舒督丸提取工藝分析論文

導語：舒督丸提取工藝分析論文一文來源于網友上傳，不代表本站觀點，若需要原創文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

【摘要】目的優選研究舒督丸的提取溶劑和提取工藝條件。方法用小鼠醋酸扭體法比較方劑水提物、乙醇提物的鎮痛作用強度，優選提取溶劑；以柚皮苷提取率和水總浸出物提取率為評價指標，對提取工藝進行正交試驗，優選合理的提取工藝參數。結果以水為提取溶劑其鎮痛作用最顯著。最佳提取工藝條件是提取4次，每次提取時間分別為3，2，1，1h，每次加水量分別為6，4，4，2倍。結論確定的提取工藝條件能使有效成分被充分提取，保證藥效與制劑質量。

【關鍵詞】舒督丸提取溶劑提取工藝柚皮苷

StudiesontheExtractionProcessofShuDuPill

Abstract：ObjectiveToselecttheextractionsolventandconditionsofShuDuPill.MethodsAceticacidwrithingmethodonmicewasusedtocomparetheanalgesiceffectsofthewaterextractandthealcoholextractorthogonaldesignwasusedtooptimizethereasonableextractionconditionswiththeevaluationmarkerssuchasnaringinextractionrateandwaterextract.ResultsTheanalgesiceffecttreatedwiththewaterextractismoresignificant.Theextractionconditionswereasfollows：themedicalmaterialwassoakedin6，4，4，2timeswaterandboiled4times,3，2，1，1hoursforeachtime.ConclusionTheextractionconditionsestablishedcanmaketheextractionrateofactivecomponentshighandmakethetherapyandqualityoptimal.

Keywords：ShuDuPill；Theextractionsolvent；Theextractionprocess；Naringin

舒督（濃縮）丸是治療強直性脊柱炎的中成藥，由骨碎補、桑寄生、狗脊、絡石藤、牛膝等藥味組成。根據強直性脊柱炎的病因與臨床癥狀，方劑中藥物的抗炎鎮痛、活血祛瘀、調節免疫功能等是其主要藥理作用。據文獻報道［1～3］，骨碎補中的柚皮苷與絡石藤中的木犀草素等有抗炎作用；桑寄生中的槲皮素等具有鎮痛作用；牛膝中的多糖等成分有改善機體免疫功能等多種藥理活性。這些成分的溶解性較復雜。根據強脊炎疼痛癥狀突出的臨床表現，本研究以小鼠鎮痛藥效試驗為指標，對該方劑的提取溶劑進行了篩選，并以柚皮苷提取率和水總浸出物提取率為評價指標，采用正交設計優選其提取工藝條件。

1器材

1.1儀器與試藥

Agilent1100高效液相色譜。柚皮苷中國藥品生物制品鑒定所（批號：110722200309，含量測定用）。所用試劑均為分析純，含量測定試劑為色譜純。藥材購于河南省藥材公司，骨碎補藥材中柚皮苷含量為0.75%。

1.2實驗動物

昆明種小鼠，河南省實驗動物中心提供（許可證號：SYXK（豫）20050012），雌雄各半，體重18～22g。河南省食品藥品檢驗所動物室許可證號：SYXK（豫）20050011。動物飼料為標準顆粒飼料，購自北京科奧協力飼料有限公司（許可證號：SCXK（京）20050007）。

2方法與結果

2.1提取溶劑的選擇

2.1.1供試樣品的制備

按處方比例稱取藥材兩份，一份水煎煮兩次（6倍量/2h，4倍量/1h），另一份75%乙醇回流2次（6倍量/2h，4倍量/1h）過濾，合并藥液，減壓濃縮，分別制成1.0g原生藥/ml的流浸膏，密封，滅菌，備用。

2.1.2藥效試驗

取小鼠60只，雌雄各半，隨機分組，灌胃給藥，用醋酸扭體法比較不同溶劑提取物的鎮痛效果［4］。結果見表1。表1舒督丸不同溶劑提取物對小鼠疼痛的抑制作用（略）

藥效試驗結果顯示，舒督丸不同溶劑提取物均可抑制小鼠疼痛，其中以水提物鎮痛效果最好。因此，確定以水為提取溶劑。

2.2提取工藝因素的優選

2.2.1柚皮苷的含量測定方法［5］

2.2.1.1色譜條件

ZOPBOXISBC18（4.6mm×200mm，5μm）色譜柱；流動相甲醇醋酸水（35∶4∶65）；檢測波長283nm。

2.2.1.2對照品溶液的制備

精密稱取柚皮苷對照品20mg，甲醇定溶于100ml量瓶中，精密量取3ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得（每毫升含柚皮苷60μg）。

2.2.1.3供試品溶液的制備與測定

取含相當于骨碎補0.3g的提取液，稀硫酸調pH值3～4,水浴蒸干，加甲醇溶解并轉移至10ml量瓶中至刻度，搖勻，即得供試品溶液。分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5μl,注入液相色譜儀,于283nm處測定并計算柚皮苷含量，計算提取率。

2.2.2水總浸出物的測定方法

分別精密量取水提藥液各25ml，按浸出物測定法（《中國藥典》2005年版Ⅰ部附錄XA）操作，以25ml提取液相當于原藥材量作為分母，以干燥品計算供試品中水溶性浸出物的浸出率。

2.2.3提取工藝因素與水平的正交實驗選擇加水量、提取時間和提取次數3個因素，每個因素選擇3個水平，見表2。用L9（34）正交表進行正交實驗設計。表2實驗因素水平表（略）

取復方飲片9份，每份354g，按表3正交表設計方案進行回流煎煮提取，合并提取液，濾過，吸取藥液適量，測定柚皮苷含量和水總浸出物量，計算提取率，見表3。表3舒督丸提取工藝正交實驗方案與結果（略）

2.2.4舒督丸提取工藝因素的正交試驗結果與分析結果見表3～4。表4舒督丸提取工藝正交試驗結果方差分析（略）

由綜合評分直觀分析可知，上述因素中，B因素影響最明顯，應取3水平；C因素次之，應取3水平；A因素應取2水平。

由上表可看出，顯著影響提取效率的工藝因素是B。取重要因素較高水平的組合，得到最佳工藝條件為：A2B3C3。即提取4次，每次分別為3，2，1，1h，每次加水量分別為6，4，4，2倍。

2.3驗證實驗

取復方飲片，按最佳工藝條件重復提取3次，測定柚皮苷和水總浸出物得率。結果見表5。表5驗證實驗結果（略）

從上述試驗結果可以看出:所篩選出來的工藝合理可行,穩定可靠,具有可操作性和重現性。

3討論

3.1舒督丸方劑中有效成分既有水溶性，也有脂溶性的，理論上既需要用親脂性溶劑也需要用水提取，才能使有效成分充分溶出。但是復方中各藥材成分間在提取時往往會發生復雜的相互作用，從而使有效成分溶解度及存在狀態發生變化影響到藥效。因此，采用藥效學方法篩選提取溶劑,與常規的化學法相比,其篩選結果與臨床用藥效果更為接近。本實驗以小鼠醋酸扭體法比較該方劑水和乙醇為溶劑的提取物的鎮痛效果，結果表明以水為溶劑效果優于乙醇，與該藥原配制用溶劑產生的療效一致。

3.2由藥材成分浸出原理可知，溶劑對藥材的浸潤與滲透、溶解與解吸和成分擴散置換過程，在第1次提取即已經完成，后續的多次提取，主要是更換溶劑，保持濃度差。所以，在本研究中，每個煎煮時間和加水量水平設計為依次遞減。結果證明優化出的提取工藝參數可以使有效成分達到較高的提取率，節省了大量的工時，降低了水和能耗。

3.3在柚皮苷含量測定時發現復方提取物中柚皮苷提取率很低，與其溶解性能不符。通過對方中骨碎補與其他藥材兩兩配伍提取實驗發現，是由于其與桑寄生中某成分形成了水溶性絡合物，影響了柚皮苷的含量測定。實驗發現該絡合物在酸性溶液中能夠迅速解離，可以避免對柚皮苷含量測定的干擾，故在測定復方中柚皮苷含量時，需用稀硫酸調節溶液pH至酸性。

【參考文獻】

［1］國家醫藥管理局中草藥情報中心站.植物藥有效成分手冊［M］.北京：人民衛生出版社，1986：761，680.

［2］宋必衛，田薇，劉穎雪，等.槲皮素鎮痛作用研究［J］.安徽醫科大學學報，1994，29（3）：168.

［3］趙興梅，徐光忠，李建利，等.川牛膝和懷牛膝的現代藥理研究概況［J］.華西藥學雜志，2004，19(3)：205.

［4］徐叔云，卞如濂，陳修.藥理實驗方法學，第2版［M］.北京：人民衛生出版社，1982：700.

［5］國家藥典委員會.中國藥典，Ⅰ部［S］.北京：化學工業出版社，2005：180.