施 招標人在招標文件中設置了“風險金”項目,并列入工程量清單中,規定由投標人根據自身經驗和實力,在仔細研究招標文件和勘察工程現場,并充分預測工程實施成本及潛在風險后自行報價。此外還規定,對主要材料市場價格變動超過一定范圍時,除了對單價項目調價外,還應按施工圖在合同工期內對包干項目程給予調價。
1.3 單價項目和包干項目劃分的影響因素 在選擇和界定單價項目與包干項目范圍時,主要考慮以下幾個方面因素:
(1)國家政策、法律法規的變化等投標人無法預測其變化,或即使能預測其變化卻難以預測其變化規模的因素;
(2)大型結構物的增設或取消、隧道圍巖地質出現異常情況等一旦發生變更對造價影響較大,承包商在競爭性投標報價中又難以充分考慮的項目;
(3)擋土墻、邊坡特殊防護等以目前的勘察設計普遍水平仍然無法保證達到包干深度的工程項目;
(4)附屬設施的預留、預埋及暫定工程量項目等由招標人(業主)自行預測和把握今后隨方案改動而作變更的項目;
(5)原材料市場價格波動幅度過大等投標人無法掌控的情況。
2 單價和包干混合式合同管理模式遇到的問題
2.1 有些承包商對新的合同條件還不能完全適應 單價與包干混合式合同把工程量變化的風險更多地歸給了承包商,把施工生產要素價格變化的風險更多地歸給了業主。一些承包商管理不善,重視不夠,風險應對的能力較差,特別當出現包干項目變更增加造價較多的情況時,一些項目部在生產要素投入上缺乏自,其上級單位的支持和扶助如不能及時到位,現場組織會比較困難。
2.2 有些承包商將包干后的成本風險失誤,導致內部管理不暢 承包商將包干后的成本風險轉嫁到下屬作業隊身上,由于工程分包和勞務協作隊伍的實力參差不齊,分包和勞務管理行為還有待規范,大部分作業隊無法承擔也不愿意承擔包干的風險,因此在施工到了一定階段后,承包商內部合同爭議和經濟糾紛明顯增多,甚至出現作業隊拖欠農民工工資,停工要挾項目部追加合同工程款的情況,對工程進度影響較大。
2.3 部分工程變更內業資料的完善不夠及時 由于包干項目變更后合同價款沒有變化,承包商對這些變更的資料手續大都不夠重視,個別嚴重的合同段還影響到計量支付工作的順利進行,增加了各方管理工作難度。
3 單價和包干混合式合同管理模式應用成效
3.1 變更及變更引起的調價問題及合同爭議明顯減少 采用單價和包干混合式合同后,對大量包干項目來說,由于工程變更不涉及實際支付價款的變化,因而變更辦理的重點主要是方案論證和施工圖設計,對方案經濟方面比較的要求較為粗曠,不容易出現爭議,這樣就大大提高了變更處理效率,有關人員可以把更多的時間和精力放在其他管理事務上。
3.2 促進提高勘察設計水平 采用單價和包干混合式合同的公路工程項目,業主要選派專人組成班子,重點對現場勘察工作進行跟蹤,力圖使這些方面的勘察更加細致和深入;要按照業主針對以往工程設計缺憾提出的補充要求和提示,額外增加了部分工作內容,特別是對部分軟基進行逐處挖探摸查,對部分地質復雜地段增加地質鉆孔,對地形變化較大路段進行斷面加密測量,對圖紙工程量和招標工程量清單進行多次校核等。
3.3 促進施工企業改善現場組織與管理 絕大部分施工企業對單價和包干混合式合同條款予以了高度重視,主要體現在現場技術力量有所加強、更加注重現場組織管理的效率、更加重視成本管理以及優化設計積極性有所提高等方面。在實行單價合同時曾經發生的一些不良現象,如有些承包商不注意保護和及時支護隧道軟弱圍巖,個別承包商甚至通過制造塌方險情,以謀求工程變更追加工程量來獲取額外利潤等現象在四平―松原高速公路工程現場已經基本杜絕。
3.4 減少變更及變更調價等問題的人為因素防范腐敗 采用單價和包干混合式合同顯著減少了該環節的人為因素,由于合同活口少,執行起來透明度大為提高,許多問題連協商的余地都沒有,“找關系”、“托人情”、“走后門”的法子就更行不通了,對利益的追求只有通過在管理上找效益來實現。實行單價和包干混合式合同管理模式,只是力圖從某項制度的源頭上防范腐敗的一種嘗試,其最終效果如何,還有待時間的檢驗。
參考文獻
[1]張澤江,劉劍.總價包干施工總承包合同計量支付方式的探討[J].山西建筑,2008,(09).
[2]曹巍.論推行施工圖招標采用總價包干合同模式的現實意義[J].建筑經濟,2003,(01).
[3]唐小富.公路工程項目計量支付的管理[J].公路與汽運,2004,(06)
篇4
各省、自治區、直轄市環境保護廳(局),新疆生產建設兵團環境保護局,環境保護部各環境保護督查中心,中國石油和化學工業聯合會,中國農藥工業協會,各草甘膦(雙甘膦)生產企業:
為貫徹落實《國務院關于加強環境保護重點工作的意見》(國發〔2011〕35號)和《關于深入開展重點行業環保核查 進一步強化工業污染防治工作的通知》(環發〔2012〕32號),進一步提升我國草甘膦行業污染防治水平,我部決定開展草甘膦(雙甘膦)生產企業環保核查工作,并符合環保要求的草甘膦(雙甘膦)生產企業名單公告,現將《草甘膦(雙甘膦)生產企業環保核查指南》(以下簡稱《指南》)印發給你們,請遵照執行。
一、工作要求
(一)企業自愿申請環保核查
草甘膦(雙甘膦)生產企業環保核查以自愿為原則。企業可對照《指南》開展自查自糾,全面分析、查找存在的環保問題,盡快完成整改。經過自查,符合要求的企業可以向所在地省級環保部門提交《草甘膦(雙甘膦)生產企業環保核查申請表》(附表1:詳見環保部網站)及相關證明材料。
(二)省級環保部門開展核查初審
各省級環保部門負責對轄區內提交申請的草甘膦(雙甘膦)生產企業進行初審。初審以日常環保監管情況為基礎,結合企業申報材料,對照《指南》進行書面審查和現場檢查。對經初審符合環保要求的企業,省級環保部門應將初審意見及企業申請材料一并報送我部,同時抄送中國農藥工業協會。對初審中發現存在環境問題的企業,環保部門應加強指導,督促整改;發現違法行為的應依法予以處罰。
(三)環境保護部復核并公告
我部與中國石油和化學工業聯合會、中國農藥工業協會組織有關專家,對通過省級環保部門初審的企業進行復核,并組織各環境保護督查中心進行現場抽查。對符合環保法律法規要求、清潔生產水平較高的企業,向社會公示5個工作日,接受社會各界監督。經公示無異議的,我部公告符合環保要求的草甘膦(雙甘膦)生產企業名單,并將名單抄送工業和信息化部、農業部、商務部、質檢總局等部門。
我部定期對通過環保核查的草甘膦(雙甘膦)生產企業進行復查和抽查,如發現不符合本《指南》要求的,將撤銷其名單并予以公告。
二、時間安排
(一)2013年安排
草甘膦(雙甘膦)生產企業應于7月30日前向所在地省級環保部門提交環保核查申請表和相關證明材料,各省級環保部門應于9月30日前將通過初審企業名單及相關材料(附電子版)報送我部,我部將于12月底前公告符合環保要求的草甘膦(雙甘膦)生產企業名單。
(二)2014-2015年安排
我部繼續開展草甘膦(雙甘膦)生產企業環保核查,企業應于每年3月底前向省級環保部門提出核查申請,各省級環保部門應于每年6月底前向我部報送通過初審企業名單,我部于每年9月底前符合環保要求的草甘膦(雙甘膦)生產企業名單。到2015年底前,基本完成對草甘膦行業全面環保核查,公告3批符合環保要求的草甘膦(雙甘膦)生產企業名單。
聯系人及聯系方式:
環境保護部污染防治司王曉密
電話:(010)66556298, 66556244(傳真)
郵箱:
地址:北京市西直門內南小街115號
郵編:100035
中國農藥工業協會曾途
電話:(010)84885918,84885001(傳真)
郵箱
地址:北京市朝陽區安慧里四區十六樓919房間
郵編:100723
環境保護部辦公廳
2013年5月21日
附件
草甘膦(雙甘膦)生產企業
環保核查指南
為貫徹落實科學發展觀,維護生態環境安全,保障人民群眾身體健康,提升草甘膦行業污染防治水平,指導草甘膦企業環境保護核查工作,制定本核查指南。
一、核查范圍
本指南適用于對草甘膦、雙甘膦原藥生產企業開展環保核查,符合環保要求的草甘膦(雙甘膦)原藥生產企業名單公告工作。
二、核查內容
各省級環保部門應根據日常環保監管情況,對企業申請核查當年及上一年度環保法律法規執行情況、環保治理設施完備性和運行效果進行現場核實:
(一)環保法律法規執行情況
1.建設項目環境影響評價和“三同時”制度執行情況。包括新、改、擴建項目是否依法履行環評審批及竣工環保驗收制度,環境影響評價文件批復和環保驗收意見中的要求是否逐一得到落實等。
2.污染物排放總量控制制度執行情況。包括企業是否完成主要污染物總量減排任務,各項污染物排放是否滿足國家和地方污染物排放總量控制指標和排污許可證管理要求。
3.達標排放情況。包括環保治理工藝技術是否可行,環保設施是否齊全并與主體生產設施同步運行;企業是否執行了環評報告或環保部門規定的監測計劃;是否按有關要求安裝在線監測裝置并與環保部門聯網;廢水、廢氣、噪聲等各項污染物是否達標排放;固體廢物是否規范收集、貯存(暫存)、轉移和綜合利用或無害化處置,委托處置危險廢物的,是否依法執行危險廢物轉移聯單制度、是否交由有資質單位利用和處置等。
4.排污申報登記、排污許可證和排污繳費制度執行情況。包括是否進行排污申報登記;是否領取排污許可證,并達到排污許可證的要求(實行排污許可證制度的,由省級環保部門在初審意見中予以說明);是否按規定足額繳納排污費。
5.實施清潔生產情況。是否依照《清潔生產促進法》開展清潔生產審核,并將審核結果向所在地縣級以上環保部門報告;是否通過評估驗收;是否依照《清潔生產促進法》和《環境信息公開辦法(試行)》及相關規定,披露企業基本信息、主要污染物排放情況、環保設施建設運行情況、環境污染事故應急預案以及清潔生產審核結果等信息。
6.環境違法或重大突發環境事件情況。包括是否因環境問題被環保部門責令限期治理、限產限排或停產整治;是否受到環保部門處罰;是否發生重大及以上突發環境事件;是否存在對企業環境問題的投訴且尚未解決。
7.環境管理制度。包括企業是否有健全的環境管理機構和環境管理制度;是否按規定制定環境風險應急預案,應急設施、物資是否齊備,是否定期培訓和演練等。
(二)企業環保工藝和設備
1.廢氣回收和治理設施:甘氨酸工藝草甘膦生產企業是否建有氯甲烷、甲醇、三乙胺、甲縮醛等回收利用裝置;IDA工藝草甘膦生產企業是否建有氨或氫回收利用裝置,含甲醛、氨、氯化氫等污染物尾氣是否建有相應的廢氣處理設施、并做到達標排放等。
2.廢水治理設施:企業是否建有物化除磷、生化處理等廢水處理設施、并做到達標排放等。
3.母液回收處理裝置:企業是否建有和原藥生產能力相匹配的雙甘膦、草甘膦母液回收處理裝置(回收氯化鈉和磷資源)。
4.固體廢物貯存(暫存)場所和處理、處置設施:各類廢液、廢渣等固體廢物(包括草甘膦母液、廢水處理產生的含磷污泥、廢活性炭、農藥包裝物等)是否按照環保標準規范貯存(暫存);使用自有焚燒爐對產生的危險廢物進行焚燒處置的,是否符合《危險廢物焚燒污染控制標準》(GB18484-2001);采取其他方式對危險廢物利用處置的,是否符合相關環保管理要求;母液是否違規被用于生產草甘膦水劑等。
篇5
再保險(reinsurance)系保險人以其所承保的危險, 轉向他保險人為保險的契約行為,可謂為“保險之保險”(the insurance of insurance)?!捌洹瓕τ谠俦kU人而言,則有達成危險分散、節減營業費用與獲致優厚利潤之效能;而對原被保險人,亦有加強安全保障、簡化投保手續及提高企業信用之功能。故曰保險經營的成敗,端視再保險的運用妥當與否,實非虛言?!?注:袁宗尉:《再保險論》,臺灣三民書局1972年版,第12頁。)再保險合同及運用,均較一般保險合同更為精密、復雜且多變化,其影響之深遠足以左右保險事業的發展,然而在國內并未受到應有的重視。本文擬從再保險合同的概念出發,討論再保險合同的性質,進而探討再保險合同的獨立性及從屬性,以期對再保險合同有進一步的認識。
一、再保險合同的界定
(一)再保險合同的性質
再保險合同雖種類繁多,方式互異,其本質究竟是什么?似乎仍有探討的必要。關于再保險合同屬性的主要學說有:
1.合伙合同或民法上其他有名合同
有學者認為,再保險合同為原保險人與再保險人以分擔危險為共同目的之合伙合同。此說認為就其經濟機能而言,原保險人與再保險人由于危險分擔之結果,在利害關系上有共同性,與合伙之性質相似。易言之,再保險合同之當事人,就危險之分擔、利益之獲得而言,有其共同之目的,如此結合,無異合伙。再由再保險的種類觀察,不論比率再保險或溢額再保險,均由原保險人對原被保險人負給付之責,正如合伙債權人對合伙體請求履行合同之責。至于原保險人與再保險人責任的分攤,均由再保險合同決定,猶如合伙合同中約定出資額的多寡決定合伙人責任的大小。此說為德、日、法等國早期判例所采用。(注:袁宗尉:《保險法》,臺灣三民書局1969年版,第69頁。)筆者以為,就法律要件分析,合伙乃當事人互約共同出資以經營共同事業之合同,亦即必須有共同之合伙財產,當事人亦須以經營共同事業之意思而訂立合同。而事實上原保險人與再保險人之間并無共同出資,且訂立再保險合同之目的亦非在經營共同事業,加之再保險人與原保險人系兩獨立的法人,各為合同之主體,并非兩者成為一合伙體,故再保險合同非合伙合同。早期代表性之見解還有保證理論、(注:此說認為,再保險合同的從屬性與保證契約從屬于債權契約而存在,兩者有相似之處,故認為再保險人類似于保證人之地位,若擔保保險人于事故發生時拒付保險金,將由再保險人代負履行之責。)轉讓理論(注:此說認為,原保險人將其對原被保險人之權利義務移轉給再保險人,亦即契約主體的變更。)及委任理論(注:此說認為,再保險人是受原保險人之委任,處理原保險人承擔危險等事物。)等,但由再保險的各種方式觀察前述理論,發現其均難以自圓其說。以比例再保險為例,原保險人將所承保之危險按一定比例分出給再保險人,由再保險人承擔一部分危險,這并不能使再保險人立于保證人的地位,進而代原保險人履行合同。而轉讓理論對比例再保險似可圓滿解釋,但對溢額再保險則無法自圓其說。另外,訂立再保險合同后,原保險人仍須處理理賠等工作,并非委由再保險人處理,故委任理論亦無法妥善解釋再保險合同的性質。
2.保險合同說
由于再保險合同既非合伙亦非民法上其他有名合同,就應從再保險人與原保險人間的合同內容加以觀察。由此可以發現,不論比例再保險或溢額再保險合同,均系由原保險人給付一定保險費,而由再保險人承擔危險的雙務合同。此合同的內容與保險合同的內容相一致,故再保險合同應為保險合同無疑。唯其屬何種保險仍有以下爭議:
(1)原保險合同說。亦即同種保險說、繼承說。此說認為, 再保險合同繼承原保險合同而來,兩者并無二致。因再保險之成立與否,僅視原保險是否存在,而其實質內容仍以原保險合同之內容為基礎,亦即認為再保險合同系由兩個團體承擔同一危險,而構成同一利害共同體,再保險人賠償義務與原保險人賠償義務同時發生,再保險與原保險屬于同種保險。故原保險合同若為財產保險,則再保險合同為財產保險;原保險合同為人身保險者,再保險合同仍不失為人身保險。因為其保險標的并未改變。(注:陳繼堯:《再保險實務研究》,臺灣三民書局1976年版,第47頁。)
(2)責任保險合同說。此說認為, 再保險系基于原保險合同中原保險人對原被保險人之給付責任,而以填補此種給付為目的之一種責任保險。因責任保險合同所保險之對象,并非被保險人于保險事故發生時所致之財產損失,而是避免其因法律或合同所負債務之增加或擴大,所保護者為消極之保險利益,亦即一種不利之關系。再保險合同對原保險人的保護,正是其依原保險合同所負之賠償責任,故其性質應為責任保險。換言之,不問原保險為財產保險或人身保險,再保險均屬責任保險。(注:[日]田邊康平:《保險契約法》,臺灣財團法人保險事業發展中心出版社1993年版,第116頁。)
綜上所述,關于再保險合同,《中華人民共和國保險法》(以下簡稱《保險法》)僅有兩個條文的規定。其中第28條規定:“保險人將其承擔的保險業務,以承保形式,部分轉移給其他保險人的,為再保險?!边@是我國法律對再保險合同概念的界定。筆者認為,我國法律雖然對再保險合同的性質作出了明確規定,但上述法律條文所稱“將其所承擔的保險業務……轉移給其他保險人”至少有以下兩層含義:其一,不論原保險合同為壽險或非壽險,再保險均系基于有效合同基礎之上而成立的保險合同;其二,再保險之特征為責任轉嫁或分擔。據此,筆者認為,我國法律雖然沒有明文規定再保險合同為責任保險,但從國家立法宗旨和當事人締約目的觀察,此種合同在性質上當屬責任保險合同無疑。
(二)再保險與相似制度的比較
為了更進一步明確再保險合同的特征,有必要比較與再保險相類似的制度——共同保險與重復保險之間的差異。
1.再保險與共同保險。共同保險(co-insurance)是由兩個或兩個以上的保險人聯合直接承保同一保險標的、同一保險利益、同一保險責任而總保險金額不超過保險標的可保價值的保險。共同保險的各保險人在各自承保金額限度內對被保險人負賠償責任。再保險與共同保險均具有擴大風險分散范圍、平均風險責任、穩定保險經營的功效。兩者的區別在于:共同保險是多數保險人同投保人建立的保險關系,屬橫向聯系和原保險,且為原保險的特殊形式;就風險的分散方式而言,它是風險的第一次分散,因此,各共同保險人仍然可以實施再保險。而再保險是保險人同保險人建立的保險關系,是縱向聯系;就風險的分散方式而言,再保險是在原保險基礎上進一步分散風險,是風險的第二次分散,并可通過轉分保使風險更加細化。從歷史沿革來看,共同保險的產生早于再保險。但由于再保險的融通性高且運用方便,現代保險實務中普遍采用再保險分散風險的方式。而最近的發展結果表明,共同保險與再保險并非背道而馳,反而漸趨接近,呈出現共同保險的再保險化與再保險的共同保險化之“互化”趨勢。盡管如此,兩種制度間的差異仍較明顯。
2.再保險與重復保險。重復保險是指投保人對同一保險標的、同一保險利益、同一保險事故分別向兩個以上保險人訂立保險合同的保險。重復保險雖與再保險一樣具有分散風險的功能,但二者之間的差異是明顯的:從締約動機上看,重復保險的投保人若系善意,旨在增強安全保障,惡意投保人則往往在于圖謀不當得利;而再保險乃原保險人為避免或減輕所負責任,所做出分散危險的制度安排。從告知義務的履行事項看,重復保險的投保人應當將重復保險的有關情況通知各保險人;而再保險分出人(原保險人)則應將其自負責任及原保險的有關情況告知再保險接受人。從超額部分保險的效果來看,重復保險中保險金額不得超過保險價值,超過保險價值的,超過的部分無效;而再保險中則可就超額約定再保險合同??傊?再保險與重復保險為兩種不同的保險制度。
篇6
[關鍵詞] 肝細胞癌;肝切除術;肝血流阻斷;肝硬化
[中圖分類號] R735.7 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210(2014)07(c)-0041-04
手術治療一直是原發性肝癌的首選治療方法,但是肝臟血供十分豐富,如何選擇有效的減少肝臟手術中出血量和避免各種并發癥的發生,不但關系著手術成功率,還影響著患者的預后。目前,臨床上主要采用半肝血流阻斷法和全肝入肝血流阻斷法(Pringle法)。本研究比較了這兩種肝血流阻斷法在肝細胞癌合并肝硬化手術患者療效和安全性,現報道如下:
1 資料與方法
1.1 一般資料
選擇2010年1月~2013年9月于廣東省高州市人民醫院行肝切除術的肝細胞癌患者80例,年齡35~86歲,平均(37.4±8.3)歲。所有患者術后病理證實均為肝細胞肝癌合并肝硬化。根據入肝血流阻斷方法的不同將其分為對照組)(Pringle法)和觀察組(半肝入肝血流阻斷法),每組各40例。其中9例患者入院化驗肝功能Child B級,給予甘利欣、谷胱甘肽等保肝治療后,術前復查肝功能達到Child A級,患者腫瘤切除范圍均不超過半葉肝。兩組患者性別、年齡、腫瘤大小、Child分級一般資料比較差異無統計學意義(P > 0.05),具有可比性。見表1。
1.2 手術方法
1.2.1 半肝入肝血流阻斷法 常規開腹手術必須先明確是否存在手術禁忌證。首先充分游離肝臟,顯露出十二指腸韌帶,用組織剪由十二指腸韌帶一側分離肝固有動脈,繼而顯露肝左右動脈,并使用血管夾夾閉患側半肝動脈。把一根乳膠管連接于肝固有動脈深面和肝十二指腸韌帶,切除肝臟腫瘤細胞時一起截斷門靜脈、膽總管和患側半肝動脈,并保證健側血流的供應。手術由經驗豐富的主治醫師實施,止血常規采用電凝法、血管結扎等手段,切肝后檢查有無活動后出血后開放入肝血流以保證手術的成功。
1.2.2 Pringle法 肝血流阻斷探查、肝切除及斷面止血方法同1.2.1。肝臟游離后經文氏孔繞過肝十二指腸韌帶乳膠管,用乳膠管扎緊肝十二指腸的韌帶,以阻斷全肝血供。一般阻斷的時間控制在20 min以內,開放時間5~15 min,最多阻斷2次。
1.3 觀察指標
分別記錄兩組患者手術所需時間、術中失血量、術后第3、7天的血清丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)、(ALB)、總膽紅素(TBIL)、凝血酶原時間(PT)水平等肝功能指標,并比較其術后安全性。
1.4 生活質量評估表
采用國內1990年制訂的腫瘤患者生活質量評分試行草案,采用1~5級評分,1分為最差,5分為最好,得分越高生活質量越高。
1.5 統計學方法
采用SPSS 19.0統計學軟件進行數據分析,計量資料數據用均數±標準差(x±s)表示,兩組間比較采用t檢驗;計數資料用率表示,組間比較采用χ2檢驗,以P < 0.05為差異有統計學意義。
2 結果
2.1 兩組術中情況
兩組患者在術中失血量、肝門阻斷總時間、手術時間及術后住院時間上差異無統計學意義(P > 0.05)。見表2。
2.2 兩組肝功能指標比較
對照組和觀察組術前血清ALT、TBIL、AST、ALB及PT比較,差異無統計學意義(P > 0.05),術后第3、7天,觀察組血清ALT、TBIL、AST、ALB及PT均顯著低于,對照組,差異有高度統計學意義(P < 0.01)。見表3。
2.3 兩組術后并發癥及不良反應發生情況比較
兩組患者均未出現大出血、感染性休克、肝衰竭。對照組術后發生肺部感染4例,膽瘺2例,腹腔積液12例。觀察組術后發生肺部感染9例,膽瘺4例,腹腔積液4例。對照組術后腹腔積液發生率明顯低于觀察組(P < 0.05)。見表4。
2.3 兩組手術前后生活質量評分
手術后觀察組的總生存質量、食欲、睡眠、自理能力、心理能力、對疾病的認識評分明顯高于對照組,差異有高度統計學意義(P < 0.01)。見表5。
3 討論
眾所周知,我國是一個肝炎大國,而大約有80%的肝炎患者為肝硬化患者。目前,一般通過各種肝血流阻斷術來減少肝切除術術中的出血量,但截斷入肝血流也會相應地造成肝功能不能及時恢復[1]。Pringle法和半肝入肝血流阻斷法是肝膽外科常見的血流阻斷技術。Pringle法主要通過完全阻斷肝動脈和門靜脈的入肝血流[2-3],這也就是阻斷了幾乎所有的入肝血流,會造成整個肝臟功能的失代償,特別是那些合并肝硬化的患者,嚴重者可能會發生肝衰竭導致死亡。臨床上,雖然采用阻斷的時間控制在20 min以內,開放的時間在5~15 min,至多阻斷2次。盡管間歇地阻斷入肝血流在一定程度可以改善肝臟的缺血缺氧而影響其正常功能的運行,但在開放的5~15 min會使較多的創面出血,造成大量失血,也會造成手術時間的增加。Pringle法簡便易行,是一種比較有效的血流阻斷方法,無需過多解剖肝門,操作簡單、省時,緊急情況下可快速達到止血的目的,適合各級醫院開展,但不適合于腫瘤已侵犯肝門或腔靜脈的手術[4]。有文獻指出,常規手術下切斷狗的肝動脈和門靜脈,20 min后會引起其上消化道大出血而死亡[5-7]。其原因可能是切斷入肝血流會引起相關的病理生理現象,血流的阻斷導致肝細胞影響其結構和功能,而合并肝硬化的患者對肝臟功能的影響尤為顯著。
半肝入肝血流阻斷法主要是選擇性阻斷患側的半肝入肝血流,保留對側半肝的正常入肝血流,阻斷后可在半肝分界面上出現清晰的分界線[8]。其優點為:為進行更為精細的手術操作贏取了時間;因為只阻斷患側肝入肝血流在一定程度減輕了缺血-再灌注損傷;術后并發癥較少、肝功能較易恢復,特別適用于合并有肝硬化肝癌患者的肝葉切除[9-11]。Chau等[12]指出,合并肝功能不全的患者行肝臟切除術,兩種方法在減少出血方面同樣安全、有效,但半肝阻斷術后患者早期肝功能較Pringle法恢復更快,尤其是對入肝血流阻斷時間大于45 min的患者,術后恢復更具優勢。還有報道肝癌患者對照研究結果提示半肝阻斷明顯優于Pringle法,前者術后肝功能恢復快,并發癥少[13-16]。
本研究發現,兩組患者手術時間和術中出血量相比較,差異無統計學意義(P > 0.05),但術后觀察組第3、7天的血清ALT、TBIL水平明顯低于對照組(P < 0.01)。觀察組術后并發癥發生率明顯低于對照組(P < 0.05)。這些提示半肝入肝血流阻斷法與Pringle法相比,不但減輕了肝臟缺血再灌注損傷的程度,還加快了術后肝功能的恢復。故在今后的手術中,對于原發性肝癌合并肝硬化的患者,都可以采取半肝入肝血流阻斷法進行肝臟手術,會在一定程度上改善患者預后的速度。此外,觀察組術后生活質量評分明顯高于對照組(P < 0.05)。這提示與Pringle法相比,半肝入肝血流阻斷法在一定程度上增強了患者手術后心理、生理的恢復,能更好地提高患者的生活質量。
綜上所述,半肝入肝血流阻斷法手術解剖分離等操作簡單、安全且療效顯著,并能有效控制術中出血量和減少術后并發癥的發生,術后的肝功恢復較快,值得在臨床上大力推廣。
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篇7
改善中小企業融資老大難問題到底路在何方?近日,寶瑞通典當行用一場黃金盛宴交出了答卷。
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“本次活動將息費降低了30%~40%,這也是2014年我們回饋廣大中小企業的第一重豪禮,保守估計,僅這一項業務我們一年就將讓利近千萬元?!睂毴鹜ǖ洚斝忻衿方洜I中心總經理王德強告訴記者。目前,寶瑞通典當業務中接待的客戶尤其是老客戶里有將近7成是小微企業。由于企業規模等特點,選擇黃金等貴金屬典當融資成為小微企業快速解決資金困難的常用手段之一。寶瑞通這次感恩回饋,除了賀歲酬賓讓利消費淘寶的老百姓之外,最主要的目的就是希望通過讓利扶持小微企業,使他們付出更小的代價、快速融到更多資金。
小微企業是中國經濟的基本細胞,占到所有企業的90%以上,他們具有數量大、類型多、靈活性強等特點,在促進增長、增加就業等方面具有不可替代的作用?!霸谒麄兊慕洜I過程中,因發放工資、進貨采購等各種原因,經常出現短期的資金缺口,融資需求旺盛。但因企業規模資質有限、難以符合銀行苛刻的審核條件等局限,融資貸款難是老大難問題。這種情況下,典當行則因為放款便捷、安全穩妥的優勢成為他們的首選。所以,我們一直通過拓寬渠道、創新形式、升級業務等方式不斷滿足其發展的需要,一方面通過讓利拓寬業務渠道和中小企業共同成長,另一方面也希望困擾小微企業的融資難問題能得到一些緩解。” 寶瑞通典當行王德強向記者介紹。
篇8
考古發掘現場(以下簡稱發掘現場)動態監測系統由發掘現場動態環境監測系統和發掘現場無線實時監測平臺兩部分組成。
發掘現場無線實時監測平臺發掘現場無線實時監測平臺的作用是為發掘現場監測子系統提供實時的數據支持,由發掘現場硬件平臺和發掘現場軟件平臺兩個部分組成。發掘現場無線實時監測硬件平臺由傳感器節點、中繼節點和網關三個部分組成:布置在現場的數據采集節點負責采集實時環境數據(如大氣溫濕度、光照強度、降塵和有害氣體等),按照一定的路由規則將數據發送至通信范圍內的父節點,然后通過中繼節點的相互中繼,將數據不斷轉發直至到達網關節點。網關節點通過遠程通信方式,如衛星通信、Internet、GPRS等手段,將數據傳送至遠程客戶終端。其中各個數據采集節點和中繼節點根據RSSI(接收信號強度指示)和跳數來選擇合適的中繼節點作為父節點,并以此在數據采集節點和中繼節點間建立簇內星狀網絡拓撲結構,中繼節點之間則根據RSSI值建立樹狀網絡拓撲結構。每個傳感器節點和中繼節點在上電后自動加入網絡,并定期將采集到的數據沿最優路由方向傳送至網關。發掘現場實時監測軟件平臺則由中間件、數據庫和數據采集接口三個部分組成。數據采集接口將接收到的實時監測數據存入數據庫中,中間件的作用則是將數據庫中保存的監測數據取出,并提供給用戶和子系統。
發掘現場環境監測系統由于監測系統需要對發掘現場的內外環境同時進行監測,因此發掘現場監測子系統由環境監測子系統和氣象監測子系統組成。環境系統檢測子系統主要是針對文物所處環境參數,如大氣溫度、大氣相對濕度、土壤溫度、土壤水分含量、文物表面溫度、文物表面濕度、大氣二氧化碳濃度、有機揮發物總量等參數進行監測。氣象監測子系統主要是針對發掘現場所處小環境的氣象參數,如光照度、紫外線強度、風速、風向、降雨量等參數的實時監測。監測系統的目的在于對文物所處環境的各種參數進行數據挖掘整理,精確掌握文物埋藏的環境參數,實現對出土文物在第一時間的檢測分析以及文物出土環境參數的采集,建立環境參數歷史數據庫,為文物預防性保護提供技術支撐,并為文物保護措施的制訂提供科學依據。
案例研究
鳳棲原文物保存環境監測數據分析鳳棲原張安世墓葬遺址屬于西漢宣帝時期的重臣、被封富平侯的大司馬將軍張安世。張安世在西漢的地位舉足輕重,其墓葬的出土文物進一步證實了這一點,出土的很多隨葬品都屬于西漢皇帝御賜物件。根據發掘現場實際狀況及需要,目前已部署七個監測點,監測時段大約在八個月左右,監測點部署圖如下(圖4)。數據記錄及分析3月份期間,鳳棲原張安世墓葬遺址氣象站監測數據存在較大波動(圖5)。其中3月19日-3月21日期間,環境溫度基本保持在4℃左右,環境濕度基本保持在100%,波動均不大,光照變化范圍也縮減至0-2000lx之間。結合當時的天氣變化,3月天氣剛剛由寒轉暖,氣候變化較頻繁,3月19日-3月21日是降雨天氣,持續陰天,光照度較低,導致空氣中水分蒸發較少。3月22日停止降水后,光照開始恢復,環境濕度逐漸下降,氣溫也逐漸回升(因水分揮發緩慢,恢復的較為遲緩)??傮w來看,3月份氣象站的大氣溫度變化為0℃到23℃之間,大氣濕度在16%到75%之間,每天的照度變化最大范圍0lx到8500lx內,氣象站數據與環境數值較一致,溫度、濕度、光照度也保持合理的變化趨勢。環境變化正常,期間出現的特殊變化,多是天氣變化引起的。查看這一段時間82號監測點的土壤溫度和含水量的變化,遺址坑內的土壤溫度和土壤水分含量變化波動較大(圖6),其中3月19日-3月21日土壤水分含量逐漸升高(由4.34%上升至4.65%),土壤溫度也隨之逐漸降低(由10.5℃下降至5℃)。結合氣象站的監測結果看,3月天氣變化頻繁,3月19日-3月21日為降雨天氣,室內土壤雖然不直接受到降雨給監測數據帶來的驟然變化,但由于受到外界土壤水分的滲透作用,土壤溫度和水分含量也隨之以相同的趨勢逐漸變化。3月22日停止降水后,土壤水分含量逐漸下降,土壤溫度也逐漸回升。總體來看,土壤溫度在5.2℃到13℃范圍之間、土壤含水在4.3%到4.65%范圍之間保持著較為穩定的變化,并且二者保持相符的變化趨勢。期間出現的特殊變化,多是天氣變化引起的(可查看氣象站數據變化)。查看這一段時間90號監測點的大氣溫濕度變化,3月期間遺址環境的大氣溫濕度波動較大(圖7)。其中3月19日-3月21日,大氣溫度由10℃驟降至1℃,大氣濕度由41%驟升至98%,變圖4監測點部署圖化顯著。結合氣象站的監測結果看,3月19日-3月21日為降雨天氣,大氣溫濕度受到直接影響帶來的突然變化。3月22日停止降水后,大氣溫度逐漸回升,大氣濕度也逐漸回落,監測點數據準確反映了監測區域的環境變化??傮w來看,大氣環境溫度在1℃到22℃范圍內、大氣環境濕度在20%-98%范圍內保持著穩定的變化,并且二者保持相符的變化趨勢。期間出現的特殊變化,多是天氣變化引起的(可查看氣象站數據變化)。查看這一段時間92號監測點的大氣溫濕度變化,3月期間遺址環境的大氣溫濕度波動較大(圖8)。其中3月19日-3月21日,大氣溫度由10℃驟降至0℃,大氣濕度由50%驟升至100%,變化顯著。結合氣象站的監測結果看,3月19日-3月21日為降雨天氣,大氣溫濕度受到直接影響導致突然變化。3月22日停止降水后,大氣溫度逐漸回升,大氣濕度也逐漸回落,監測點數據準確反映了監測區域的環境變化??傮w來看,大氣環境溫度在0℃到22.5℃范圍內、大氣環境濕度在20%-100%范圍內保持著穩定的變化,并且二者保持相符的變化趨勢。期間出現的特殊變化,多是天氣變化引起的(可查看氣象站數據變化)。總結對比4個監測點的數據變化,監測點的傳感量數據變化和環境變化保持一致,并且與當時的天氣環境較一致,說明數據正確反映了監測區域的環境變化。
高陵張棟家族墓文物保存環境監測數據分析2011年陜西考古研究院專家在高陵縣涇河工業園發現一處罕見的完整明代家族墓園。據墓志記載,墓主人張棟生前為秦藩王府知印。這一發現對研究明代墓葬制度、風俗文化具有重要作用。根據發掘現場實際狀況及需要,目前已部署十一個監測點,監測點部署圖如下(圖9)。說明:100號監測點:自動氣象站--監測外界環境。52、53、54、55號監測點:大氣溫濕度傳感器--其中53號監測點監測墓室底部到地表中間部位的環境,其他監測點監測墓室中的環境。61、62、63、64、65號監測點:土壤溫度、土壤水分含量傳感器--其中65號監測點監測墓室底部到地表中間部位的環境,其他監測點監測墓室中的環境。71號監測點:二氧化碳傳感器--監測墓室中二氧化碳含量。數據記錄及圖形分析查看這一段時間52號監測點的大氣溫濕度變化,5月期間遺址環境的大氣溫濕度波動較大(圖10)。其中5月1日-5月3日期間,濕度維持在82%-93%之間,溫度在17.5℃-22.5℃之間,基本保持在高濕、低溫的水平,晝夜溫差和濕度差較?。?月11日-5月12日溫度濕度和光照度驟變,濕度由62%升至88%,溫度由25℃降至最低17℃。結合氣象站的監測結果看,5月為春季末尾,氣溫總體呈緩慢上升趨勢,并偶爾伴隨降雨。5月1日-5月3日、5月11日-5月12日是降雨天氣,濕度很大,氣溫較低。無降水期間,光照逐漸充裕,環境濕度逐漸下降,氣溫也逐漸回升并呈上升趨勢??傮w來看,當月大氣環境溫度在16℃到35℃范圍內、大氣環境濕度在20%到98%范圍內保持著穩定的變化,并且二者保持相符的變化趨勢。監測點數據準確反映了監測區域的環境變化。期間出現的特殊變化,多是天氣變化引起的(可查看氣象站數據進行對比)。查看這一段時間71號監測點的二氧化碳含量變化,5月期間遺址環境的二氧化碳含量波動較大(圖11)。以5月9日為分界,5月1-9日二氧化碳含量在200-450ppm之間波動較大且均值偏高,5月9-20日二氧化碳含量在200-330ppm之間波動較小且均值偏低。經調查,5月1-9日,71號監測點放置于M4考古發掘現場,現場白天有大量工作人員活動,白天由人體排放的二氧化碳使得空氣中二氧化碳濃度較高,夜晚則恢復至正常水平;5月9日之后,為防止因挖掘工作破壞監測設備,工作人員將其挪至無人活動的M5內,并以不透氣薄膜覆蓋,給71號監測設備營造出密閉的微環境,故而二氧化碳含量偏低且波動較小。其中5月1日-5月3日期間,二氧化碳含量在300-430ppm之間變化幅度相對較小,基本保持在高濕、低溫、高濃度二氧化碳的水平。經分析,因期間有降雨,空氣流通不暢,故而空氣中二氧化碳含量一直保持在較高水平且波動較小。結合氣象站的監測結果看,監測點數據準確反映了監測區域的環境變化,并且三者保持相符的變化趨勢。期間出現的特殊變化,多是天氣變化引起的(可查看氣象站數據變化進行對比)。查看這一段時間53號監測點的大氣溫濕度變化,5月期間遺址環境的大氣溫濕度波動較大(圖12)。其中5月1日-5月3日期間,濕度維持在60%-100%之間,溫度在16-28℃之間,基本保持在高濕、低溫的水平,晝夜溫差和濕度差相對較?。?月11日-5月12日溫度濕度和光照度驟變,濕度由62%升至100%,溫度由25℃降至最低17℃,之后的3天內,濕度的最高值均能達到100%。結合氣象站的監測結果看,5月為春季末尾,氣溫總體呈緩慢上升趨勢,并伴隨偶爾降雨。5月1日-5月3日、5月11日-5月12日是降雨天氣,濕度很大,氣溫較低。無降水期間,氣溫呈緩慢上升趨勢。結合監測點的布設位置(53號節點布設在墓底部和地表中間位置),且通風不暢導致濕度在降雨之后的3天內并沒有立即回落,而是逐漸降低且較其他監測點數據高。總體來看,監測點數據準確反映了監測區域的環境變化,環境變化正常。期間出現的特殊變化,多是天氣變化引起的(可查看氣象站數據變化)。查看這一段時間65號監測點的土壤溫度和含水量的變化,坑內的土壤溫度和土壤水分含量變化波動較大(圖13),5月1-11日土壤水分含量保持在20-43%之間,土壤溫度變化范圍維持在18-21℃之間;5月12日土壤水分含量由15%突升至42%,土壤溫度峰值也由29℃大幅降至23.5℃,之后逐漸恢復至平均水平。經調查,5月1-11日監測設備放置于墓室內,故而受外界降雨等影響較小且緩慢,5月12日之后設備被挪至墓室外環境,由于當日有降雨,室外濕度較大,所以監測數據突增??傮w來看,土壤溫度在19.5℃到29.5℃之間、土壤含水率在15%到43%之間保持著較為穩定的變化,并且二者保持相符的變化趨勢。期間出現的特殊變化,多是天氣變化引起的(可查看氣象站數據變化)。5月份期間,高陵張棟家族墓遺址內氣象站監測數據存在較大波動(圖14)。其中5月1日-5月3日期間,濕度維持在82-100%之間,溫度在15-23℃之間,照度在0-5000lx之間,基本保持在高濕、低溫、弱光照的水平,晝夜溫差和濕度差較??;5月11日-5月12日溫度濕度和光照度驟變,濕度由60%升至100%,溫度由22℃降至最低12℃,光照度變化范圍也縮減至0-4200lx。結合當時的天氣變化,5月為春季末尾,氣溫總體呈緩慢上升趨勢,并偶爾伴隨降雨。5月1日-5月3日、5月11日-5月12日是降雨天氣,持續陰天,光照度較低,氣溫降低。無降水期間,光照逐漸充裕,環境濕度逐漸下降,氣溫也逐漸回升并呈上升趨勢??傮w來看,氣象站的大氣溫度在12-32.5℃之間,大氣濕度在18%-100%之間,照度變化最大范圍為0-9000lx,氣象站數據與環境數值較一致,溫度、濕度、光照度也保持合理的變化趨勢。環境變化正常,期間出現的特殊變化,多是天氣變化引起的。總結對比4個監測點的數據變化,監測點的傳感量數據變化和環境變化保持一致,并且與當時的氣候環境較一致,說明數據正確反映了監測區域的環境變化。
結語
篇9
【關鍵詞】CRP;白細胞計數;感染性疾病
【中圖分類號】R446.1【文獻標識碼】B【文章編號】1008-6455(2011)08-0157-01
CRP是在活化的巨噬細胞分泌的細胞因子刺激下,誘導肝細胞產生的一種急性非特異性反應蛋白。正常人血液含量很少,在急性期炎癥反應時,肝細胞可大量合成CRP,其濃度顯著增高,它是急性反應極靈敏的指標[1]。CRP目前已經作為醫院常規檢測項目,可以在很多疾病診斷上作為輔助診斷依據。本文對我院兒科門診500例感染性疾病患兒進行了CRP與白細胞計數的聯合檢測.并對結果進行了統計分析。現報道如下:
1 材料和方法
1.1 資料:2011年1月到5月我院兒科患兒,年齡在1到10歲。
1.2 方法:CRP采用OrionDiagnospica檢測儀免疫比濁法,檢測原理:可溶性抗原(CRP)能與特異性抗體(CRP抗血清)反應.生成不溶性的抗原一抗體復合物,當光線通過反應懸液時,發生散射并由特定的蛋白分析儀檢測到。散射光值的高低與測試樣品中的CRP成比例。白細胞計數由SYSMEXXT-2000i五分類血球計數儀檢測血常規,試劑為儀器廠家專用配套試劑,同時加入質控樣本,符合要求后再行測定。
1.3 標本采集標本:采集嚴格消毒,采集毛細血管血80ul,注入盛有EDTA-K2抗凝管內混勻,按照各自的規程嚴格操作,分別測定白細胞和CRP。
1.4 結果:判斷CRP>8mmol/L,白細胞>10×109/L為陽性。
2 結果
500例患兒中CRP與白細胞同時升高者348例,陽性率69.6%,CRP與白細胞均在正常范圍內者27例,占5.4%。見表1
表1 500例感染性疾病患兒CRP與白細胞計數的關系分析
3 討論
CRP被公認是一項最敏感的炎癥指標,CRP在大多數病毒感染時血清濃度輕度升高或不升高,在直接創傷和大多數細菌感染時明顯升高。近年來,國內外諸多文獻報道CRP可鑒別細菌與病毒感染并指導抗生素使。CRP不受性別、年齡,貧血、高球蛋白血癥、抗生素、免疫抑制劑和激素等因素的影響,因而它優于其他急性期的反應物質.故CRP測定可作為細菌與病毒感染鑒別診斷的敏感指標[2]。CRP明顯高于參考值時,臨床可基本確定有細菌感染的存在,且與感染呈正相關。在炎癥時,CRP于4~6小時內迅速合成,36~50小時達高峰,峰值可為正常值的100~1000倍。經積極、合理地治療后,3~7天降至正常。CRP的高低變化與炎癥反應的嚴重程度及病情發展有重要相關性。在細菌感染時常導致CRP水平升高,而CRP在大多數病毒感染情況下濃度變化不大或基本保持不變,這是由于大多數病毒感染是在機體細胞內進行的,而完整的機體細胞膜上缺乏暴露的磷脂蛋白質,所以不能觸發CRP產生和結合。不同的是,多數細菌感染發生在細胞外,細菌直接創傷使兩邊的細胞膜分離,暴露出膽堿磷酸分子和提供一個CRP的附著點,通過IL-6和其他白細胞介素將信息傳遞給肝臟,刺激肝細胞產生有活性的CRP。這就是CRP用于鑒定細菌感染和病毒感染的基礎。CRP的檢測具有操作簡便、快速、標本量少的特點,可以輔助醫生進行細菌與非細菌性感染的鑒別。CRP與血常規聯合檢驗還可以較好地指導臨床用藥,抗生素的濫用所導致的不良后果.不良反應以及耐藥菌株的不斷增多,已引起兒科醫生和患兒家長的廣泛關注,兒科醫生對CRP與WBC計數同時增高的患兒,可選用抗生素治療,對CRP與WBC均在正常范圍內可以不使用抗生素,以減少抗生素的濫用,或視臨床表現給予適當處理,對CRP與WBC計數變化不一致的最好作隨診觀察[3-5]。
白細胞計數是對炎癥疾病輔助診斷的傳統指標,大部分化膿性細菌引起的炎癥、組織損傷、手術創傷等均可引起白細胞的增高。但白細胞計數的影響因素較多,存在生理波動,如妊娠晚期、月經期、餐后、劇烈運動后、冷水浴后、情緒激動和疼痛等都可以引起白細胞計數的生理性增高。有關報道也表明,由于一些白細胞基數低的患兒,WBC輕度升高不會超過正常范圍,在日常檢驗工作中,我們也發現不少白細胞計數正常但CRP增高的病例,所以單獨對白細胞計數進行分析是片面的,不能準確反映患者的病情,故應用白細胞計數和CRP的聯合檢測可以彌補不足。
兒童全血CRP檢測應用免疫比濁法進行測定,標本用量少,操作簡單、結果準確,實驗快速,5分鐘內可得出結果。結合白細胞計數,可以很好地鑒別細菌感染和病毒感染,在臨床上有效減少了抗生素的濫用。
綜上所述,在兒童感染性疾病中,全血CRP可明確鑒別細菌和病毒感染。將全血CRP和白細胞計數二者聯合檢測,在兒童感染性疾病的診斷中有重要意義。
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篇10
[關鍵詞] Rab27A;Rab27B;肝細胞癌;RT-PCR;Western blot
[中圖分類號] R735 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721(2015)06(a)-0004-04
Expression of Rab27A and Rab27B in the four different hepatocellular carcinoma
LIU Ding LIU Jian-sheng
The First Clinical Medical College of Shanxi Medical University,Taiyuan 030001,China
[Abstract] Objective To investigate the expression of Rab27A and Rab27B in 3 human HCC lines and the immortalized hepatic cell line and its effect on biology characteristics of the cells. Methods The mRNA expression of Rab27A and Rab27B was detected by RT-PCR,and Western-blot in 3 human HCC lines of HepG2,Huh-7,Li-7 and the immortalized hepatic cell line of HL-7702. Results Rab27A and Rab27B were differentially expressed in cell lines and primary HCC tumors.The expression of Rab27A in 3 human HCC line was significantly better than that expressed in the immortalized hepatic cell line;the mRNA of Rab27B in 3 human HCC lines and the immortalized hepatic cell line were significantly expression but there was no significantly difference. Conclusion Rab27A and Rab27B expression are closely correlated HCC,it can provide the clinical reasonable diagnostic measures as valuable effective reference basis.
[Key words] Rab27A;Rab27B;Hepatocellular carcinoma;RT-PCR;Western blot
肝細胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是消化系統最常見的惡性腫瘤之一,具有極高的侵襲性和轉移性,出現典型癥狀時,往往已經為晚期。目前與HCC進展相關的因子包括癌胚抗原(CEA)、糖類抗原(CA199)、異常凝血酶原(DCP)等,同時Rab家族被證實與腫瘤密切相關。本文采用RT-PCR及Western blot技術檢測了Rab27A與Rab27B在3種人肝癌細胞系及1種永生化肝細胞系中的表達情況,以期進一步研究其對肝癌細胞生物學特性的影響,為原發性肝癌的研究提供理論基礎。
1 材料與方法
1.1 材料和儀器
3種人肝癌細胞HepG2、Huh-7、Li-7及1種永生化肝細胞系HL-7702均采購自中國科學院上海生科院細胞資源中心,并按照其建議的方法進行培養。20%胎牛血清、RPMI 1640培養基、DMEM高糖培養液購自GIBCO公司,DEPC購自Sigma公司,ECL顯色試劑盒購自Thermo-fisher公司,NC膜購自Amersham公司,引物、Rab27A兔多抗、Rab27B羊多抗、HRP標記驢抗兔IgG、β-actin購自生工生物工程公司,Trizol、Taq PCR試劑盒購自TaKara公司,PCR反應儀采用Thermocycler(Biometra Germany公司),Alphaimager 2200分析儀(Alpha Innotech,San Leandro,CA公司),其他常規化學試劑均為分析純。
1.2 方法
1.2.1 細胞培養 各種細胞均按照標準方法進行培養,傳代時用2.5 g/L的胰蛋白酶消化, 按1∶3的比例傳代。取生長狀態良好、密度80%~90%的細胞用于實驗。
1.2.2 RT-PCR Rab27A基因引物F:5′-AACCGCCACAGTCTTCAATC-3′,R:5′-TCCCTGACCCTTCAAT-CAAC-3′;Rab27B基因引物F:5′-CCCTAAAAATCCCAGTCCATC-3′,R:5′-GAGCATCCCAGAGGAAACAC-3′。反應過程如下:94℃預變性2 min,94℃變性30 s,55℃退火30 s,72℃延伸60 s,最后72℃終延伸5 min,β-actin作為內參,擴增30個循環。PCR反應產物行1%瓊脂糖凝膠電泳,采用凝膠成像系統分析結果。隨后對細胞系中的Rab27A與Rab27B mRNA的表達水平進行全定量PCR。
1.2.3 Western blot SDS-PAGE分離蛋白,每個樣品的上樣量為50 μg,電轉至NC膜。5%脫脂牛奶4℃封閉1 h,孵育一抗Rab27A(1∶1000稀釋)或Rab27B(1∶1200稀釋),4℃過夜。倒掉一抗溶液,用TBST漂洗液濾膜3次,每次10 min。加入相應種屬的辣根過氧化物酶標記的二抗溶液(1∶10 000稀釋),搖床上緩慢搖動,37℃ 2 h。倒掉二抗溶液,用TBST漂洗液濾膜3次,每次10 min。最后采用ECL試劑盒顯影,定影,觀察雜交信號。
1.3統計學方法
采用SPSS 17.0統計軟件進行數據處理,計數資料以率表示,采用χ2檢驗。以P < 0.05為差異有統計學意義。
2 結果
通過采用RT-PCR、Western blot分析了3種人肝癌及1種人永生化肝細胞系中Rab27A及Rab27B mRNA及蛋白表達情況。β-actin內參條帶在205 bp處皆顯現明亮且無明顯差異,Rab27A mRNA在357 bp處3種人肝癌細胞系中明顯亮于1種人永生化肝細胞系;Rab27B mRNA在302 bp處均出現目的條帶,且條帶清晰;實驗重復3次。結果表明Rab27A mRNA在3種人肝癌細胞系中表達明顯強于1種人永生化肝細胞系;Rab27B mRNA在3種人肝癌及1種人永生化肝細胞系中均明顯表達但無顯著差異(圖1)。其中,β-actin作為內參。
A
3 討論
HCC是一種嚴重威脅人類生命的惡性腫瘤,發生率位居全球惡性腫瘤發病率第5位,死亡率位居全球惡性腫瘤發病率第3位,全球每年死于HCC患者人數高達69.6萬,其中超過50%的肝癌新發患者與死亡患者來自中國[1-2]。HCC的侵襲和轉移過程涉及到腫瘤細胞的增殖、黏附、遷移和侵襲等過程,而這一過程正是通過多種因子間的相互協調來實現。2013年諾貝爾生理學和醫學獎表彰詹姆斯?羅思曼等人發現細胞的囊泡運輸調控機制,表明細胞膜的分裂與囊泡運輸時細胞膜裂解是一致的。細胞的生命活動依賴于細胞內運輸體系的精細結構和控制結構,通過與目標細胞膜融合,在神經細胞指令下可精確控制激素、生物酶、神經遞質等分子傳遞的恰當時間與位置。RabGTP酶類作為機體內一組與內膜運輸相關的調節蛋白,可以作為囊泡運輸的分子開關,與GTP結合則有活性,與GDP結合則無活性,通過與上游調控因子和下游特異效應因子相互作用,影響細胞的分泌、胞吞、信號轉導及發育,并可以控制膜結構的一致性和囊泡的形成、轉運、黏附、錨定、融合等過程,從而發揮重要的作用[3-4]。
人類Rab蛋白廣泛分布于各種生物細胞內不同的膜結構上,是小分子GTP結合蛋白家族中最大的亞家族,包括超過60個成員組成,可以通過不同的可變剪切形式而產生各種功能特異的亞型[5-6]。Rab家族可以通過特異性地定位于胞質中某些亞細胞器從而發揮特殊的功能,而抑制其中一些蛋白的表達,細胞膜的裂解次數可明顯減少[7]。Rab27亞家族包括Rab27A與Rab27B,兩者是具有71%同源性的小GTP 酶(20~29 kD),可以通過影響囊泡運輸物質來抑制機體免疫監視功能,并為腫瘤細胞提供理想的生存環境,促進血管生成及腫瘤細胞增殖轉移[8]。Rab27A在人類染色點15q15-21.1,調節因子有3種:Rab親和蛋白,Slac2和Muncl3-4,功能主要為特異性地調節囊泡出胞過程,促進囊泡與細胞膜融合,并且激活溶酶體,促進細胞膜裂解[9]。Rab27A參與細胞色素顆粒的轉運,若表達缺失會導致色素沉著消失和黑素小體轉運功能缺陷,從而導致一種罕見的常染色體隱性遺傳性疾病――格里塞利綜合征(GS)[10-11]。Rab27A通過與Melanophilin和肌漿球蛋白Ⅴa共同形成一個三元復合體,參與粗細肌絲的滑行運動,因此有學者認為Rab27A具有肌球蛋白受體的全部或部分功能[12]。研究表明Rab27A可以通過調節VEGF、cyclin D1、IGF-2、MMP-9、MMP-7和p16蛋白的表達,從而在腫瘤細胞體內增殖、侵襲和轉移中發揮促進作用[13]。Rab27B位于18號染色體上,調節因子有3種:突出結合蛋白4(Slp4),Slac2b和Noc2,功能主要為參與大多數分泌性細胞的胞吐作用及運輸過程,促進囊泡物質由細胞質向細胞膜區域運動,在腦垂體、腮腺腺泡細胞、胰腺腺泡細胞的胞吐作用及血小板致密核心顆粒的分泌中有重要的調節作用[14-16]。有研究表明,抑制uPA和HGF的胞外水平的表達,HCC的侵襲和轉移能力均顯著下降。
近來研究發現,Rab27A與乳腺癌、肝癌、肺癌、胰腺癌、神經膠質瘤細胞等多種腫瘤細胞的侵襲和轉移密切相關;Rab27B表達于乳腺、肝臟、胃、大腸、脾、眼、心臟、腎臟等多種腫瘤細胞[16-20]。本實驗采用RT-PCR及Western blot技術,檢測Rab27A與Rab27B mRNA在3種人肝癌細胞HepG2、Huh-7、Li-7及1種永生化肝細胞系HL-7702中的表達,筆者發現,Rab27A與Rab27B在肝癌細胞系及原發性肝癌組織中存在差異性表達,Rab27A mRNA在3種人肝癌細胞系中表達明顯強于1種人永生化肝細胞系;Rab27B mRNA在3種人肝癌及1種人永生化肝細胞系中均明顯表達但無顯著差別。因此,根據上述實驗結果,Rab27A與Rab27B與HCC密切相關,可以為臨床采取合理診斷措施提供有效的參考依據。
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精品范文
1包干合同