加拿大一枝黃花藥理作用

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1器材

1.1動物清潔級昆明種小鼠，體重（20±2）g，雌雄兼用，由中科院上海實驗動物中心提供（動物合格證號：SCXK滬2003-0003）。

1.2藥物加拿大一枝黃花，200409采于上海，由上海交通大學藥學院李曉波教授鑒定。干燥全草粉碎過40目篩，95%乙醇滲漉提取，回收乙醇后得提取物，干燥備用。

1.3試劑吲哚美辛片，上海辛帕斯制藥有限公司，批號050601；阿司匹林片，上海信誼百路達藥業有限公司，批號0554010；鹽酸依普拉酮片，上海衡山制藥有限公司，批號040201；氨水，分析純，國藥集團化學試劑有限公司，批號050120；其他試劑均為國產分析純。

1.4儀器YLS-6A智能熱板儀，山東省醫學科學研究院設備站；754型紫外分光光度計，上海精密科學儀器有限公司。

1.5統計軟件SPSS11.5，進行One-WayANOVA檢驗。

2方法

2.1鎮痛作用研究［6］

2.1.1對熱刺激小鼠痛閾值的影響將健康雌性小鼠置于(55±0.5)℃熱板儀上,以小鼠舔后足反應的潛伏期為痛閾指標,記錄小鼠痛閾值，剔除痛閾值小于5s或大于30s或跳躍的小鼠,取預選合格的小鼠間隔5min再重新測定痛閾值一次，取兩次痛閾值的平均值作為該鼠給藥前的平均痛閾值。將符合標準的40只小鼠隨機分為蒸餾水組、吲哚美辛組（50mg/kg）、加拿大一枝黃花低劑量組（相當于生藥2g/kg）、加拿大一枝黃花高劑量組（相當于生藥6g/kg）4組。灌胃給藥，觀察并記錄給藥后30，60，90，120min的痛閾值，痛閾值大于60s的以60s計。

2.1.2對醋酸致小鼠扭體反應的影響健康小鼠40只，雌雄各半，隨機分為蒸餾水組、阿司匹林組（200mg/kg）、加拿大一枝黃花低劑量組（相當于生藥2g/kg）、加拿大一枝黃花高劑量組（相當于生藥6g/kg）4組。灌胃給藥30min后，腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2ml/只，觀察并記錄小鼠首次扭體時間和15min內小鼠的扭體次數。按下式計算鎮痛率：

鎮痛率（%）=蒸餾水組扭體次數-試藥組扭體次數蒸餾水組扭體次數×100%

2.2鎮咳作用研究［6］40只健康小鼠，雌雄各半。隨機分為蒸餾水組、鹽酸依普拉酮組（20mg/kg）、加拿大一枝黃花低劑量組（相當于生藥2g/kg）、加拿大一枝黃花高劑量組（相當于生藥6g/kg）4組。灌胃給藥30min后，將每只小鼠置于自制的引咳裝置中，使小鼠接受飽和氨水的噴霧刺激5s，從噴霧氨水開始計時，以腹肌收縮，張大嘴為準，觀察和記錄小鼠的咳嗽潛伏期和2min內咳嗽次數。

2.3祛痰作用研究［7］健康小鼠40只，雌雄各半。隨機分為蒸餾水組、氯化銨組（2g/kg）、加拿大一枝黃花低劑量組（相當于生藥2g/kg）、加拿大一枝黃花高劑量組（相當于生藥6g/kg）4組。。每只小鼠灌胃給藥30min后，腹腔注射5%酚紅生理鹽水溶液10ml/kg，30min后脫臼處死，剝離氣管周圍組織，剪下自甲狀軟骨至氣管分支處的一段氣管，放入盛有1ml蒸餾水的試管中，再加入1mol/L氫氧化鈉溶液0.1ml，以1ml蒸餾水/0.1ml氫氧化鈉溶液為空白，546nm處測量溶液的吸光度，以吸光度A作為評價指標。

2.4急性毒性實驗［6］LD50的測定：健康小鼠30只，雌雄各半，按體重隨機分為5組，每組6只，實驗前禁食12h，可自由飲水；灌胃給藥，劑量分別為：0.1，0.5，2.5，12.5，62.5g/kg，連續觀察7d，每天記錄小鼠體重及死亡數目，并觀察小鼠反應情況。最大耐受量實驗：健康小鼠20只，雌雄各半，按體重隨機分為蒸餾水組、加拿大一枝黃花組（81.0g/kg），實驗前禁食12h，可自由飲水；灌胃給藥，連續觀察7d，每天記錄小鼠體重及死亡數目，并觀察小鼠反應情況。7d后處死全部小鼠，肉眼觀察心、肝、脾、肺、腎等臟器的變化。

3結果

3.1鎮痛作用

3.1.1對熱刺激小鼠痛閾值的影響

結果見表1。與蒸餾水組比較，加拿大一枝黃花高、低劑量組小鼠的痛閾值均無明顯提高。表1加拿大一枝黃花對熱刺激小鼠痛閾值的影響(略)

3.1.2對醋酸致小鼠扭體反應的影響

結果見表2。由表2可見，加拿大一枝黃花明顯延長了醋酸致小鼠扭體的出現時間，抑制其扭體次數，高劑量組的鎮痛率與陽性藥效果相近，說明加拿大一枝黃花具有明顯的鎮痛作用。表2加拿大一枝黃花對醋酸致小鼠扭體反應的影響(略)

3.2鎮咳作用

結果見表3。與對照組相比，高、低劑量的加拿大一枝黃花均能顯著抑制氨水誘發小鼠的咳嗽潛伏期和咳嗽次數，提示其具有鎮咳作用。表3加拿大一枝黃花對氨水致小鼠咳嗽反應的影響(略)

3.3祛痰作用

結果見表4。由表4可見高、低劑量的加拿大一枝黃花均能顯著增加小鼠氣管的酚紅排泌量，效果優于氯化銨，且呈量-效依賴關系，提示本品能提高小鼠的氣管分泌功能，具有祛痰作用。表4加拿大一枝黃花的祛痰作用(略)

急性毒性實驗在較大劑量（62.5g/kg）下小鼠無死亡，未能得出LD50，故改做最大給藥量實驗評價其急性毒性，結果實驗給藥至81.0g/kg也未引起小鼠死亡；除自發活動輕度減少外，未觀察到其他急性毒性反應，即最大耐受量可達81.0g/kg（相當于人體常用藥量的324倍）。同時與蒸餾水組相比對小鼠體重增加無明顯影響（見表5），說明不影響小鼠的正常生長，可認為加拿大一枝黃花無明顯急性毒性。表5加拿大一枝黃花對小鼠體重的影響(略)

4討論

一枝黃花屬植物廣泛分布于北半球，我國原產4種，其中一枝黃花SolidagodecurrensL.和毛果一枝黃花SolidagovirgaureaL.在我國均以全草入藥，有退熱行血、疏風解毒、消腫止痛的功效。加拿大一枝黃花為生物入侵種，近年在我國部分地區迅速蔓延，我國規定其為林業上的檢疫性有害植物，國內未見有藥用報道。但本種也是歐美著名植物藥，已被歐洲藥典收錄，國外對其化學成分和藥理作用方面的研究較多，而國內有關加拿大一枝黃花的研究相對較少，體內藥理作用研究尚未見報道，因此對其進行藥理作用研究具有重要意義。本文從多個方面對其進行了藥理作用研究，首次發現國產加拿大一枝黃花具有明顯的鎮痛、鎮咳和祛痰作用，且無明顯毒性，與國產同屬植物一枝黃花SolidagodecurrensL.具有相類似的功效，為合理對待這一入侵物種提供了一定的依據。

加拿大一枝黃花原產于北美，作為一種庭院裝飾植物于18世紀首次從美洲東北部引入歐洲。在1850年左右從中歐開始傳播,在19世紀50年代遍布歐洲。據報道，歐美產加拿大一枝黃花具有廣泛的藥用前景，地上部分具有殺菌消炎,增強腎臟功能的作用，用于治療外傷、慢性腎炎、膀胱炎、尿結石、風濕等疾病,并可用于糖尿病的輔助治療［8］；其揮發油具有促進循環，消除疲勞的作用。近年的研究還發現在其提取物中具有多種能抑制DNA聚合酶和蛋白質合成酶活性的物質［9］。國產加拿大一枝黃花是否具有相同功效，值得深入研究。國產加拿大一枝黃花如能在我國藥用，一方面可以變廢為寶，另一方面還可有效控制其蔓延，因此加強國產加拿大一枝黃花的藥理作用研究，具有非常重要的意義。

【參考文獻】

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［2］ApátiPál,Houghton,PeterJ,etal.HPLCinvestigationofantioxidantcomponentsinSolidagoherba［J］.ActaPharmHung,2004,74（4)：223.

［3］李振宇，解炎.中國外來入侵種［M］.北京：中國林業出版社，2002：170.

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［6］徐叔云，卞如濂，陳修，等.藥理實驗方法學,第3版［M］.北京：人民衛生出版社,2002：882，1362，227.

［7］陳奇，沈映君，孫學蕙，等.中藥藥理實驗［M］.貴陽：貴州人民出版社，1988：158.

［8］McCuneLM,JohnsT.AntioxidantactivityinmedicinalplantsassociatedwiththesymptomsofdiabetesmellitususedbytheindigenouspeoplesoftheNorthAmericanborealforest［J］.JEthnopharmacol，2002，82（23)：197-205.

［9］ChaturvedulaVS,ZhouBN，GaoZ，etal.NewlupanetriterpenoidsfromSolidagocanadensisthatinhibitthelyaseactivityofDNApolymerasebeta［J］.BioorgMedChem，2004，12（23)：6271.