感到孤獨范文

導語：如何才能寫好一篇感到孤獨，這就需要搜集整理更多的資料和文獻，歡迎閱讀由公務員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

理由很簡單，后母不喜歡我，父親重男輕女，也不愛我。我很孤獨。

家里沒有溫暖，學校也使我失望。我本來有一個好友，她家庭生活困難，我便把在外祖母家積攢的一些錢全給了她?？蓻]想到，近來她“抖”起來了，也不理我了。我很傷心。

有時看到同學們高高興興，又說又笑，我真又佩服，又羨慕，可一想到自己，心又涼了，我覺得周圍的人都瞧不起我，也幫不了我。脆躲得遠遠的，很少和同學們在一起。生活上的一切歡樂已經毀滅，我常常暗自落淚。我該怎么辦？請您一定要回答我！

福建 林 蘭

林蘭同學：

你在家庭和學校生活中遇到了一些不順心的事，又長期找不到解決的辦法，因而陷入苦悶，使自己由活潑變為沉默，由開朗變為憂郁。我對你的心情是理解的，對你的處境很同情。如果我說的能對你有所幫助，我將非常高興。

沒有一個溫暖的家庭，對一個人來說，特別是對一個尚未獨立生活的青年學生來說，確實是一種不幸。誰不希望有一個和睦歡樂的家庭？！可是，并不是人人都會那么美滿如意。你生活在這樣的家庭，要改變不協調關系，又不是短期可以辦到的，作為子女也常常是無能為力的。面對這種情況，應該怎么對待呢？我覺得，關鍵是要自己有個正確的認識和態度。要看到，人世間不僅有太陽，也有烏云和風暴。在人生的長河中，哪能不遇到困難和挫折呢？人生的旅程不可能事事如意，天天順心。而且，我們還要看到，個人家庭中的某些不幸不睦，又是和現在社會上的某些落后現象、挫折緊連在一起的。當遇到眼前個人及家庭中的一些不愉快時，我們要站得高些，想得開些，為了祖國的社會主義事業，為了一生的遠大前程，寧可忍受這些小的不幸，不為它而影響我們努力學習，奮發向上！你看過《鋼鐵是怎樣煉成的》這本書嗎？作者奧斯特洛夫斯基一生中經歷了無數次的不幸，在戰場上多次負傷，后來全身癱瘓，雙目失明，在愛情上也遭受過挫折。面對這一切，奧斯特洛夫斯基說得好極了：“盡管這樣，我仍然是非常幸福的人?！币驗樾闹邢胫鎳氖聵I，他就自然地感到：“個人的不幸現在對我是次要的”。我們應該象奧斯特洛夫斯基那樣，不被生活中任何困難和挫折所壓倒，在困難和個人不幸面前，做生活的強者。

不知道你有過這樣的體驗沒有，當你不愉快的時候，如果只是一個人鉆在屋子里苦思冥想，那就會越想越煩惱，就象走進死胡同一樣，繞來繞去出不來。如果和大家一起學習，一起唱歌跳舞，煩惱的事很快就丟到一邊去了。只有在相互接近和交往中，你才了解大家，大家也才了解你；別人有困難，你肯于幫助，你有困難，別人也會樂于伸手。你說，“周圍的人都瞧不起我，也幫不了我”，這可能是因為你原來的那位好友傷了你的心，才產生了這種多疑的想法。你不是有時也很羨慕那些天真活潑的同學們嗎？那就參加到他們中間去吧！不要因為對一個人反感，就覺得所有的人都不可信任了。不要自己站在集體之外，不去主動接近別人，象春蠶一樣“作繭自縛”，自己筑了一個殼鉆進去，躲起來，卻怪別人冷落了自己。主動接近同學，開始時可能不習慣，還會有點不好意思，但只要堅持下去，長此以往，你就會從那里得到溫暖，得到快樂，得到友誼。你會逐漸變得心胸開闊，視野遠大，體會到盡管現實中還有種種不順心的事，但生活是多么豐富多采，多么美好可愛！到那時，你會感到自己原來是多么“小心眼”。不信，你就試試看。

篇2

孤獨是黃昏過后，天空最后一絲光亮。

孤獨是風浪過后，大海最后一葉扁舟，

孤獨是暴雨過后，土地最后一株鮮花……

在2010年最后的尾聲里，害怕孤獨的我，終于要面臨孤獨了。

一路走來，不曾面臨過孤獨的我，此時面臨的是——被同學拋棄的孤獨。在去做早操的時候，本來我想跟同桌去，可是她又跟我們班的那位同學去，我一心只想跟同桌，可那位同學看見我就用很不歡迎我的語氣叫道：“走開?S，不要阻止我走路咯”聽到這句話以后，同桌似與那位同學一道地望了望我，我放開同桌的手匆匆地獨自一個人走去了。在做完早操好，學校又是老樣子，罰我們6到12班跑操場，我跑到那位同學里時，她不知跟我說了一句什么話，現在，我記不起那句話了?？傊蔷湓挷皇橇R我就是鄙視我的話了。（其實，她這樣對我，都是因為那天做完早操，我跟她手拉手回教室的時候，我不小心弄得她的手好痛，當時，我已向她道歉了）。

接著下來的可不就是——獨自一個人，上電腦課，自己一個人坐；上體育課，自己一個人去；去做早操，自己一個人走，在好好的一個班里，擁有著50多位同學，竟然沒有一位與自己一道？難道我自己很快樂嗎？每當我自己一個人走，心中的悲涼油然而生。其實，沒有了友誼與我一道的日子，我過得很痛苦，每天都很不開心，每天都是坐在座位里，悶悶不樂、心煩意亂，我假裝自己很堅強，可我騙得了我自己嗎？看書也看得不入神，其他人卻以為我很勤奮地學習。當我自己一個人走路時，我假裝自己很堅強，勸自己一個人走，不也很輕松、自在嗎？但這也騙不了我自己啊。我死撐著這一切，不讓自己掉下無辜的眼淚，事實證明，我真的沒掉下眼淚，我不也很堅強地撐著嗎？其實，我自己一個人的日子，我每天都在反省自己，每天都過得很痛苦，都很孤獨。

篇3

1. 輔導前后兒童孤獨量表的結果與分析

輔導前孤兒孤獨感的平均數為58.23±10.5，輔導后變成40.31±9.36，差異極為顯著。這表明，本次干預研究在降低孤兒的孤獨感效果非常明顯。

2. 輔導前后模擬家庭“親子”關系的自我評價

孤兒和模擬家長對“親子”關系的評價在輔導前、后也出現了較大的變化，模擬家長和孤兒都認為自己家的“親子”關系更融洽了。

3. 他人評價

老師們都表示：與過去相比，這些同學上課能集中注意力，回答問題積極了；在課間與同學交談的時間多了，而且能比較平和自信地跟同學們交流；課后作業完成的質量比以前高了,敢于問老師問題了，比以前有禮貌了。同班同學反饋：這些同學在班上受歡迎多了，不再吵吵鬧鬧的；能比較主動地跟同學說話了，不會沒名沒姓地就叫“喂”了；能與同學真誠地溝通了。

4. 自我評價

從孤兒自評問卷的結果來看，大部分成員認為本次輔導活動很有價值，對活動非常滿意，認為活動是有效的，增強了他們的自信心，對自己有了進一步的認識和了解，學到了積極的交往方法，與同學的關系有了很大改善，學習興趣有所提高。從模擬家長的自評問卷來看，大部分成員認為通過這次團體輔導，對自己所帶的孩子了解更多了，管教孩子的方法更多了，與孩子的沖突減少了，與孩子的溝通交流多了，孩子也會主動做一些力所能及的家務。

為探討適合孤兒心理健康發展的有效教育方式,以增進孤兒與模擬家長的親密關系為目標，我們對10名孤兒和其模擬家長進行了為期9周的“大手牽小手，同心一起走”為主題的團體心理輔導，以達到改善孤兒孤獨感的目的。并進行實驗前、后的兒童孤獨感測量與分析。

1. 輔導前后兒童孤獨量表的結果與分析

輔導前孤兒孤獨感的平均數為58.23±10.5，輔導后變成40.31±9.36，差異極為顯著。這表明，本次干預研究在降低孤兒的孤獨感效果非常明顯。

2. 輔導前后模擬家庭“親子”關系的自我評價

孤兒和模擬家長對“親子”關系的評價在輔導前、后也出現了較大的變化，模擬家長和孤兒都認為自己家的“親子”關系更融洽了。

3. 他人評價

老師們都表示：與過去相比，這些同學上課能集中注意力，回答問題積極了；在課間與同學交談的時間多了，而且能比較平和自信地跟同學們交流；課后作業完成的質量比以前高了,敢于問老師問題了，比以前有禮貌了。同班同學反饋：這些同學在班上受歡迎多了，不再吵吵鬧鬧的；能比較主動地跟同學說話了，不會沒名沒姓地就叫“喂”了；能與同學真誠地溝通了。

4. 自我評價

篇4

浩如煙海的典籍文章千百年的流傳其實是一個人為選擇的過程，污泥沉底不見天日，砂石俱下漸被埋沒，只有文質兼美的金玉之作才得天下人青睞，代代相傳。就如詞中皇帝李煜、南北朝文壇宗師庾信這樣的大腕也逃不過這個道理，其前期作品文辭不可謂不佳，廣為人知者有幾？但等他倆一成囚徒，一為游子后，一切就變了。誰不知“剪不斷，理還亂”，誰不知“問君能有幾多愁？一江春水向東流”？至于庾信，連老杜都說：“庾信文章老更成，凌云健筆意縱橫”呢。其中原因就在于他們的作品前期無“道”，后期有“道”。有道文章，乃芳草幽蘭人皆喜愛；無道文章，猶餿餡兒的包子狗不理，壞了瓤的金橘爛垃圾，誰不避而遠之？

此“道”為何物？

此“道” 與文血肉一體，與真善美水乳相容。它與時俱進，內容廣博：自然、童真、母愛，友情、節操、道義、民族精神……皆包含其中。具體而言：孔子“己所不欲，勿施于人”的寬厚，孟子“舍生而取義”的氣概，屈原“上下而求索”的執著，陶淵明不為五斗米折腰的清高，李白“欲上青天攬明月”的豪邁，杜甫“大庇天下”的情懷，范仲淹“先天下之憂而憂”的志向，周敦頤“出淤泥而不染”的情操，文天祥“留取丹心照汗青”的高義……都應是道。道還體現于《春》中的和諧美景，《背影》中的父子深情，《皇帝的新裝》中的童言無忌，《蘇州園林》中的文化意境，《端午日》中的健康民風……

我們教材中的作品，尤其是文學作品，就是因為有道蘊涵才得以流傳并被選入教材的。我們的閱讀，其實就是通過文這個載體與道碰撞、取舍、融合的過程。收獲淺的，受益于文辭，長些見識；收獲深的，則可冶情修身養性齊家乃至治天下。因此在理解作品文辭內容之外，我認為語文閱讀教學必須關注的長遠目標就是讓學生更好的尋覓、汲取文中之“道”。重文輕道是存櫝棄珠之為，我們教學中至少要做到文道并重。古時有人渴望得“道”成仙，今天我們的追求是讓學生得“道”成人。這是韓愈老先生千年前就派給我們的首要任務，也是今天素質教育的主要目標。

語文教師在閱讀尋道中應該注意哪些問題呢？下面是我的幾點淺識：

1 深淺取舍要有度

隨著時代的發展，很多道德標準、價值觀念也是有所發展變化的。如讀《出師表》，讀出諸葛亮對扶不起的阿斗的愚忠，對興復漢室不可為而強為之的不智，不能說是錯。但在引領學生閱讀時，我們還是要盡量遠避或者舍棄此類觀點，而將重點放在對諸葛亮“鞠躬盡瘁死而后已”報國之舉的探究上，放在品味諸葛亮報答劉備知遇之恩的真情和對劉禪諄諄教誨“不知所言”的慈父心腸上。因此對文本所蘊之道，應從社會需求和人的發展需要，結合學生年齡特點，或淺探，或深究，或慢品，或舍棄，取舍有度，不必面面俱到，慎要標新立異。

2 大處搜尋小處求

讀屈原、杜甫，我們一定要讀出家國大義，怎樣讓學生愛國呢？我們可以讓學生明白：作為老師，我們好好上課教育學生就是愛國；作為學生，他們遵守紀律認真學習就是愛國。讀《背影》、《散步》，一定要讀出父子深情傳統美德，怎樣讓學生孝敬父母呢？我們要讓學生明白：幼時兒歌所唱的給下班勞累的媽媽端上一杯水就是孝敬。所謂滴水藏海，小節蘊大德，萬丈高樓要一磚一瓦砌起，學生的生命素養會在這一點一滴中豐厚起來。

3 聯系生活好內化

我們都佩服陶淵明的隱逸情懷與高潔情操，但學生理解起來可能會有誤解。所以我們要聯系生活幫學生分析：陶的時代是污濁亂世，他只有隱居田園方能保其清；我們欣逢盛世，乾坤清朗，理應積極入世，展我風采。

4 熟讀深悟自生發

不斷聽到“語文課要上出語文味”這句話，有些好文章沒教出語文味，上成了政治思想課、品德修養課，往往就是教師“傳道”心切，忽視了“文”這個載體。所以閱讀時一定要讓學生真正深入文本，自主閱讀后生發自己的體驗和認識，再通過討論甚至爭辯來品悟探究。這樣我們才有可能得道。尤其是閱讀一些有爭議的作品時，更要讓學生讀出個性，允許質疑，允許有不同乃至相反理解。因為經典之所以為經典的一個原因就是能夠多元化解讀我們不能用單一的、概念的、臉譜化的標準來品評，更不能先入為主，用一些經不起時間考驗的定論來束縛學生。百人百模樣，千人千思想，要讓孩子們都展示出來。

當然，對這些不同的聲音，教師還是要客觀地辨別其公允、偏頗與否，給學生恰當引導。下附三例，供大家討論：

①程翔先生授《雷雨》一課，深入文本，巧設情景，師生互動，水到渠成地給我們展現了一個有罪過，但又滿腹真情、深深懺悔、無比痛苦的周樸園，一掃虛偽、奸詐等定論。學生真正深入了文本，懂得了人情，是得了利于一生的大道。

②讀《威尼斯商人》，學生讀出夏洛克無比貪婪丑惡可鄙可笑，結局大快人心，我認為不是得道。夏洛克是猶太民族的代言人，我們至少要讀出其境地遭遇和滿腔悲憤，心中生出憐憫之情。還有對劇中錯誤的民族主義傾向，應該如何處理？（這個問題學生可能不好理解。我們思考：當希特勒瘋狂滅絕猶太民族時，大多數德國人面對沒有人性的屠殺心安理得，莎翁這部廣為流傳的名著當時發揮了什么作用？是導人向善，還是誘惑人拿起屠刀？）

篇5

現在，很多人始終忙忙碌碌，卻沒有什么成就，這是為什么呢？因為他們只顧在無盡的忙亂中做事，沒有靜下心去思考錯與對、成與敗的道理，沒能及時調整人生的方向，最終浪費了寶貴的青春時光。

有一個尋寶的人在河邊找了很長的一段時間，整個人筋疲力盡，他坐在河床的石頭上，對他的伙伴說：“你看，我以撿了九十九萬九千九百九十九塊石頭了，卻還沒找到一塊寶石。我想放棄算了吧！”就在此時，他的同伴在腳底下見到了一塊寶石。這個小故事告訴我們，只要方向正確就一定要堅持，很多時候成功就在我們眼前，而我們卻放棄了。

學習是一生的大事。在學習與成長過程中，除了刻苦勤奮以外，我們務必先培養恭敬心與感恩心，必須革除只看別人的缺點的錯誤習性，這樣才能虛心去學習別人的優點，提升自己的才能。

金無足赤，人無完人，人人都有自身的缺點。然而，有的人多次重犯一樣的錯誤，更可悲的是，當重犯錯誤的時候，她們自己渾然不知。因此，當我們遇到失敗的時候，不能氣餒，但一定要告訴自己，不能被同一塊石頭絆倒兩次。

篇6

【關鍵詞】孤獨感;應對能力;團體輔導

大學階段是大學生綜合素質全面提升的重要時期，由于復雜的內外因素，大學生群體經常感受到孤獨。關注大學生的孤獨感現狀，探尋提升大學生孤獨感應對能力的團體輔導措施，對提高大學生心理健康水平，塑造健康和諧的人格具有重要的實踐意義。

一、對象與方法

（一）對象

在通過問卷測量篩選出24名狀態孤獨感受較強且自己無法應對的學生中隨機抽取12名被試為實驗組，另12名學生為對照組。

（二）方法

1.評估工具。（1）感情與社會孤獨量表。用于區分感情孤獨和社會孤獨。情感孤獨內部一致性系數為0.78，社會孤獨內部一致性系數為0.76。（2）UCLA孤獨量表。評價對社會交往的渴望與實際水平的差距而產生的孤獨，問卷的內部一致性系數為0.94。（3）狀態與特質性孤獨量表。用來區分境遇性孤獨和特質性孤獨。（4）團體滿意度評定量表。用于了解實驗組成員對團體輔導的看法和感受。

2.實驗方案。根據相關文獻設計“你從未被冷落，你我并不孤獨”團體輔導計劃。連續6周，每周1次，每次2小時。每次輔導活動都在接納、支持的團體氣氛中進行，利用游戲、分組討論、角色扮演等方式完成6個單元內容：①“我們在一起”（構建和諧團體氛圍，建立團體規范）;②“這就是我”（了解人際關系中的“我”，調整社交期望水平）;③“做情緒的主人”（宣泄獨處時的焦慮，正視孤獨體驗）;④“由陌生到親密”（學習人際交往技能，改變現實人際關系）;⑤“朋友一生一起走”（引導成員劃分自己的人際圈層次，增強人際信任感）;⑥“孤獨來了我不怕”（總結團輔過程，強化應對孤獨的信心）。

二、結果

（一）實驗前后實驗組與對照組感情與社會孤獨量表、UCLA量表總分得分比較

表一 實驗前后實驗組與對照組感情與社會孤獨量表、UCLA量

表總分得分比較（M±SD）

組別 實驗

前后 情感和社交孤獨量表

情感孤獨總分 情感和社交孤獨量表

社會孤獨總分 UCLA量表總分

實驗組 實驗前 15.75±3.467 13.50±2.393 51.67±4.459

實驗后 12.42±1.832 11.67±1.435 47.67±2.674

對照組 實驗前 14.42±3.825 12.33±1.435 48.42±3.554

實驗后 15.15±3.211 13.15±1.864 50.31±3.276

t1 0.895 1.448 1.965

t2 2.944** 2.276* 2.665*

t3 -0.523 -1.225 -1.385

t4 -2.587* -2.221* -2.197*

注：t1值為實驗組與對照組實驗前比較，t2值為實驗組實驗前、后比較，t3為對照組實驗前后比較，t4為實驗組與對照組實驗后比較;* p<0.05;** p<0.01。

對實驗前、后實驗組與對照組情感與社會孤獨量表兩個維度得分、UCLA量表總分進行比較，見表一。

由表一可知，在情感和社交孤獨量表及UCLA量表中，實驗組和對照組前測得分無顯著差異。實驗組在團體輔導活動前、后情感和社交孤獨量表的情感孤獨分量表中差異較為顯著（t=2.944，p<0.01），在社會孤獨分量表和UCLA量表總分上，得分差異顯著。對照組的前、后測量表分數無顯著差異。實驗組與對照組后測在情感和社會孤獨量表的兩個維度和UCLA量表總分上存在顯著差異。

（二）團體成員滿意度調查

對成員團體滿意度進行調查，所有團輔成員在不同程度上認為自己能在團體中敞開心扉，真誠的分享自己的苦惱;意識到理解、包容朋友的重要性;學會怎么與自己的孤獨情緒相處，改變了某些以前對孤獨事件的看法，學到了一些交往技巧，覺得這次團體經驗很有意義。其中88.9%的成員認為對自己越來越了解。

三、結語

（一）運用團體輔導提升大學生孤獨感應對能力是可行的

團體輔導效果評估及滿意度調查結果表明，團體輔導提升大學生孤獨感應對能力是可行的。在整個輔導過程中，帶領者引導成員通過體驗、分享等方式，調整成員對社會交往期望的定位，引導成員去信任他人，探索自己的人際財富。糾正成員的不合理信念，改變對引發自己孤獨感事件的認知。通過布置家庭作業，鼓勵成員把活動中獲得的策略和感悟運用到實際的學習生活中，解決現實生活中的問題。

（二）對狀態孤獨的對照組成員處理要謹慎

孤獨是主觀體驗，但當處在不和諧或挫折的客觀狀態時，易誘發人的孤獨感。對照組成員得知沒成為團輔成員后，體驗到被拒絕的挫折感，加深了他們的孤獨體驗，從量表前、后測得分的反應傾向中，可以察覺到對照組成員出現的情緒波動。因此，在完成實驗組的團體輔導活動后，應當對對照組的成員也進行團體或個體的輔導。

參考文獻

[1] 汪向東，王希林，馬弘，等.心理衛生評定量表手冊（增訂版）[M].北京：中國心理衛生雜社，1999.

[2] 樊富珉.團體心理咨詢[M].北京：高等教育出版社， 2005.

篇7

【摘要】 目的研究補腎中藥杜仲含藥血清對骨髓間充質干細胞(BMSCs)增殖及定向分化的影響。方法將第4代MSCs以5×106接種于9塊96孔板，3組，每組8孔;2塊6孔板，每板3孔，2 d后換液，加入誘導液。分為空白組、地塞米松組、杜仲組?？瞻捉M加入含10%胎牛血清(FBS)的 L-DMEM培養基繼續培養，地塞米松組在基礎培養基加入誘導劑(含β甘油磷酸鈉10mmol/L，地塞米松0.1 μmol/L，維生素C 50 mg/L)，杜仲組為含10%杜仲含藥血清的L-DMEM培養基。分別自加誘導液第1天起，采用MTT法測量96孔板細胞數，每天1塊板;在第10天取出1塊6孔板做ALP染色;第20天做6孔板茜素紅染色。結果杜仲含藥血清組OD值呈現出明顯的上升趨勢，而空白組和地塞米松組無明顯上升趨勢;第10天杜仲組及地塞米松組ALP染色陽性，第13天起可見白色鈣結節，第20天茜素紅染色陽性。結論杜仲含藥血清能促進骨髓間充質干細胞向成骨細胞分化，并刺激細胞增殖。

【關鍵詞】 杜仲; 骨髓間充質干細胞 ; 成骨細胞

Abstract：ObjectiveTo study the generation and directional differentiation of BMSCs induced by Duzhong(eucommia bark ) which can invigorate the kidney. MethodsInoculated quartus generation MSCs in nine ninety six-hole cell culture plates and two six-holes cell culture plates by 5×106 cells per milliliter， all the holes were pided into three groups named blank group， DXM group and Duzhong(eucommia bark ) group ， each group had eight holes or three holes， two days later， changed medium and added new medium. The medium of DXM group contained 10mmol/L β-sodium glycerophosphate， 0.1 μmol/L DXM， 50mg/L vitamin C， that of Duzhong(eucommia bark ) group contained 10% blood serum containing Duzhong(eucommia bark ). Measured cell number of 96-hole plates from the second day to the eighth day， one of the 6-holes plates was colored by AKP staining solution at the tenth day， the last one was colored by alizarin Bordeaux on the twentyth day.ResultsThe OD value of Duzhong(eucommia bark ) group rose obviously， blank group and DXM group had no obvious ascensus; on the tenth day DXM group and Duzhong(eucommia bark ) group were colored masculine; white calcium nodus could be seen on the undersurface of the holes 13days later， which could be colored by alizarin Bordeaux twenty days later. ConclusionBlood serum containing Duzhong(eucommia bark ) can induce BMSCs differentiate to osteoblast and stimulate growth of cells.

Key words：Duzhong(eucommia bark ) ; MSCs; osteoblast

間充質干細胞 (MSCs ) 是一種多潛能成體干細胞，主要存在于骨髓，還存在于胚胎時期間充質來源的骨外組織，如皮膚成纖維細胞、脂肪干細胞、骨骼肌的衛星細胞和血管內皮細胞等。骨髓MSCs ( BMSCs )是骨髓基質的組成成分，體外分離培養后，在一定的誘導條件下，具有向成骨細胞、軟骨細胞、神經細胞、脂肪細胞、心肌細胞等多向分化的能力。在骨組織工程的種子細胞來源主要有成骨細胞和BMSCs等。成骨細胞雖然具有良好成骨活性，但來源有限，大量分離獲取困難，體外大量擴增的潛力不足，難以滿足骨組織工程臨床應用的需要;BMSCs不僅具有良好的成骨細胞分化潛能和高成骨活性，而且具有強大的增殖潛能，來源方便，可以滿足自體組織工程。中醫認為，腎主骨，生髓。本實驗擬研究補腎中藥杜仲含藥血清對BMSCs增殖及定向分化的影響。

1 材料與儀器

1.1 動物 SPF SD大鼠50只，體重150～200g，雌雄不限，由廣州中醫藥大學實驗中心提供。

1.2 試劑 L-DMEM培養基、南美洲胎牛血清(FBS、?？寺?，β甘油磷酸鈉、地塞米松、維生素C、茜素紅、MTT(廣州威佳)，DMSO(sigma)，杜仲(產地云南)，堿性磷酸酶染液、堿性磷酸酶試劑盒(南京建成生物有限公司)，0.25%胰酶(GIBCO公司)。

1.3 器材75cm2培養瓶、96孔板、6孔板(Coning)，酶標儀(Thermo)，CO2培養箱 (Heraeus)，注射器針頭濾器，0.22μm濾膜(MILLIpore)，SIGMA-3K15離心機(sigma)。

2 方法

2.1 杜仲含藥血清的制備取杜仲藥材粗粉150g，加70%乙醇10倍量，加熱回流兩次，1 h/次，過濾，合并濾液，濾液減壓濃縮至300ml，室溫冷卻，4℃冰箱保存備用。將中藥藥液稀釋至0.3g生藥/ml灌胃，1 ml/次，2次/d，連續給藥4 d，最后一次給藥后1 h經腹主動脈采血，室溫靜置3 h后置4℃冰箱過夜，2 500 r/min離心20 min，收集上清液，針頭濾器過濾除菌，置-20℃保存備用。

2.2 培養基配制空白組為含10%FBS的 L-DMEM培養基;地塞米松組在空白組基礎上加入誘導劑，其終濃度分別為β甘油磷酸鈉10 mmol/L，地塞米松0.1umol/L，維生素C 50 mg/L;杜仲組在L-DMEM培養基中加入10%杜仲含藥血清。

2.3 MSCs分離培養SD大鼠經腹腔10%水合氯醛0.7ml麻醉后，75%酒精浸泡頸部以下軀體5 min，無菌條件下取出雙下肢股骨和脛骨，修潔軟組織后，咬骨鉗修剪骨端，暴露髓腔，10 ml注射器吸取含10%胎牛血清的L-DMEM培養基反復沖洗髓腔，直到骨質外觀微微透亮。75cm2培養瓶收集骨髓沖洗液，放37℃、5%CO2孵箱培養。每3天換液1次。

2.4 MSCs傳代當細胞長滿瓶底90%后，0.25%胰酶消化后，以1∶3比例傳代。

2.5 MSCs誘導分化取P4細胞，當細胞長滿90%后，0.25%胰酶消化制備細胞懸液后，以每孔150μl ，細胞密度5×106左右接種于9塊96孔板中，3組，每組8個復孔;2塊6孔板，每板3孔，每孔2ml。當細胞長滿瓶底80%以上后換液，加入成骨誘導液。

2.6 MTT測量細胞數從加入誘導液24 h后開始測量，每天測一塊96孔板。向96孔板每孔內加入5 mg/L的MTT 15 μl，置37℃孵箱培養4 h后，吸出培養液，顯微鏡下可見孔底有黑色甲簪沉積，加入二甲亞楓(DMSO)150μl，搖床振蕩10 min后，酶標儀上測量490nm處OD值。取各組平均值繪制細胞增殖曲線。

2.7 堿性磷酸酶染導培養第10天取出1塊6孔板，吸去培養基， PBS清洗2遍，加入固定液固定10 min后;加入底物，37℃水浴15min，水洗;再加入蘇木素復染10 min，水洗，晾干，鏡下觀察。

2.8 茜素紅染導培養第20天取出1塊6孔板，吸去成骨細胞誘導液， PBS 洗3 次，95%酒精固定 10min， 加入 0. 1%茜素紅- Tris- HCL (pH 8. 3) 37℃，30 m in， 鏡下觀察結果。

3 結果

3.1 細胞形態學觀察MSCs為成纖維樣細胞，貼壁后成梭形(見圖1a)。加入誘導液后，空白組細胞無明顯變化;地塞米松組第5天開始出現細胞成聚集生長，細胞體積增大(見圖1b);杜仲含藥血清組從第3天開始出現細胞成聚集生長，細胞體積增大(見圖1c)。12 d后地塞米松組和杜仲組見明顯結節形成(見圖1d)。

圖1 細胞形態學觀察

3.2 細胞增殖曲線見圖2。

圖2 細胞增殖曲線

可見當細胞貼壁長滿瓶底后，由于接觸抑制，空白組處于一條平緩的曲線，地塞米松組細胞增殖不如杜仲組明顯。

3.3 堿性磷酸酶染色第10天，經細胞堿性磷酸酶染色，可見細胞內藍色顆粒，細胞聚集區成紫黑色。(見圖3)。

圖3 堿性磷酸酶染色(10×10) 圖4 茜素紅染色(10×10)

3.4 茜素紅染色第20天，茜素紅染色可見紅色結節堆積(見圖4)。

4 討論

4.1 杜仲含藥血清的制備血清藥理學在某種程度上可以克服中藥制劑本身的理化性質等不確定因素對實驗結果的干擾， 而且相對接近藥物在體內生物轉化的真實過程。即其具有兩大優點：①體現復方體內生化轉化效應;②克服藥物本身理化性質對實驗的直接干擾[1]。選用同源性的動物制備血清，可以減少因種屬差異而造成的免疫反應，提高實驗結果的可靠性[2]。有人認為含藥血清中原有許多酶、抗體、補體、細胞因子及其它生物活性物質， 它們對體外培養的細胞、病毒、病原菌以及用于體外實驗的組織器官可能產生直接影響而干擾實驗結果， 影響藥物療效的客觀評價。血清滅活后可排除這些干擾因素對實驗結果的影響， 有助于減少血清的非藥理性干擾[3]。但中藥成分復雜，在體內的藥理作用復雜，非滅活血清更能體現藥物在體內的作用，且實驗過程中未見細胞毒性作用。

4.2 原代MSCs分離培養常用于MSCs分離的方法主要采用密度離心法和全骨髓法，而流式細胞儀分離法與免疫磁珠法操作繁瑣、費用昂貴，并且對細胞活性影響較大，使用受到限制。本實驗采用全骨髓貼壁分離法，得到形態均勻一致的MSCs。離心法是根據間充質細胞與其他細胞密度不同，用分離液分離的方法。全骨髓法是根據間充質細胞能在培養瓶中貼壁生長的特點進行分離，實驗發現與密度離心法所獲細胞純度無統計學差別[4]。全骨髓法操作簡單、設備要求低、費用低廉，血液成分的存在以及其所含的生長因子與促貼附物質提供了一個穩定的培養環境和營養物質，有利于MSCs的貼附與增殖[5];研究表明擴增一代、兩代后細胞純度可以達到95%和98%[6]。也有人將不同的分離方法合用[7]發揮更好的作用。

4.3 杜仲含藥血清誘導MSCs的臨床意義骨組織工程學具有廣闊的臨床應用的前景，成為現代骨科學的研究熱點。BMSCs作為目前最為理想的骨組織工程種子細胞，對其作用研究的中心任務則是如何使之在盡可能簡單的條件下定向分化為成骨細胞，進而轉化為成熟的骨細胞。

目前對MSCs定向分化常用的誘導劑由地塞米松、維生素C、β-甘油磷酸鈉組成。而在體外培養中，地塞米松對細胞增殖具有抑制作用[8]，與本實驗所見相同;臨床上地塞米松具有引起感染、骨壞死、骨質疏松等副作用，將會限制MSCs移植后在體內的作為誘導劑的運用。杜仲具有補腎、強筋骨的作用，實驗證明具有促進MSCs增殖和誘導MSCs向成骨分化的作用。長期的臨床運用中，未見杜仲的毒副作用，將其作為體內誘導劑具有廣泛的臨床運用前景。

總之，目前對于MSCs作為骨組織工程種子細胞的研究，大多還處于實驗階段，如何能在較短時間內得到足夠的MSCs，并運用簡單的方法誘導其向成骨分化，是目前研究的重點。盡管具有補腎、強筋骨作用的杜仲促進MSCs分化和增殖作用的機制尚有待進一步研究，但將其作為MSCs分化誘導劑，用于MSCs移植治療骨折延遲愈合、不愈合、骨壞死等具有光明的前景。

參考文獻

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[6] Pittenger MF， Mackay AM， Beck SC，et al. Multilineage potential of adult human mesenchymal stem cells [J].Science， 1999，184(5411):143.

篇8

一、克服自卑由于自卑而覺得自己不如別人，所以不敢與別人接觸，從而造成孤獨狀態。這如同作繭自縛，自卑這層繭不沖破，就難以走出孤獨。其實，人與人不可相比，每個人都有長處和短處，人人都是既一樣又不一樣。所以，一個人只要自信一點。就會鉆出自織的繭，從而克服孤獨。

二、多與外界交流獨自生活并不意味著與世隔絕，雖然客觀上與外界交流造成困難，但依然可以通過某些方式達到交流的目的。如當你感到孤獨時，可翻翻舊日的通訊錄，看看你的影集，也可給某位久未聯系的朋友寫信、掛個電話或請幾個朋友吃頓飯、聚一聚。當然與朋友的交往和聯系，不應該只是在你感到孤獨時，要知道，別人也和你一樣，需要并能體會到友誼的溫暖。

三、“忘我”地與人交往與人們相處時感到的孤獨，有時會超過一個人獨處時的十倍。這是因為你和周圍的人格格不入。例如，你到一個語言不通的地方，由于你無法與周圍的人進行必要的交流，也無法進入那種熱烈的情感中，所以，你在他人熱烈的氣氛中會感到倍加孤獨。因此，在與他人相處時，無論是什么樣的情境下，都要做到“忘我”，并設法為他人做點什么，你應該懂得溫暖別人的同時，也會溫暖你自己。

四、享受大自然生活中有許多活動是充滿了樂趣的。只要你能夠充分領略它們的美妙之處，就會消除孤獨，如有些人遇到挫折，心情不好，但又不愿與別人傾訴時，常常會跑到江邊或空曠的田野，讓大自然的清風盡情地吹拂，心情就會逐漸開朗起來。

篇9

當然，也遇到過非常讓我尷尬的事情。有的時候也會讓我傷心難過。

最近這幾個星期，我經歷過好多的事情，都讓我非常的為難，讓我感覺聽不懂。

每一次聊著天，他們便會消失，突然的消失，讓人感到害怕，心里感到恐懼。

我真的很討厭，討厭他們突然消失，消失得無影無蹤。

你知道嗎？他們消失的那一刻，讓我感到了一股孤獨，涌上了我的心頭。孤獨，又是孤獨，我最討厭的便是孤獨啦。從小到大，我一直都是孤獨的，他跟其他的不一樣，其他的，慣了，便會不再害怕，可是孤獨不一樣啊，時間再長久，他也還是害怕。

我曾想過，是不是有一天，我將不在孤獨，不再害怕。

篇10

關鍵詞　孤獨感　測量

大多數人都體驗過孤獨的痛苦。臨床及有關統計資料表明，孤獨感已成為現代人的通病。這種現象也是人本主義心理學家對孤獨感關注的原因。“我相信今天的人們可能比歷史上任何一代人更清楚地意識到自己內心深處的孤獨感”[1]。一些人本主義心理學家估計隨著社會變得越來越富有，這種對孤獨感和人與人之間關系的關注將繼續增長。一些存在主義心理學家相信孤獨感反映了對存在的情感疏離更深層次的關注和對有意義生活的追求。本文綜述人本主義對孤獨感的研究。

1　孤獨感的界定和測量

孤獨和孤立的含義是不同的。孤獨是個體對自己社會交往數量的多少和質量好壞的感受，“當一個人的社會關系網絡令他滿意的程度低于他的期望時，孤獨感就產生了”[2]。你可能很少與人交往，但如果你對此滿意將不會感到孤獨;相反，你可能有許多朋友，但仍感到有更多更深友誼的需要，這樣便會產生孤獨。對孤獨感的這種界定，幫助我們理解為什么有些人雖然遠離人群，生活卻感到非常快樂;而一些人盡管被人群所包圍，而且經常與他人交往卻經歷著孤獨。現在有許多大學生抱怨身邊沒有多少真正的朋友。對這些大學生來說，與某些人進行坦誠的交往的需要不能滿足時，將產生強烈的孤獨感。從這個意義講，孤獨是一種個人體驗。通常人們移居到一個新的城市或剛到一個新的工作環境，常會產生孤獨。有研究發現，盡管每個人都會感到孤獨，而且孤獨感的來去隨著環境的變化而變化，據此，認為孤獨感是一種人格特征。有人設計了一些人格量表來測量人們對孤獨感的一般感受性，利用這些測題進行研究表明，今天感到孤獨的人幾個星期之后同樣也感到孤獨。Schmidt和Sermat[3]設計了一份量表(見附錄)來測量四種情況下人們的孤獨感，即友誼、與家庭的關系、與異性的關系以及與團體的關系。用這個量表對某大學進行測驗表明，大學生在所有項目上的平均得分通常為6到7分，得分越高說明越孤獨;而在4種關系中，友誼類得分最高，其次為與團體的關系。可看出人際關系問題仍是當前大學生心理健康的主要障礙。

2　產生孤獨感的原因

研究者明確了引起人們孤獨感的兩種人格特征。有孤獨感的人傾向于在社交時對他人和自己給予嚴厲的、苛刻的評價。許多有孤獨感的人缺乏一些基本的社交技能，從而使他們無法與他人建立持久的關系。

2.1　對他人和自我的消極評價　孤獨感與其他人格特征的相關研究，生動地刻畫出有孤獨感的人那張毫無生氣的沉悶的面孔。研究者發現[4]，在孤獨項目上的得分與在害羞、自我意識、低水平自尊上的得分相關。孤獨的人可能更內向、焦慮，對拒絕反應更敏感，并且更容易抑郁[5]。孤獨的人在朋友身上花費更少的時間，不經常約會，也很少參加集會，沒有什么親密的朋友。什么使得孤獨的人產生這種不友好的表現?可能是在人際交往時，他們對自己和對方的評價極端消極[6]。這一結論，也幫助解釋了為什么對許多身處大學校園的學生來說，孤獨仍然是一個存在的問題。

2.2　基本社交技能的缺乏　社會技能是指如何進行令雙方都覺得有價值并感到愉快的交談的知識。常有這樣的人群樂意與別人交往，但一旦進行比較重要的而且時間較長的交談就會出現困難，可能缺乏基本的社交技能。正如以下幾個研究所提示的，由于缺乏社交技能使得孤獨的人陷入了孤獨的惡性循環，而發展社交技能的最佳途徑是進行交談練習。由于在建立人際關系上有困難，缺乏社交技能的人更沒有機會去訓練社交技能，所以，難以有持久的朋友。由于考慮到交往模式，Jones及其同事通過與孤獨的和非孤獨的人分別進行交談，發現在孤獨項目上得分高的人對他們的伙伴不太感興趣，關于對方的問題提得很少，常常不能對于對方所說的加以評論，也較少向對方提供有關自己的信息;相反，這些孤獨者更多的是談論自己并且常介紹新的與對方的興趣無關的話題，傾向扮演一個“被動消極的社交角色”[7]，也就是說，在交談中不愿付出太多努力。所以，我們常常感到與孤獨者交往很乏味，他們不知道這種交往方式是怎樣趕跑了潛在的朋友。一些研究者考察孤獨者和非孤獨者使用自我暴露的方式[8]，結果發現，那些孤獨者不是很清楚什么時候該自我暴露，以及暴露多少是合適的這一社會準則。所以，當別人期望他們多暴露時，他們卻暴露得很少;而當別人不期望他們過多暴露時，他們卻暴露得太多。結果，在別人眼中他們是冷淡的或不可思議的，別人也據此作出相應的反應。當研究者考察孤獨者和非孤獨者自我暴露的量多少時，也得到相類似的結果，孤獨者通常更少暴露自己。

孤獨者因為采用消極的交往方式，并缺乏必要的社交技能，而難以與他人建立親密的友誼。與這些人交往常常讓人感到不愉快，于是他們很難建立有助他們發展社交技能的人際關系，因而難以擺脫孤獨。人本主義心理學認為，通過基本社交技能的訓練，可以使孤獨者走出孤獨的惡性循環，并已廣泛應用于心理咨詢與治療的實踐中。這些方案提供一定的希望，即孤獨不必陷入抑郁的惡性循環之中而不能自拔[9]。

附錄：孤獨感的測量

在下面的測量中，凡符合你的實際情況的描述，你就在該描述左邊的橫線上寫上T(正確)，凡不符合你的實際情況的描述，你就在該描述的左邊橫線上寫上F(錯誤)。

——1.我認為自己與家庭成員的關系密切。

——2.我能夠在我的愛人或配偶(男朋友，女朋友，丈夫或妻子)面前談論我的問題和焦慮。

——3.我認為自己與我所生活的團體中其他人很不一樣。

——4.我很少與我的家庭成員交往。

——5.我與我的家庭相處不太好。

——6.我現在正擁有一份浪漫的愛情或婚姻，我們雙方都為了和諧相處而付出了真誠的努力。

——7.我與家庭中大多數成員保持著良好的關系。

——8.我覺得自己在需要幫助時不能向周圍的朋友求援。

——9.我生活的團體中似乎沒有一個人對我特別關心。

——10.我自己與朋友保持親密的關系。

——11.我很少從我的戀人或配偶那里得到我所需要的感情保障。

——12.我覺得自己在我居住的社區有我的“根”(一種歸屬感)。

——13.在我生活的城市我的朋友不多。

——14.我沒有在我需要的時候能幫助我的鄰居。

——15.我從我的朋友那里得到了大量的幫助和支持。

——16.我的家里人很少真正注意聽我所說的話。

——17.很少有朋友以我所期望的方式理解我。

——18.當我遇到麻煩時，我的戀人或配偶能夠覺察到，并鼓勵我把它說出來。

——19.我覺得自己在我目前的愛情或婚姻中受到了好的評價和尊重。

——20.我了解我周圍那些理解我并且與我觀點和信念相一致的人。

計算你的得分，按照以下標準每答對一題給一分(所有題目及其相配的答案分成四類)。友誼類：8—T，10—F，13—T，15—F，17—T。家庭關系類：1—F，4—T，5—T，7—F，16—T。浪漫的/性的關系：2—F，6—F，11—T，18—F，19—F。與團體的關系：3—T，9—T，12—F，14—T，20—F。

黃潔華(515063 廣東省汕頭大學高教所)

參考資料

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[2]Peplau,L.A.,Russell,D.,& Heim,M.The experience of loneliness.In I. Frieze,D.Bar-Tel,& J.Carroll(Eds.),New approaches to social problems.San Francisco.Jossey-Bass,1979,53～78

[3]Schmidt,N.,& Sermat.V.Measuring loneliness in different relationships.Journal of Personality and Social Psychology,1983,44:1038～1047

[4]Jones,W.H.,Freemon,J.E.,& Goswick,R.A. The persistence of loneliness:Self and other determinats.Journal of Personality,1982,49:27～48

[5]Weeks,D.G.Michela,J.L,Peplau,L.a & Bragg,M.E.Relation between loneliness and depression:A structural equation analysis.Journal of Personality and Social Psychology,1980,39:1238～1244

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[7]Vitkus,J.,& Horowitz,L.M.Poor social performance of lonely people:Lacking a skill or adopting a role? Journal of Personality and Social Psychology,1987,52:1266～1273