報的組詞范文

導語：如何才能寫好一篇報的組詞，這就需要搜集整理更多的資料和文獻，歡迎閱讀由公務員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

外人見到祖父祖母，總以為他們的愛情很美滿。確實做了五十年的夫妻，并不是一件容易的事，于是想當然地認為他們之間一定很和睦。但事實卻大相徑庭：其實，祖父與祖母間的吵嘴是每天都少不了的。祖父比較隨和，祖母則有些嚴肅，兩人總會為一個雞毛蒜皮的小事吵起來，吵不了幾句就停下，然后又為新的事斗嘴，如此循環，永不間斷。不過，吵架歸吵架，祖父祖母同樣深深關懷著對方。祖父時不時要到老年大學去聽講座，若天色晚了還未回家，祖母便會搬把小凳子到下街去等，而祖父回來后也只是笑著說她傻。

一次偶然的機會，我在祖父家的電腦上發現了一個名為《金婚》的文件夾。好奇心驅使我打開，才發現是祖父與祖母為紀念結婚五十周年而特地拍的婚紗照，其中有一張還模仿《泰坦尼克號》中的場景，兩人相擁在一起，臉上都洋溢著幸福的笑容，頗具美感。我不禁放聲大笑，笑聲招來了祖母。當得知我發現他們的“秘密”時，祖母笑著把我叫到一邊，跟我說：“想知道幕后的故事嗎？”我使勁點頭。她看了看窗外，便開始講起了他們拍照的故事來。

原來，這照片不是兩人主動去拍的，而是社區里組織的。開始他們倆還死活不愿意去呢，說是這么大的人了還去拍什么婚紗照。后來好說歹說是同意了，但是拍照時也很不順利，這對老夫妻連手都沒有怎么牽過，“可惡”的攝影師居然要求他們擁抱在一起。“反正我是死活不同意，你祖父倒無所謂?！弊婺刚f這話時，無不帶有一絲自豪的情感，我偷笑。最后，兩人在拍攝組的勸說下，終于同意“抱一下”。于是就有了這張照片。“可真不簡單哪！”我感嘆道?！翱刹皇锹?，唉，你祖父怎么還不回來”，祖母起身，眼睛盯著窗外。

第二天，我幫祖父看店，祖父在一旁下棋。街坊正好談到拍照一事，我便豎起了耳朵。

篇2

【關鍵詞】刺繡 首飾 藝術魅力 應用

傳統首飾工藝的萎縮在根本上是產品式樣與市場需求的脫節，迫切需要解決傳承與創新的問題，并積極應對傳統首飾工藝的轉型。對于學校中的首飾專業來講，藝術首飾的發展不是唯一，對于傳統技藝的學習、新型材料的開發以及設計符合市場規律的作品是齊頭并進的。我們在首飾教學實踐中除了學習基礎工藝外，還專注學習傳統技藝，努力尋求新的材質，以期完善首飾工藝技法、豐富首飾的內涵。

一、首飾中的拾來物――刺繡

1.首飾刺繡

現代藝術首飾中纖維是使用較為普遍的一種材質，很多優秀的作品都是用純纖維材質來制作。而刺繡是纖維藝術中很重要的一個部分，它是針線在織物上繡制的各種裝飾圖案的總稱。

對本文所談及的刺繡首飾的感動來源于筆者一次帶學生的云南首飾技術考察之旅，這種白族、苗族等少數民族婦女在農忙閑暇之余所繡的衣物上的刺繡，色彩華麗、技法多樣，非常有特色。女孩們會用5年甚至更久的時間為自己繡制一套嫁衣，配上代代相傳的苗銀華麗出嫁。唯一遺憾的是，嫁娶婚俗漸漸西化，媽媽的嫁衣漸漸老舊，而這種代代相傳的技藝也正在逐漸衰退。這種拾來的破舊老嫁衣上的一塊衣領、一個繡章對于我們來說卻是無價之寶。（圖1）在感動于這些小刺繡的精美時，不由自主地想起了如何運用這些殘破刺繡做成首飾，以最大程度保留這些散落在塵埃的“珍珠”。

2.刺繡在首飾中的價值

這些刺繡不是傳統意義上的一般纖維材質，而是殘破的拾來物，是有瑕疵的、不完整的、廢棄的?，F代首飾中的拾來物是囊括的說法，多采用一些廉價的、非傳統的，甚至是拾來的物件組合制作首飾，探索首飾與人的各種關系。這種現代藝術首飾在一定程度上只借鑒首飾外形的哲學表達，因此往往在精神層面上更容易讓現代人接受。

很多有紀念意義的首飾，例如把出生寶寶的胎發、旅行紀念物等放入首飾中，佩戴者往往對此種首飾融入更加深刻的感情。刺繡首飾更多的是人文思想與內涵，包含著中國人的民俗、精神，甚至是繪畫成就。因此，刺繡首飾不再是一個冷冰冰的物件，而是充滿了感情和溫度。

打上現代藝術標簽的首飾在絕大多數人看來是晦澀難懂的，很難得到的認同。我們需要找到一種新的材質，但又價格適中、又能受到普通大眾的喜愛。因此，這些破舊的衣物上的繡片已經沒有實際用途，但其本身確像寶石一樣閃閃發光。歲月靜好，一件刺繡作品就是一個繡娘的一段歲月，是記錄一個女人的悲哀喜怒的鏡子。筆者相信，把這些繡片與首飾相結合，把繡片代替寶石做鑲嵌，一定會化腐朽為神奇，并用首飾的方式把繡片的美繼承下來。

二、現代刺繡首飾的藝術魅力

1.藝術美

繡片的不可復制決定了每一款刺繡飾品都是絕對的孤品，每位繡娘不同的人格特質為每片繡片帶來了不一樣的審美情趣，自由組合的圖案、跳躍的色彩使之成為首飾中的亮點。而選用蘇繡，則典雅雋秀顯得首飾素雅大方，成為旗袍或者改良中國風服飾的首選，這些刺繡作品以另一種方式獲得了重生。

學生設計并自己動手制作的刺繡首飾作品中（圖4、5），柔軟的刺繡與銀白的貴金屬的搭配，一柔一硬，產生了一種強烈的對比。（圖4）的苗繡繡片上承載的苗族歷史，又使佩戴它的人可以瞬間近距離接觸這個民族，把描繪苗族祖先蝴蝶媽媽傳說的繡片鑲嵌在一個美麗的項墜中，可以讓沒有去過苗族的人得到另一種無形的經歷，滿足了人們想要獵奇與獨特的心態。刺繡在首飾中的突出地位，主要是由其豐富的色彩決定的，另外，絲質的光澤和金屬的強烈對比也是吸引人注意的地方。（圖5）刺繡首飾在制作上用到了簪刻、花絲、鏤空、鑲嵌、琺瑯，但最重要的色彩都是由刺繡提供，是第一眼關注的重點。這套作品工藝上雖然稚嫩，但貴在新穎獨特、舒適大方，在搭配上沒有特定傾向，任何衣服都能配出獨特的味道。

2.民族美

任何一個人回到了母文化的環境中都是最舒適的，這些刺繡作品給了我們啟發點的同時也愉悅了我們自身。刺繡首飾就刺繡本身而言，就已經帶有強烈的中國風格，佩戴著會不由自主地聯想到東方風味。

一方面，我們需要的東方風味是可以讓我們自己品之有味、體現中國人精神的首飾作品。我們應該是用中國的意境美取代西方形式美對我們的束縛，而不是在現代藝術首飾與現代珠寶首飾中都簡單地模仿西方，反而讓西方標榜我們的中國風；另一方面，刺繡作為中國人比較常見的一種藝術，能夠為國人所接受與喜愛。因此，刺繡首飾的開發不僅符合國人的喜愛，最主要的是價格合理，比較適合平時佩戴。

現代首飾藝術雖然屬于最前沿的藝術門類，但它的受眾范圍也是小眾，因此，簡單款式的刺繡首飾成為我們赴云南課程總結的首選目標。簡單的設計使這些刺繡首飾可以作為日常佩戴，也可以穿著中式旗袍或禮服時佩戴，濃重的中國風格使之成為服飾中的點睛之筆。

3.簡潔美

簡潔不是簡單，新興的銀飾品牌《SU素》推出過一套刺繡首飾，獨特的刺繡配合中式風格的衣服，把清風明月的禪風突出到極致，一種中國女人成熟的婉約之美最大程度地表現出來（圖6）。這才是中國骨子里的內涵風格，中國風的最好闡述。這套首飾雖然款式簡單，但受到了許多白領階層的喜愛。

學生作品《鏡花緣》（圖7）元素選取同名小說，用花絲與繡片結合為主體，配合花絲工藝的外形，營造一種花非花、蝶非蝶狀態縹緲的虛無世界，繡片的使用仿佛留住了本體與實質，拉開了現實與虛幻，是一款比較婉約細膩的刺繡首飾，精致小巧的造型很容易贏得人的好感?！断鄳罚▓D8）的款式相對簡單，用梅、蘭、竹、菊以及牡丹映襯吊墜里鑲嵌的花卉刺繡，顏色艷麗大方，兩種花卉交相輝映，是十分大氣的商業款式。這幾款刺繡首飾均輕巧秀麗，而且成本控制較低，無論是素雅的，還是艷麗的服裝都可以隨意配搭，一經推出便被首飾設計師收用。

三、刺繡在包鑲設計中的手法運用

1.工藝

包鑲在首飾制作中是最重要的也是最基本的手法，要代替寶石把刺繡鑲嵌在首飾上，技術上只能選用包鑲，有了金屬做托底的鑲嵌，繡片的使用壽命會長很多，金屬元素的加入也使刺繡的日常佩戴使用更加突出。唯一有所區別的是，要在包鑲的圈口之上再封一層隨形口沿，這樣可以隱藏刺繡的邊緣，比較利于收口。

唯一要注意的就是，那些比較薄的刺繡，比如在薄真絲上繡的蘇繡就不太適合直接裱在銀子的托底上，而需要在里面裹一層同色系的棉布或者棉花，因為時間一長會透底。

2.布局

刺繡首飾中刺繡的布局應該根據不同的主題元素采取不同的對應方法，但都逃不出首飾設計美的法則：1.點線面的處理；2.整體與局部的關系；3.對比與協調關系；4.對稱和平衡。在這些法則上，刺繡首飾還有個優勢，就是在色彩和肌理這方面與金屬天然就會產生鮮明的視覺沖擊力。

總之，一件優秀的首飾設計的特質不單一指藝術，也不單一指技術，而是藝術與審美以及工藝的結合。

四、市場分析

筆者所在的城市是刺繡極為繁榮的蘇州，蘇州在明清時期技術達到頂峰，各種刺繡衍生品在歷史上屢見不鮮，但在當今的蘇繡市場，蘇繡藝術品種相對單一。筆者曾經考察過蘇州的刺繡市場，刺繡作品主要以屏風、畫為主的平面作品，以及一些低端的韓國的訂單小香包、名片夾、流蘇等飾物，只有一兩家比較高端的刺繡大師工作室會承接一點高端服飾的定制訂單。如此單鏈條的營銷模式導致大量的價格競爭。

在當今社會中，只有創新才能生存，只有跨界才能出彩。刺繡與服飾本來就是密不可分的，我們完全可以把只能遠觀的刺繡融入到我們的生活中。但需要解決兩個問題：一個是設計問題，這個毋庸置疑，與服飾相關的任何裝飾品都可以設計利用，包括很多更廣泛的衍生品；還有一個是技術問題，就是可以讓刺繡作品減少摩擦減少受污染機會的技術，據筆者所知，這項技術是材料工程專業已經研發的項目，完全可以廣泛使用，使刺繡這個行業更上一層樓。筆者相信，在這樣的條件下，刺繡的服飾、刺繡的首飾是完全可以打動消費者的。

結語

老繡片首飾的制作無疑在這種美上增添了另一種奢侈的美，這種奢侈不是首飾本身的價值，而是作品上融入的時光以及人們無盡的想象。繡片這種材質的使用，使刺繡首飾成為日常佩戴首飾的一種可能。成本低廉、色彩豐富，可以隨意搭配服裝并賦有民族風味是刺繡首飾的最大特點，可以在一定程度上小批量生產，作為商業首飾的刺繡首飾肯定會受到人們喜愛。

參考文獻：

[1]張妮.材料的革命.現代藝術首飾中的拾來品[C].第五屆中國現代手工藝學院展論文集，山東美術出版社，2009.

[2]郭新.珠寶首飾設計[M].上海：人民美術出版社，2009.

篇3

【關鍵詞】 腦出血;重組人粒細胞集落刺激因子;骨髓干細胞;大鼠

干細胞移植治療腦血管病及變性疾病已取得一定成效。但臨床上因移植操作存在有創性，同時干細胞來源困難，體外培養、分離純化技術尚未成熟及存在移植排斥等難題，使干細胞移植治療腦血管病在短期內難以推廣應用。重組人粒細胞集落刺激因子(rhGCSF)動員的骨髓干細胞(BMSC)既有干細胞的部分優點，又能克服干細胞移植的技術難題，理論上成為治療腦血管病的理想方法之一。rhGCSF對腦出血(ICH)是否具有神經保護作用目前國內尚無研究，本實驗擬用rhGCSF治療腦出血大鼠，探討rhGCSF是否對腦出血有神經保護作用及可能的機制。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 Wistar大鼠72只，鼠齡3～4個月，雌雄不拘，體重250～300 g，由吉林大學基礎醫學院實驗動物中心提供。

1.2 藥物與試劑 重組人粒細胞刺激因子注射液(rhGCSF，商品名金磊賽強)，購自長春金賽藥業有限責任公司;溴脫氧尿苷(Brdu)、半胱氨酸天冬氨酸特異性蛋白酶3抗體(兔抗caspase3)和溴脫氧尿苷單克隆抗體(兔抗Brdu)購自北京博奧森生物技術有限公司;SP試劑盒、加強型DAB顯色試劑盒購自福州邁新生物技術開發有限公司。

1.3 方法

1.3.1 動物分組及處理 實驗動物隨機分為假手術組、治療組、ICH組。ICH組和治療組均用斷尾取自體血方法制備ICH模型，假手術組僅經注射點注入生理鹽水。ICH后治療組在術后1 h開始每天腹部皮下注射GCSF(50 μg·g-1·d-1)，另兩組腹部皮下注射等量生理鹽水。各組分別在術后1、3、7、14 d時間點行神經功能缺損(NSS)評分后處死動物。取腦。各組各時間點各取6只動物。各組大鼠在處死前1 d，腹腔注射Brdu(50 mg/kg)3次，間隔2 h，以標記分裂的骨髓干細胞。

1.3.2 免疫組織化學染色 各組大鼠在不同時間點行10%水合氯醛麻醉后(2 ml/kg)，行心臟灌注及固定，腦組織石蠟包埋切片，分別行Brdu、caspase3抗體免疫組化染色，檢測免疫陽性細胞，嚴格按照試劑盒說明書操作。對Brdu、caspase3免疫陽性細胞進行計數，出血灶周邊區隨機選取5個高倍視野，計算陽性細胞數，取其平均數。

1.4 統計學處理 用SPSS 15.0統計軟件包進行兩樣本均數間的t檢驗，結果用x±s表示。

2 結 果

2.1 神經功能缺損評分結果 ICH組和治療組均產生不同程度的神經功能缺損，假手術組無神經功能缺損。術后1 d時ICH組與治療組評分沒有顯著差別(P>0.05)，3、7、14 d時治療組評分明顯低于ICH組(P

2.2 免疫組織化學染色結果

2.2.1 Brdu免疫組織化學染色結果 ICH后在出血灶周邊可見Brdu陽性細胞，但Brdu陽性細胞數隨出血時間的延長而逐漸減少。在同一時間點，治療組的Brdu陽性細胞均多于ICH組，但只有第1周的差別有顯著性(P

2.2.2 caspase3免疫組織化學染色結果 ICH后，各時間點治療組及ICH組表達均增高，但ICH組均較治療組增高明顯。見表3。表3 rhGCSF對ICH后caspase3陽性細胞數的影響

3 討 論

以往認為成熟神經系統的神經細胞是終極細胞，受損后不能再生，而目前越來越多的證據表明腦有自身修復功能，成年腦的腦室下區、海馬齒狀回、室管膜區等區域存在自我更新和多種分化潛能的神經干細胞〔1〕。腦出血可誘導內源性干細胞的增殖、分化，但因數量少，因此誘導的自身修復能力有限。神經干細胞移殖雖然為腦損傷的治療帶來生機，但倫理、來源、移殖損傷和排斥反應等因素限制了其臨床應用。

BMSC動員是新興的細胞移殖方法，利用細胞因子使主要位于骨髓中的干細胞進入外周血，通過血液循環到達損傷組織以達到細胞移殖的目的。GCSF是BMSC強有力的動員劑，可以提高外周血干細胞數量，且可向腦損傷部位遷移，在腦損傷的特定病理環境中向神經細胞分化，以修復受損腦組織，從而起到神經保護作用。

Mezey等〔2〕研究認為，骨髓間充質干細胞能夠遷移到受損的腦組織區域并分化成不同的腦組織，包括神經細胞和膠質細胞。Shuy等〔3〕用大鼠模型證實rhGCSF能動員骨髓間充質干細胞歸巢至腦缺血損傷區，促進神經修復和功能康復，缺血大鼠用rhGCSF后MRI檢查可見病灶明顯縮小，并用免疫雙標記染色證實rhGCSF能動員骨髓間充質干細胞在腦內分化為神經元和膠質細胞。這些研究為中樞神經系統移植BMSC，促進神經再生，改善中樞神經系統損傷后的生物學行為成為可能。

rhGCSF是BMSC強有力的動員劑，它動員的BMSC包括造血干細胞和骨髓間充質干細胞〔4〕。骨髓間充質干細胞能產生堿性成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、神經生長因子、腦源性神經營養因子及血管內皮生長因子等，使分化的祖細胞向著生成神經細胞的方向分化。造血干細胞具有多向分化潛能，它在病理情況下可以“自發”地向損傷組織趨化，并在組織微環境作用下分化為受損腦組織特性的細胞，但確切機制尚不明確，可能和BMSC能夠表達眾多趨化因子受體和各種細胞黏附因子，以及促進出血區各種炎癥介質的釋放、腦細胞黏附因子的表達，調控BMSC的趨化有關。

本研究用斷尾取自體血方法制備ICH模型，治療組于術后1 h開始給予rhGCSF治療，比較不同時間點對照組和治療組的NSS評分發現，兩組的NSS隨出血時間延長而逐漸減輕，說明存在神經系統的自身修復，但ICH組NSS較治療組更嚴重，說明僅靠神經系統代償性的自身修復是不夠的，會遺留較明顯的NSS，而rhGCSF治療可以減輕NSS。

Brdu是一種嘧啶類似物，可于細胞合成期(S期)替代胸腺嘧啶摻入到細胞核內，作為新生細胞的特異性標記〔5〕。近年來的研究發現，腦缺血后神經干細胞可增殖分化，參與缺血性腦損傷的修復過程。

研究發現，應用5溴尿嘧啶標記觀察細胞增殖情況時，沙土鼠在短暫全腦缺血5 min再灌注后5 d、10 d，海馬齒狀回區Brdu標記的干細胞數目增加，提示有神經干細胞的增殖加速，缺血性腦損傷后自身神經干細胞具有自發活化作用〔6〕。本實驗發現諸多證據支持Brdu染色陽性細胞為新生增殖細胞：如陽性細胞多分布于腦出血灶周圍組織中;陽性細胞可呈叢集性，提示為誘導分化生成而非DNA修復等。這些現象均表明Brdu染色陽性細胞為新生增殖細胞。

本研究發現腦出血后ICH組和治療組的出血灶周邊區均可見Brdu陽性細胞，尤其是第1周，灶周存在較多的Brdu陽性細胞，提示細胞增殖活躍，rhGCSF治療可促進腦出血損傷的細胞增殖，有促進干細胞性質的細胞轉化為膠質細胞增生、修復腦出血損傷的作用。

天冬氨酸特異的半胱氨酸蛋白激酶家族(caspases)是細胞凋亡過程中最重要的蛋白酶，caspase3是哺乳動物細胞凋亡中的關鍵蛋白酶，處于級聯反應的核心位置，發揮非常重要的作用，被稱為死亡蛋白酶。如果在caspase3激活之前進行干預，可以有效抑制凋亡的發生〔7〕。

本實驗中，ICH后各時間點治療組及ICH組caspase3表達均增高，但ICH組均較治療組增高明顯，說明rhGCSF治療可以減少腦出血后神經元凋亡的發生，促進腦損傷神經元的分化和再生，起到神經保護的作用。

GCSF的神經保護作用分析可能與以下機制有關：(1)抗炎癥作用：GCSF有顯著抗炎癥作用，有研究證實在大鼠短暫和持久大腦中動脈閉塞模型中，GCSF治療組IL1β mRNA較對照組明顯減少，且GCSF能顯著減輕水腫和減小梗死體積，促進神經功能恢復〔8〕。(2)抗凋亡作用：GCSF與腦內GCSFR結合引起STAT3上調，后者作用于神經元上的抗凋亡蛋白Bcl2〔9〕。(3)促進血管生成和神經發生：在損傷、缺血狀態下，循環干細胞選擇性遷移至缺血部位，支持受損組織的重塑和功能重建〔10〕。Shuy等〔3〕用大鼠模型證實，GCSF以化學激活這種方式動員足量的BMSC并歸巢至腦損傷區，在腦內分化為神經元和膠質細胞，并促進血管再生，促進神經修復和功能康復。這個作用能增加營養因子的產生，如神經膠質細胞源性神經營養因子和腦源性神經營養因子，促進損傷實質細胞的修復，提示損傷腦組織可能特異性地吸引骨髓源性細胞。因此，進一步的探索GCSF的作用機制，對于開發新的腦卒中治療方案有重要的意義。

綜上所述，rhGCSF可動員BMSC到外周血，在腦出血時，循環中的干細胞可以透過血腦屏障，進入腦實質并遷移至受損腦組織，釋放某種營養因子并分化為神經元和神經膠質細胞，從而增加神經細胞數量，增強其代償修復的能力。大鼠ICH后，給予rhGCSF治療可以有效促進神經細胞分化，改善神經功能評分，具有神經保護作用，為探索干細胞治療腦出血更加簡便有效的方法提供了實驗依據。

參考文獻

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3 Shuy WC，Lin SZ，Yang HI，et al.Functional recovery of stroke rats induced by granulocyte colonystimulating factorstimulated stem cells〔J〕. Circularion，2004;28：184754.

4 Kocher AA，Schuster MD，Szabolcs MJ，et al.Neovascularization of ischemic myocardium by human bonemarrowderived angioblasts prevents cardiomyocyte apoptosis，reduces remodeling and improves cardiac function〔J〕.Nat Med，2001;7(4)：4306.

5 Kuhn HG，DickinsonAnson H，Gage FH.Neurogenesis in the dentate gyrus of the adult rat：agerelated decrease of neuronal progenitor proliferation〔J〕.J Neurosci，1996;16(6)：202733.

6 Jiang YH，Balkrishna N，Jahagirdar，et al.Pluripotency of mesenchymal stem cells derived from adult marrow〔J〕.Nature，2002;20(1)：37.

7 Sharma S，Ravichandran V，Jain PK.Prediction of caspase3 inhibitory activity of 1，3dioxo4methyl2，3dihydro1hpyrrolo〔3，4c〕quinolines:QSAR study〔J〕.Enzyme Inhib Med Chem，2008;23(3):42431.

8 Gibson CL，Jones NC，Prior MJ，et al.GCSF suppresses edema formation and reduces interleukin1β expression after cerebral ischemia in mice〔J〕. Neuropathol Exp Neurol，2005;64(7):7639.

篇4

重組人粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子（recombinant humangranulocyte-macrophage colony stimulating factor，rhGM-CSF）是一種能調節造血祖細胞增殖分化的細胞因子，主要用于防治惡性腫瘤放療和化療所引起的白細胞減少癥，已用于臨床近許多年，取得了很好的臨床效果，但也伴有不少不同程度的不良反應，如發熱、寒顫、疼痛、皮疹、胸痛、注射部位硬結等[1]。我院化療科1例左乳腺癌術后化療患者使用該藥后出現心律失常反應，經積極治療及護理，患者病情得到緩解，現報道如下。

1 病例簡介

患者，女，58歲，右乳腺癌術后5月，化療5療程后1月，因再次化療于2011年12月13日入院。入院時，查體：體溫36.8℃，脈搏72次/分，呼吸18次/分，血壓14.6/9.3KP。雙肺呼吸音略粗，未聞及干濕啰音；心臟無擴大，心率72次/分，心律齊，各瓣膜聽診區未聞及雜音。腹平軟，無壓痛，肝、脾肋下未捫及。無藥物過敏史，無高血壓、心臟病和糖尿病史。查血常規：白細胞計數2.6×109/L，中性粒細胞記數40%，紅細胞計數3.68×1012/L，血小板計數163×109/L。由于白細胞計數和中性粒細胞計數偏低，入院后當日開始給予患者皮下注射重組人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子（rhGM-GSF，由北京北醫聯合藥業有限公司生產，商品名健白，國藥準字S20063097，規格為200μg/支，無菌凍干粉劑，批號20110801） ，一日一次，一次400μg，共7次。首次皮下注射后無任何異常，第三次注射15min后，患者出現輕微的胸部不適、呼吸加快等現象，靜坐休息15min后癥狀完全消失，隨后減量為一日一次，一次200μg，用藥第5日晨查房時，體格檢查發現脈搏75次/分，節律不整齊；心臟聽診：心率75次/分，心律不整齊，頻發期前收縮；各瓣膜聽診區未聞及雜音；查心電圖示頻發房性早搏（二聯律），病人訴每次用藥后可有短暫性胸悶、頭暈、心悸等現象，當即考慮可能為應用重組人粒細胞巨噬細胞集落因子所引起的不良反應，于是立即停藥并給予相應抗心律失常處理，升白細胞藥物改為口服升白細胞藥物（如維生素B4、鯊肝醇、利血生），同時密切觀察病人生命體征及病情變化；預防快速性室上性心律失常及心功能衰竭。病人休養1周后體格檢查發現脈搏72次/分，律齊；心臟聽診：心率72次/分，律齊，各瓣膜聽診區未聞及雜音；心電圖示恢復竇性正常心律。復查血常規：白細胞記數4.8×109/L，中性粒細胞記數68%，順利完成此次化療。

2 討論

rhGM-GSF作用于造血祖細胞促進其增殖和分化，其重要作用是刺激粒細胞、單核巨噬細胞成熟，促進成熟細胞向外周血釋放，為解決腫瘤化療后的骨髓抑制這一難題提供了有效手段[3]。rhGM-GSF的安全性與劑量和給藥途徑有關，其不良反應主要為少數病人有發熱、皮疹、骨痛、胸痛、寒戰、流涕和腹瀉及注射局部反應（如紅腫、硬結等）。有報道稱此藥引起罕見的不良反應有變態反應、支氣管痙攣、心力衰竭等。

本例患者無高血壓、冠心病、心肌病、風濕性心臟病病史，詢問近期內也無感冒、發熱、腹瀉病史及患急性病毒性心肌炎和應用洋地黃類藥物、抗心律失常藥物及利尿劑等藥物。本例患者給藥途徑是按照正規給藥途徑，使用該藥物時經多人核對后未發現藥物過期，制劑中無雜質，與劑量無關，患者在以前化療過程中均是采用重組人粒細胞集落刺激因子（rhG-CSF）來提升白細胞。綜合考慮認為，本例患者在使用rhGM-CSF第五天出現房性早搏應是一例罕見不良反應，但是否與rhGM-CSF引起的變態反應有關，需要做進一步研究。房性早搏的治療大多不需特殊治療，只需密切觀察病情變化即可，有癥狀者宜解除顧慮及緊張過度情緒或試用鎮靜劑和β-受體阻滯劑以減少運動可，快速心室率者可選用抗心律失常藥物治療，房性和房室交接處早搏大多選作用于心房和房室交接處的Ⅰa、Ⅰc、Ⅱ、Ⅳ類藥，而室性早搏則多選用作用于心室的Ⅰ類和Ⅲ類藥[4]。

綜合文獻，關于rhGM-CSF導致的不良反應的報道，現總結如下：.肌肉骨骼系統，偶有肌肉酸痛、骨痛、腰痛、胸痛、關節痛；消化系統，偶會出現惡心、嘔吐、食欲不振和腹瀉的現象，或肝臟谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶升高、偶見血清白蛋白水平低下；神經系統，偶有頭疼、精神失常、腦血管疾病、驚厥甚至癲癇；其他，部分患者出現發熱、寒戰、流涕、心悸、胸悶、乏力及皮疹，血清尿酸、乳酸脫氫酶及堿性磷酸酶增高升高；罕見的反應有變態反應、呼吸困難、肺水腫、暈厥、間質性肺炎和幼稚細胞增加等。嚴重者可見支氣管痙攣、成人呼吸窘迫綜合征、室上性心律失常、心力衰竭、休克、心包炎、血栓形成[5]。

參考文獻

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[3] 董梅、馮奉儀，綜述，腫瘤化療輔助藥研究進展. 國外醫學，腫瘤學分冊，2002， 29（1）： 22.

篇5

[關鍵詞] 金屬烤瓷冠；鎳鉻合金；鈷鉻合金；鈦合金；牙周組織

[中圖分類號] R783.1 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2014）02（a）-0054-04

Effect of different porcelain fused metal crown on periodontal tissues and cytokines in gingival crevicular fluid

XU Xiaoxia1 LI Lifeng2

1.Department of Stomatology， Armed Police Force Hospital of Jiaxing City， Zhejiang Province， Jiaxing 314000，China； 2.Department of Stomatology， People's Hospital of Fuyang City， Zhejiang Province， Fuyang 311400， China

[Abstract] Objective To explore the effect of different porcelain fused metal crown on periodontal tissues and cytokines in gingival crevicular fluid. Methods 90 patients with 90 teeth according to different porcelain crowns metallic materials were divided into three groups： Ni-Cr alloy porcelain fused metal crown group， Co-Cr alloy group and Ti-Lite alloy porcelain fused metal crown group， each group had 30 patients， while their own side of the same name healthy natural teeth were taken as benchmark for comparison. The effect of three porcelain fused metal crowns on gum and the PLI， SBI， PD， VEGF， IL-1β， TNF-α of offending teeth and healthy teeth in three groups were compared after repaired for 12 months. Results The repaired teeth in the three groups had higher PLI， SBI and PD than healthy teeth after 12 months （P < 0.05）； SBI and PD in Ni-Cr alloy group and Co-Cr alloy group were higher than Ti-Lite alloy group （P

[Key words] Porcelain fused metal crown； Ni-Cr alloy； Co-Cr alloy； Ti-Lite alloy； Periodontal tissue

金屬烤瓷冠（PFM）在口腔修復學中是烤瓷熔附金屬也稱金屬烤瓷全冠。1887年Land發現把陶瓷熔結在鉑上的方法，首先制作了原始形式的金屬烤瓷。烤瓷熔附金屬全冠（簡稱“烤瓷冠”）已經成為目前牙冠修復的重要方式[1]，它是用低熔瓷與金屬底層材料聯合制成的修復體，能較好恢復牙體形態、功能。烤瓷冠是有著強度高、外觀逼真、色澤穩定、表面光滑、不易磨損、耐酸堿、生物相容性好等優點的永久性修復體，兼有金屬的強度和烤瓷的美觀，所以深受醫師和患者的歡迎和青睞。不同的烤瓷材料會對牙周組織產生不同的影響，這些影響反映在修復之后，出現牙齦出血、齦緣黑線牙齦紅腫、牙周損傷等現象[2]。這種癥狀嚴重地影響了牙冠修復治療的長期效果。近年來烤瓷冠修復之后可能引起的牙周組織炎癥問題，越來越被臨床醫師重視。本文探究不同金屬烤瓷冠修復對牙周組織及牙齦溝周圍細胞因子的影響，為臨床修復工作提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2013年4月于浙江省嘉興市武警醫院（以下簡稱“我院”）就診并且準備進行烤瓷冠修復治療的90例患者共90顆牙齒為研究對象，其中，男43例，女47例；年齡20～55歲，平均（32.5±8.9）歲。根據烤瓷冠金屬材料不同將患者分為鎳鉻合金組、鈷鉻合金組和鈦合金組。鎳鉻合金組30例患者中，男17例，女13例；年齡16～67 歲，平均（35.8±4.6）歲。鈷鉻合金組30例患者中，男16例，女14例；年齡13～66歲，平均（35.4±4.7）歲。鈦合金組30例患者中，男19例，女11例；年齡17～69 歲，平均（36.1±5.1）歲。各組年齡及性別比較，差異均無統計學意義（P> 0.05），具有可比性。所有患者符合以下條件：患牙位置均分布在上頜的前牙區部分；患者無牙齦紅腫現象；牙周組織健康，沒有先天畸形；患者的前牙區能基本保證正常咬合關系；患者患牙的對側同名牙均為健康天然牙齒；在進行烤瓷冠修復后一直到標本采集前半年內，不能服用抗生素累藥品；進行過牙周治療并要求進行牙冠修復的患者；全身沒有系統性疾病，如心血管疾病、糖尿病、肝炎和血液性疾病等；有較好的口腔衛生狀況，無牙齦炎等口腔疾病?？敬晒诮揭粋?、近中邊緣深入到齦下0.5 mm左右，大概位于齦溝深的一半，舌側與齦緣保持平整對齊，佩戴烤瓷冠以后，進行邊緣適合性檢查，采用改良技術Ryge標準[3]，本研究所有烤瓷冠修復體的邊緣適合度均為Α級。本研究從計劃到實施均由筆者嚴格按照統一標準進行臨床牙體準備、修復、試冠、黏固以及調整并整形，保證了技術方面的標準的統一。所有患者均了解手術過程及風險，并且在清醒和知情的情況下同意并且簽署了烤瓷冠修復同意書。

1.2 方法

1.2.1 烤瓷冠修復 按烤瓷冠要求制備牙體，避免損傷牙齦，頸緣位置為齦下0.5 mm，肩臺寬度為0.5～1.0 mm，排齦后用硅橡膠印模材取模，臨時冠修復。根據分組分別采用鎳鉻合金、鈷鉻合金和鈦合金制作PFM全冠。密合性、牙冠軸面外形等可能影響基牙牙周健康，所有操作均由同一醫師及同一組技工完成。

1.2.2 牙周臨床檢查 修復完成后12個月對患者的修復牙齒進行臨床檢查?；佳篮蛯φ昭赖木咧笖担╬laque index，PLI）檢測采用Quigley-Hein法，齦溝出血指數（sulcus bleeding index，SBI）檢測采用Loe和Silness法，記錄探診深度（probing depth，PD）。上述檢查指標中，除菌斑指數外，每牙檢查唇舌側近中、中央、遠中，取6個位點的平均值作為最終檢查結果。

1.2.3 牙齒齦溝液標本的提取 烤瓷冠修復的前后，提取牙齒齦溝液：由口腔內科專業醫師，在提取牙齒牙齦液之前，對患者進行口腔清理，用清水漱口3次，每次30 s。清理完畢以后，等待15～20 min后再行取液，使用濾紙條進行齦溝液采集，每例患者每顆牙取液3次，每次使用1張濾紙條，并且每次取液間隔時間為5 min。將取好齦溝液的濾紙條放置在齦溝液儀中進行數據讀取并記錄示數。

1.2.4 齦溝液血管內皮生長因子（VEGF）濃度檢測 使用ELISA法對樣本的VEGF濃度進行檢測，將2000 ng/L的VEGF標準品使用二倍稀釋法稀釋成濃度分別為1000、500、250、125、62.5、31.25、15.625 ng/L，將濃度樣本依次加入到VEGF試劑盒的多孔板中，37℃恒溫箱中孵育3 h，洗板5次，然后加入少量抗工作液孵育2 h，洗板5次，并且向其中加入酶標抗體工作液再孵育1 h，此時要注意洗板6次，然后進行清洗，洗凈以后加入少量底物工作酶，樣本避光孵育5～15 min，最后加入終止反應液，終止反應。終止后即可在HTS 7000 Plus多孔板上進行測量，使用高效分析儀測量并記錄數據，波長為492 nm。

1.2.5 齦溝液中白介素（IL）- 1β和腫瘤壞死因子（TNF）-α水平檢測 采用雙抗體夾心ELISA法對齦溝液中IL-1β及TNF-α水平進行檢測。

1.3 統計學方法

采用SPSS 17.0統計學軟件進行數據分析，計量資料數據用均數±標準差（x±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗，以P < 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三種烤瓷冠修復后12個月牙周檢查結果

修復后12個月三組修復牙PLI、SBI、齦溝PD與對照牙比較，差異均有統計學意義（均P < 0.05），修復后三組PLI差異無統計學意義（P > 0.05），鈦合金組SBI和PD與鎳鉻合金組、鈷鉻合金組比較差異均有統計學意義（均P < 0.05）。見表1。

2.2 三種烤瓷冠修復后12個月齦溝液細胞因子比較

三種烤瓷冠修復牙VEGF、IL-1β、TNF-α水平較對照牙顯著增高，差異有統計學意義（P < 0.05）；鈦合金組修復牙VEGF、IL-1β、TNF-α水平低于鎳鉻合金組和鈷鉻合金組，差異均有統計學意義（均P < 0.05）。見表2。

3 討論

金屬烤瓷冠是鑲牙的一種，將牙齒的外表面根據設計要求磨除一層后，選用金屬作為內層牙冠，然后用牙科專用瓷性材料高溫燒結在金屬的表面，達到恢復牙齒的外形、功能和美觀的目的，也被稱為金屬烤瓷全冠，它是用低熔瓷與金屬底層材料聯合制成的修復體，兼有金屬的強度和瓷的美觀，而且能較好恢復牙體形態、功能，是強度高、外觀逼真、色澤穩定、表面光滑、不易磨損、耐酸堿、生物相容性好的永久性修復體。現代牙科中鎳鉻合金是口腔重要的修復材料，而且在臨床上廣泛應用。由于鑄造所需的成本低，價格便宜，技術成熟，更容易被絕大多數患者所接受。有研究發現，口腔中的唾液會使鎳鉻合金析出的離子產生毒性作用，這會危害到口腔組織的細胞活性，進而影響牙周組織的正常健康和代謝[4-5]。

臨床上進行治療的過程中，對于口腔中需要使用烤瓷冠的患者，醫生會根據患者的要求及條件挑選具有一定的抗腐蝕性的金屬材料，由于人類的口腔環境比較復雜，所以烤瓷內冠在口腔的環境中會發生腐蝕作用，牙齒的腐蝕不但會影響烤瓷的美觀，而且還會對牙周組織及基牙產生刺激[6-7]?？敬晒诘男迯托Ч饕揽坑诨颊哐乐芙M織的健康情況[8-9]。有研究表明，金屬烤瓷全冠中的合金材料浸入到唾液中會發生電化學腐蝕，進而會導致金屬離子的解離并且析出，而金屬離子的析出則會引起人體牙周組織的免疫反應，進而會使一些炎癥因子以及酶等從牙齦溝中被釋放出來，從而引發局部的發炎癥狀[10-11]。測定齦溝液中IL-1β和TNF-α水平，可作為檢測牙齦炎和牙周炎進展的有效而無創性方法。VEGF是強而有力的血管生成劑，一旦血管密度變高，VEGF的表達也隨之增加[12]。齦溝液分泌增多是牙齦炎癥早期的主要表現之一。牙齦狀況的改變會通過齦溝液量的變化而發生改變，因此通過準確檢測齦溝液量就可以正確地判斷牙齦的健康狀況是否發生改變。

本研究牙周檢查中，鎳鉻合金烤瓷冠修復的患牙指標有不同程度的增加（PD、SBI），可作為輔助判斷牙周組織破壞的依據；不同金屬烤瓷冠修復后，齦溝液中的細胞因子VEGF、IL-1β及TNF-α的水平發生變化，提示牙齦健康狀況有改變。研究結果顯示，修復后12個月患牙PLI、SBI、齦溝PD明顯升高，與對照牙比較差異均有統計學意義（均P < 0.05），修復后三組PLI無明顯差異，鈦合金組SBI和齦溝PD與鎳鉻合金組、鈷鉻合金組比較差異均有統計學意義（均P < 0.05）。三種烤瓷冠修復牙VEGF、IL-1β及TNF-α水平較對照牙顯著增多，差異有統計學意義（P < 0.05）。 而鈦合金組修復牙VEGF、IL-1β及TNF-α水平低于鎳鉻合金組和鈷鉻合金組，差異均有統計學意義（均P < 0.05）。提示鈦合金對患者具有更好的療效。孫平等[13]認為，鈷鉻合金具有較好的生物相容性。從本研究數據可以對比看出，在修復作用鈷鉻合金優于鎳鉻合金，但是相比鈦合金來說，仍較差。鈦合金作為惰性金屬，其電解發生較慢，對人體的排斥性、危害性較低。

綜上所述，本實驗探究了不同金屬烤瓷冠修復對牙周組織及齦溝周圍細胞因子的影響，并進行了簡單評價，若廣泛應用于臨床推廣還需更深一步的研究。

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篇6

[關鍵詞]重組人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子；凍干粉針劑；高效液相色譜法

[中圖分類號] R927.2 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2017）05（c）-0104-04

[Abstract]Objective To establish the method of the main active ingredients in recombinant human granulocyte macrophage colony stimulating factor freeze-dried powder injection （rhGM-CSF） by HPLC.Methods The chromatographic condition of HPLC was chromatographic column （TSK gel G3000SW，300.0 mm×7.5 mm，5 μm），Mobile phase was 0.1 mol/L phosphate buffer，Flow rate was 1 ml / min，automatic sampling was 20-40 μl and detection wavelength was 280 nm.Analyzing the ingredients of rhGM-CSF freeze dried powder injection，reproducibility and linear relationship between different sample volume and peak area of each component under this chromatographic condition were studied in this experiment.Results The main components of rhGM-CSF freeze dried powder injection were rhGM-CSF protein and human albumin.The rhGM-CSF protein sample volume and peak area were good linear （R2>0.99） and the percentage content of RSD values was less than 3%.Conclusion This method could be used to detect the active component content of the rhGM-CSF lyophilized powder for injection protein with 10-20 μg scope.

[Key words]Recombinant human granulocyte macrophage colony stimulating factor；Freeze-dried powder injection；High performance liquid chromatography

重M人粒細胞巨噬細胞刺激因子凍干粉針劑（rhGM-CSF）是使用重組基因工程技術生產的重組蛋白藥物[1]343-344，是一種細胞因子，主要用于治療因放、化療引起的白細胞減少[2-5]，并且臨床上可以治療潰瘍、燙傷、燒傷等創面疾病[6-9]，其活性成分為重組人粒細胞巨噬細胞刺激因子，該品種已被《中國藥典》三部收載[1]343-344?！吨袊幍洹肺匆幎ㄆ涑善返暮繙y定方法，只要求測定生物學活性（效價），采用的是TF-1依賴細胞株，用MTT染色法進行測定，合格范圍是標示活性的80%～150%[10]96-98，277-279。由于活性測定方法本身的穩定性較差，難以實現精確的控制，因此，為更好地控制產品質量，宜盡早建立其主藥成分含量測定方法。

高效液相色譜法（HPLC）中收載rhGM-CSF原液純度的檢測方法，是采用凝膠色譜柱為固定相，磷酸鹽緩沖液為流動相，在波長280 nm處進行檢測，使用面積歸一化法計算目的蛋白百分比含量[10]59-63。目前，高效液相用于藥品的定性、定量的分析應用已經很廣泛[11-15]，但是用于檢測rhGM-CSF凍干粉針劑主藥含量的方法尚罕見報道，故本研究通過參考藥典中rhGM-CSF原液純度檢測的方法，確認該法檢測rhGM-CSF凍干粉針劑主藥含量的可行性。

1材料與試藥

1.1儀器

Agilent 1100高效液相色譜儀（配有G1315B DAD 檢測器、G1311A四元梯度泵、G1322A在線脫氣裝置、G1316A柱溫箱，德國安捷倫科技有限公司）；化學工作站（ChemStation，版本號：Rev.A.10.01[1635]，美國安捷倫科技有限公司）；BS124S型電子天平（德國賽多利斯科學儀器有限公司）；TSK gel G3000 SWXL色譜柱（7.8 mm×300 mm，粒徑5 μm，日本東曹株式會社公司）。

1.2主要試劑

二水磷酸氫二鈉（AR，西隴化工股份有限公司）；氯化鈉（AR，廣州化學試劑廠）；十二水合磷酸二氫鈉（AR，西隴化工股份有限公司）；甲醇（色譜級，Merck KGaA）；人血白蛋白（注射級，上海萊士血液制品股份有限公司）；甘露醇注射液（注射級，華潤雙鶴藥業股份有限公司）；PEG4000（藥用級，南京威爾化工有限公司）。

rhGM-CSF原液（批號20151003，廣州白云山拜迪生物醫藥有限公司自制）。rhGM-CSF凍干粉針劑（批號20130201，規格100 μg/瓶，廣州白云山拜迪生物醫藥有限公司自制）。

2方法與結果

2.1色譜條件

色譜柱：TSK gel G3000 SWXL（十二水磷酸二氫鈉6.08 g、十二水合磷酸氫二鈉21.85 g、氯化鈉5.844 g，三者定容至1000 ml，搖勻。經0.45 μm的濾膜過濾后備用；檢測波長：280 nm；流速：1 ml/min；柱溫：25℃。

2.2樣品準備

用流動相將rhGM-CSF凍干粉針劑和人血白蛋白配制成濃度為0.5 mg/ml的溶液；將rhGM-CSF原液制備成濃度為1.0 mg/ml的溶液；甘露醇注射液稀釋成20%的濃度后備用。以上樣品進樣前需經過離心（10 000 r/min，5 min）后，取上清液適量體積加入進樣小瓶備用。

2.3 rhGM-CSF凍干粉針劑中的各組分HPLC分析

rhGM-CSF凍干粉針劑主要由rhGM-CSF原液（主成分為rhGM-CSF蛋白）、人血白蛋白、甘露醇注射液組成。分別取1.0 mg/ml rhGM-CSF原液、0.5 mg/ml人血白蛋白、20%的甘露醇注射液單組分以及0.5 mg/ml rHGM-CSF凍干粉針劑進行HPLC分析，進樣體積分別為20 μl。根據HPLC圖譜確立rhGM-CSF凍干粉針劑中各組分對應的峰及其保留時間，試驗結果詳見圖1～圖4。

檢測結果顯示，rhGM-CSF原液于11.072 min出現吸收峰，人血白蛋白于5.824、8.296、9.399、14.756、15.021 min出現吸收峰，甘露醇注射液于12～13 min出現了倒峰。RHGM-CSF凍干粉針劑則在5.843、8.274、9.396、10.999、14.900 min出現吸收峰，在12～13 min也出現了倒峰。結合HPLC分析方法自身的系統誤差，推測rhGM-CSF凍干粉針劑中保留時間為5.843、8.274、9.396、14.900 min的吸收峰是人血白蛋白的不同聚合體的樣品峰。人血白蛋白單組分在保留時間為14.756、15.021 min時出現了兩個吸收峰，推測以液體和凍干粉狀態貯存的人血白蛋白的穩定性存在差異，導致其注射液經長期存放后出現了分裂峰。12～13 min的倒峰推測為甘露醇，由于甘露醇吸光度小于流動相導致了倒峰的產生，表明該體系不適用于甘露醇的分析。rhGM-CSF凍干粉針劑中保留時間為10.999 min的單峰推測為rhGM-CSF目的蛋白。

2.4 rhGM-CSF凍干粉針劑結果的重現性

取0.5 mg/ml的rhGM-CSF凍干粉針劑（批號20130201），平行進樣3次，進樣體積40 μl（對應rhGM-CSF蛋白的含量為20 μg），根據面積歸一化法計算各組分的峰面積（area）及相應的百分含量（area%），并計算其RSD（%）。結果顯示，該法分析rhGM-CSF凍干粉針劑，各峰的平行性較好，峰面積及峰面積百分比RSD均

2.5不同進樣體積與各組分峰面積的線性關系

取制備好的0.5 mg/ml rhGM-CSF凍干粉針劑（批號20161201），根據不同進樣體積的分析結果，如不同進樣量的各峰的保留時間、峰面積、百分含量及相應的RSD值，研究不同進樣量與相應峰面積的線性關系（進樣量為20～40 μl，對應10～20 μg的rhGM-CSF蛋白）。

2.5.1 rhGM-CSF凍干粉針劑中第1個峰（人血白蛋白）的HPLC分析 保留時間約為5.8 min的HPLC分析數據見表2，不同的進樣體積與各組分的百分含量進行擬合線性回歸，R2值為0.9999。

2.5.2 rhGM-CSF凍干粉針劑中第2個峰（人血白蛋白）的HPLC分析 保留時間約為8.2 min的HPLC分析數據見表3，不同的進樣體積與各組分的百分含量進行M合線性回歸，R2值為0.9979。

2.5.3 rhGM-CSF凍干粉針劑第3個峰（人血白蛋白）的HPLC分析 保留時間為9.3 min的HPLC分析數據見表4，不同的進樣體積與各組分的百分含量進行擬合線性回歸，R2值為1。

2.5.4 rhGM-CSF凍干粉針劑第4個峰（rhGM-CSF蛋白）的HPLC分析 保留時間約為11.0 min的HPLC分析數據見表5，不同的進樣體積與各組分的百分含量進行擬合線性回歸，R2值為0.9999。

2.5.5 rhGM-CSF凍干粉針劑第5個峰（人血白蛋白）的HPLC分析 保留時間為14.9 min的HPLC分析數據見表6，不同的進樣體積與各組分的百分含量進行擬合線性回歸，R2值為0.9964。

3討論

3.1蛋白質含量測定方法比較

蛋白質含量測定法[10]96-98主要有凱氏定氮法、lowry法、雙縮脲法、考馬斯亮藍（Brandford）法、BCA法、紫外-可見分光光度法等，其中凱氏定氮法與雙縮脲法需要較大量的蛋白樣品，并且雙縮脲法需要蛋白濃度也較高；紫外吸收法測定低濃度的蛋白時準確度較差；考馬斯亮藍G-250染色（Brandford）法一般只用于蛋白粗略定量。上述蛋白測定方法屬于非特異性的反應，當產品有蛋白類添加劑（比如人血白蛋白）時就完全不適用。并且重組蛋白藥物劑量很小，一般為微克級，需要應用更靈敏的檢測方法。

3.2 HPLC檢測法對混合組分的適用性

本文采用HPLC法對rhGM-CSF 凍干粉針劑及其單組分進行檢測，結果表明，該法可檢測出rhGM-CSF凍干粉針劑中的主成分rhGM-CSF蛋白和人血白蛋白，各峰之間的分離度較好；HPLC方法的重現性較好，相同進樣體積條件下，其峰面積及峰面積百分比的RSD均0.99，故該法可用于檢測rhGM-CSF凍干粉針劑中的活性成分的含量百分比。另外，由于不同樣品的峰面積與其進樣量呈一定的線性關系，還可在一定范圍內根據rhGM-CSF蛋白峰面積的變化，推測其對應的含量。

應用HPLC法檢測rhGM-CSF凍干粉針劑中rhGM-CSF含量，是原液評價的一種直觀、合理、有效的技術手段，具有重現性好和操作簡便等優點，能很好地滿足質控的要求，對完善該品種的質量標準提供了參考。

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篇7

[關鍵詞]骨髓間充質干細胞；骨組織工程；細胞膜片；磷酸三鈣

[中圖分類號]R318[文獻標識碼]A[文章編號]1008-6455（2011）03-0408-03

Engineering bone tissue using bone marrow mesenchymal stem cell sheet and β-tricalcium phosphate ceramic

MA Dong-yang1,MA Jing2,JIANG Dong-hong3,WANG Jian-feng3

(1.Department of Oral and Maxillofacial Surgery,2. Department of Otolaryngology,3. Department of Medical Administration，Lanzhou General Hospital,Lanzhou Command,PLA,730052,Gansu,China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the feasibility of constructing bone tissue using bone marrow mesenchymal stem cell (BMSC) sheet and β-tricalcium phosphate ceramic (TCP).MethodsWe first harvested a cell sheet from rabbit BMSCs using a continuous culture method and a scraping technique. The cell sheet was then wraped around a cylinder of β-TCP. Finally,the constructs were implanted into the subcutaneous pockets of nude mice for in vivo experiments. Gross view and histological examinations were performed to evaluate the harvested specimens. Results The cell sheet, with an average thickness of 158 mm, was composed of multi-layered cells separated in the extracellular matrix. Six weeks after implantation, the new bone tissue was present both on the edge and at the center of the TCP in sheet-TCP group. A layer of woven bone formed in the cell-sheet group. In contrast, the TCP was filled only with fibrous tissue in the TCP group,without evidence of bone formation.ConclusionThe study indicates that the combination of osteogenic BMSC sheet and β-TCP ceramic can engineer bone tissue and the engineered construct might be considered as a promising substitute for bone repair.

Key words:bone mesenchymal stem cell; bone tissue engineering; cell sheet; β-tricalcium phosphate

近年來，隨著再生醫學的迅速發展，組織工程有望為骨缺損提供理想的修復方法[1]。組織工程骨的傳統構建方法是將具有成骨分化功能的種子細胞與三維支架材料復合[1-2]。細胞在體外擴增后常用胰蛋白酶消化成離散細胞懸液，在此過程中，細胞自分泌的細胞外基質、細胞-基質連接、以及細胞-細胞連接等結構都被破壞，而這些結構對于細胞分化、特異性表型維持、分泌、組織形成等功能非常重要[3]。再者，細胞與支架材料直接復合的方法存在細胞利用率低的缺點[4]。為了解決上述問題，我們提出新的組織工程構建策略，即應用細胞膜片與可降解的外源性支架材料復合來構建工程化骨組織。為驗證這一構想，本研究選用來源豐富、容易獲取、體外擴增速度快、安全實用性、無倫理學爭議的骨髓間充質干細胞(bone marrow mesenchymal stem cell, BMSC)作為種子細胞來構建細胞膜片，同時選擇具有良好的生物相容性、可降解性、與松質骨的結構類似的多孔樣磷酸三鈣(β-tricalcium phosphate, TCP)作為支架材料。

1材料和方法

1.1 材料：3月齡成年新西蘭大耳白兔，體重2.6～3.0kg，雌雄不限，由總醫院動物中心提供。6周齡裸鼠(NIH strain, outbred) 購自中國科學院上海實驗動物中心。DMEM培養基（購自Gibco, Invitrogen Corp）；L－谷胺酰胺、地塞米松、抗壞血酸、β-甘油磷酸鈉、胰蛋白酶（均購自美國Sigma公司，胎牛血清(杭州四季青公司)，CO2細胞培養箱(Forma公司3110Ⅱ，美國)，倒置顯微鏡及照相系統(Olympas IX71. A21PH, 日本)，離心機(Heraens Cryofuge 8000, 德國)，一型超凈工作臺（蘇州凈化設備廠）。

1.2 方法

1.2.1 兔BMSCs分離、培養、及細胞膜片構建：氯胺酮（10 mg/kg）肌內注射麻醉下，切取兔雙側髂骨并劈開，用含200 U/ml肝素的低糖DMEM沖洗髓腔、過濾骨髓、離心、棄上清、加入含10%胎牛血清的低糖DMEM培養液，輕輕吹打成單細胞懸液，接種到直徑為10cm的普通培養皿里。加入含100 U/ml 青霉素、10%胎牛血清、50mg/L抗壞血酸、0.27g/L L-谷胺酰胺的低糖DMEM，置于37℃、5% CO2的孵箱內培養，每隔2天更換培養液一次。當細胞達90%融合時，用0.25%胰酶消化后按1:3 傳代，換成含10%胎牛血清的高糖DMEM培養液，90%融合時再消化，按密度1×105個/cm2接種到直徑為10cm的培養皿。細胞融合后，更換為含10%胎牛血清，1×10-7mol/L地塞水松，50mg/L抗壞血酸，10mmol/L β-甘油磷酸鈉的高糖DMEM條件培養液，每隔2 天換培養液1次，經2周的連續培養，用細胞刮刀由外周向中心沿底壁仔細刮起，獲得完整的細胞膜片[5]。

1.2.2 細胞膜片顯微結構觀察：隨機選取所獲細胞膜片，4%多聚甲醛固定，梯度乙醇脫水，常規石蠟包埋，切成5μm厚切片，蘇木精－伊紅染色（H&E）光鏡下觀察組織結構。部分膜片樣本經丙酮固定，鈣鈷法進行堿性磷酸酶染色。部分膜片經2.5% 戊二醛固定，梯度乙醇脫水，干燥，噴金，掃描電子顯微鏡觀察標本表面形貌及層面結構。

1.2.3 體內試驗：實驗組將單層細胞膜片剪切成10mm×25mm的長方形狀（圖1A），并由一端卷起包裹預制成的TCP圓柱體（直徑0.8cm，高度1.0cm，70%孔隙率，平均孔徑450± 50μm，圖2A、B），靜置孵育24h后移植到裸鼠背部皮下。作為對照，相同大小的細胞膜片和同規格經成骨培養基孵育24h的單純材料也進行皮下移植。術后6周處死動物取材，進行大體觀察及組織形態學分析：①組織學定性分析：各樣本經石蠟包埋、切片后HE及Mallory 三色染色光鏡觀察；②組織學半定量分析：每組每例樣本連續4張5μm厚切片，橫貫整個樣本，Mallory 三色染色后由獨立的觀察者采用NIH Image J圖像分析系統在10倍鏡下分析切片中骨樣組織（磚紅色）與纖維組織（淡藍色）所占的面積百分比。每張切片隨機選取4個視野，計量后收集各組數據，取其平均值。

2結果

2.1 膜片的構建：融合BMSCs經過2周連續培養，皿底有透明乳白色薄膜樣物質形成，表面散在多個白色結節。用細胞刮沿皿底輕刮即可使其與培養皿底分離，刮起后膜片自行收縮，具有彈性和較穩定的機械性能，可以用鑷子或血管鉗進行鉗夾操作。HE染色，所獲膜片具有類似三維結構，由約8～10層細胞及細胞外基質組成，厚度平均158μm （圖1B）。掃描電鏡下觀察：膜片中細胞被細胞外基質包埋，基質表面可見礦化結節聚集（圖2C）。

2.2 體內實驗

2.2.1 移植6周后：實驗組和TCP組取材標本的形狀與移植前無明顯變化，但前者表面較硬，容易與周圍軟組織分離，后者表面被覆一層質軟的纖維組織，不易分離。膜片組見紙片狀硬質組織形成。

2.2.2 組織學結果：實驗組的外周表現為礦化程度較高的板層狀骨組織，可見致密骨基質、骨陷窩、骨細胞、成骨細胞等結構，材料內部的孔隙中央為纖維組織，周邊見低度礦化的小梁骨（圖3A、B、C）。組織定量學分析，骨與纖維組織的所占面積分別為22.5%和59.6%。單一TCP組孔隙內為纖維組織（面積比為76.1%），未見骨或軟骨樣組織。單純膜片組見片狀編織骨形成，致密的骨基質中可見類髓腔樣結構（圖3D）。

3討論

本研究證實了BMSC膜片與多孔TCP支架材料復合構建組織工程骨的可行性。與傳統方法相比，本研究應用的構建方法具有以下優點：①采用物理刮治的方法將體外擴增的細胞連同培養過程中自分泌的細胞外基質、形成的細胞基質連接一同收集，避免了傳統用胰蛋白酶消化的有創收集方法；②具有較高的細胞利用率。

細胞膜片技術由日科學家Okano等[6]發明，他們將溫度敏感性聚合物凝膠涂層于普通培養皿底壁制備出了溫敏性培養皿，在37℃時聚合物對其表面擴增融合的單層細胞膜片有絕對親和性，但降至其臨界溶液溫度32℃以下時，此聚合物對單層細胞膜片的親和性消失，使細胞膜片自動從培養皿底壁釋放。該培養技術避免了對細胞進行傳統胰蛋白酶消化等處理，進而保留了細胞自分泌的細胞外基質以及一些重要的細胞表面蛋白如離子通道、生長因子受體、細胞-細胞連接蛋白。利用此技術，角膜、皮膚、心肌、肝組織等多種細胞密集型軟組織已被成功構建[3]，但在用于骨組織方面的研究較少。2007年，Zhou等[4]首先報道用細胞膜片技術與復合離散細胞懸液的聚合物-陶瓷材料（磷酸三鈣-聚已酸內酯復合物）構建出組織工程骨；Gao等[7]則用多層細胞膜片與管狀珊瑚構建出管型骨。Okano等獲取膜片的技術操作程序較復雜，而且應用溫敏聚合物，可能會影響細胞的增殖分化。同時該技術獲得的膜片為單層細胞組成，厚度只有約10μm[8]。相比之下，我們的細胞膜片獲取方法簡單易行，無需特殊材料或者設備，而且由多層細胞及細胞外基質組成，厚度可達158μm，更像三維結構的組織。另外，一定的厚度賦予了膜片相應的彈性和較穩定的機械性能，增加了可操作性。本研究則用單層膜片與已用于臨床的人工骨替代材料TCP復合。

有趣的是，實驗組中，不僅在支架材料的外周有礦化程度較高的骨組織形成，而且在材料內部也可見相當數量的骨小梁。這一結果表明：作為細胞釋放載體系統，細胞膜片可賦予無機材料以生物活性。另一個有趣的結果是，與單純材料組相比，實驗組材料孔隙結構內的纖維組織量較少，意味著細胞膜片在促進成骨的同時阻止了纖維組織的張入，有望成為新型的具有生物活性的組織引導再生膜。

組織工程骨要取代自體骨移植大范圍應用于臨床，首先需要解決大體積支架內部細胞的氧氣、營養供應以及代謝產物排泄。種子細胞在體外依賴于培養介質提供營養，而植入到體內后，如同非血管化的游離骨移植，則需依靠受區組織液的彌散滲透作用獲得營養。然而，理論上體內環境通常所能提供的最大彌散距離是150～200μm，因此大體積復合物內相當數量的細胞因為無法獲取營養物質并排泄代謝產物而死亡[9-10]。盡管已有諸多方法可促進組織工程植入物與宿主血管網的緊密聯系，提高細胞成活率和組織修復功能，但目前為止，任何促進血管生長的方法都需要5～7天以上時間才能使植入細胞獲得血液供應，在這段時間內，細胞需從組織液中獲得足夠營養[10]。本實驗所應用的BMSC膜片厚度為 158μm左右，在有效組織彌散范圍內。我們推測將其植入體內后易于成活，有利于提高細胞治療的效率。

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篇8

[關鍵詞] 重組粒細胞集落刺激因子；再生障礙性貧血；感染；免疫功能

[中圖分類號] R556 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2016）09（b）-0060-04

[Abstract] Objective To explore the effects of recombinant human granulocyte colony stimulating factor （rhG-CSF） on immune function in patients with aplastic anemia （AA） complicted with infection. Methods The data of 140 cases of patients with AA complicted with infection in Hainan Provincial People's Hospital from January 2011 to June 2014 were retrospective analyzed. There were 72 patients treated with rhG-CSF combined with Cyclopsorin， taken as the experimetal group； and the other 68 cases of patients only treated with Cyclopsorin were taken as the control group. The therapeutic effect， mortality related to infection， rates of clonal evolution and changes of peripheral blood cells and T cell subsets levels of the two groups after treatment were compared. Results The total effective rate of the experimetal group wa significantly higher than that of the control group （P < 0.05）. The mortality related to infection of the experimetal group was lower and the rate of clonal evolution was higher than those of the control group， but there were no significant differences between the two groups （P > 0.05）. In the experimetal group， after treatment the WBC， PLT， Hb levles increased， CD3+and CD4+ levels decreased and CD8+ level increased than those of before treatment， with statistically significant differences （P < 0.05）； while those indexes of the experimetal group were all significantly improved than the control group （P < 0.05）. Conclusion The treatment effect of rhG-CSF in patients with AA complicted with infection is remarkable， with low infection rate， which can promote the recovery of immune function， safe and reliable， and it is worthy of clinical reference.

[Key words] Recombinant human granulocyte colony stimulating factor； Aplastic anemia； Infection； Immune function

再生障礙性貧血（aplastic anemia，AA）是血液系統較為常見的惡性疾病，多見于兒童群體，主要是由于多種因素引起的骨髓造血功能障礙，其特征為外周血全血細胞減少，故AA多合并感染的發生，會進一步對造血功能產生較大損害[1]。主要臨床表現為貧血、感染、出血、發熱等，若不及時治療，對患者健康造成嚴重影響，甚至危及其生命。因此，采取合理有效的治療措施，以防治感染、促進造血功能恢復顯得尤為重要。重組人粒細胞集落刺激因子（recombinant human granulocyte colony stimulating factor，rhG-CSF）是機體的造血因子之一，對增強中性細胞功能及促進造血干細胞增殖具有重要作用[2-3]。為探討rhG-CSF對AA并感染患者免疫功能的影響，本研究將海南省人民醫院（以下簡稱“我院”）收治的AA并感染患者140例作為研究對象，對其進行rhG-CSF治療，取得滿意效果，現報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性調查分析2011年1月～2014年6月我院收治的140例再生障礙性貧血并感染患者資料。入選標準：①符合《內科學》中關于AA的臨床診斷標準[4]；②由臨床癥狀、病理檢查等確診；③無精神疾病史。排除標準：①對免疫抑制劑或激素過敏者；②合并有高血壓、糖尿病等其他非感染性疾病者；③有嚴重肝腎功能障礙者；④妊娠及哺乳期婦女。將140例患者按治療方式分為實驗組（72例）和對照組（68例），實驗組男43例，女29例；年齡23～49歲，平均（32.6±7.8）歲；上呼吸道感染19例，肺部感染14例，口腔黏膜感染13例，胃腸道感染12例，敗血癥14例。對照組男41例，女27例；年齡21～46歲，平均（31.8±7.6）歲；上呼吸道感染17例，肺部感染12例，口腔黏膜感染13例，胃腸道感染11例，敗血癥15例。兩組性別、年齡、感染情況比較差異無統計學意義（P > 0.05），具有可比性。

1.2治療方法

兩組患者均采用營養支持、抗感染等常規對癥治療。對照組采用環孢霉素（天津市中央藥業有限公司，批準文號：20093879）治療，5 mg/kg，2次/d，維持血藥濃度為150～300 mg/mL，持續外周血細胞計數升高達平臺期后逐漸減量；潑尼松龍片（上海信誼藥廠有限公司，批準文號：20150906）每天1 mg/mL，連續治療15 d后逐漸減量，至1個月后停用。實驗組采用刺激因子聯合環孢霉素治療，給予rhG-CSF5（上海三維生物技術有限公司，批準文號：20150629），每天5 μg/kg，同時服用環孢霉素，5 mg/kg，2次/d，連續治療3個月。

1.3 觀察指標和判斷標準

外周血象及T細胞亞群變化分別于治療前和治療后3個月進行檢測，血常規檢查采集2 mL靜脈血，用EDTA管抗凝，T細胞亞群檢查采用流式細胞儀。

比較兩組感染相關死亡率、克隆性演變發生率，其中，克隆性演變包括骨髓增生異常綜合征、夜間陣發性血紅蛋白尿及急性髓系白血病等。

臨床療效根據1987年第四屆全國再障學術會議修訂的《再生障礙性貧血診斷標準與療效標準》[5]。基本治愈：貧血、出血等臨床癥狀完全消失，白細胞（WBC）水平達到4×109/L左右，血小板（PLT）達80×109/L，隨訪1年以上沒有復發者；②顯效：臨床癥狀顯著改善，PLT比治療前有明顯增加，WBC達3.5×109/L，隨訪3個月病情穩定或繼續進步者；③有效：出血及貧血癥狀明顯好轉且基本穩定，在不輸血情況下血紅蛋白（Hb）較治療前1個月增長30 g/L以上，并維持3個月不變；④無效：臨床癥狀未見明顯好轉或加重?？傆行?基本治愈+顯效+有效。兩組均在治療1年后評定療效。

1.4 統計學方法

采用SPSS 20.0統計學軟件進行數據分析，計量資料數據用均數±標準差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗；計數資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗；等級資料采用秩和檢驗。以P < 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組治療1年后臨床療效比較

實驗組總有效率為95.83%，對照組總有效率為76.47%，實驗組明顯優于對照組（P < 0.05）。

2.2 兩組感染相關死亡率比較

治療后實驗組感染相關死亡率為4.17%，對照組感染相關死亡率為14.71%，實驗組低于對照組，但兩組比較差異無統計學意義（P > 0.05）。

2.3 兩組克隆性演變發生率比較

治療后實驗組克隆性演變發生率為9.72%，對照組克隆性演變發生率為2.94%，實驗組高于對照組，但兩組比較差異無統計學意義（P > 0.05）。

2.4 兩組外周血象及T細胞亞群變化比較

治療前兩組外周血WBC、PLT、Hb及T細胞亞群CD3+、CD4+、CD8+水平差異均無統計學意義（P > 0.05）；治療后兩組WBC、PLT、Hb較治療前升高，T細胞亞群CD3+、CD4+較治療前下降，而CD8+較治療前顯著升高，差異均有統計學意義（P < 0.05）；實驗組治療后WBC、PLT、Hb、CD8+水平明顯高于對照組，CD3+、CD4+明顯低于對照組，差異有統計學意義（P < 0.05）。見表4。

3 討論

AA是惡性血液疾病常見的類型之一，AA的發病機制較復雜，主要與以下三點有關：①“種子”學說[6]，即骨骼中造血干細胞缺陷；②“土壤”學說[7]，即骨髓造血微環境出現異常；③“蟲子”學說[8]，即機體的免疫功能異常。其中，免疫功能異常被臨床認為是AA主要的發病機制，因此，目前臨床多采用免疫抑制療法（immuno suppressive therapy，IST）和造血干細胞移植（hema-topoietic stem cell transplantation，HSCT）作為最佳的治療方法，但由于HSCT費用較高及來源困難等，使得IST成為臨床主要的治療手段[9-10]。

抗胸腺球蛋白主要是通過T淋巴細胞促進造血干細胞生長，增強造血生長因子的敏感性[11]。環孢霉素A屬免疫抑制劑，主要通過抑制T淋巴細胞的增殖，從而降低γ干擾素（IFN-）及白介素-2（IL-2）的產生[12]。采用rhG-CSF聯合環孢霉素治療，較單一采用環孢霉素治療效果更為顯著，可加強T淋巴細胞毒性，最大程度提高藥物療效，對AA的臨床治療效果具有極為重要的作用[13]。但是由于AA患者具有中性粒細胞缺乏的特點，因而機體自身抵抗力低下，極易發生感染[14]。因此，感染發生后，應在短時間內及時控制感染，以促進造血功能恢復，是AA治療的關鍵。

rhG-CSF是一種造血生長因子，能有效促進造血干細胞的增殖、分化及成熟，從而促進骨髓造血功能恢復[15-16]。本研究顯示，rhG-CSF具有以下幾點作用機制：①促進中性粒細胞釋放花生四烯酸及白細胞堿性磷酸酶，從而產生中性粒細胞超氧陰離子；②刺激中性粒細胞增殖和分化，從而增強成熟粒細胞吞噬作用；③增加白細胞數量的同時，增加白細胞的黏附性，發揮抗感染作用。故rhG-CSF對AA并感染患者的治療具有極為重要的意義[17]。相關研究認為，將rhG-CSF應用于AA合并感染患者治療中不僅效果顯著，同時安全性和可行性也較好[18-19]。

本研究結果顯示，實驗組總有效率明顯高于對照組，表明rhG-CSF聯合免疫抑制法較單一采用免疫抑制法治療效果顯著。實驗組感染相關死亡率低于對照組，但兩組比較無顯著差異（P > 0.05），這可能與樣本量較小有關。rhG-CSF具有一定的不良反應，本研究顯示，實驗組克隆演變發生率高于對照組，兩組比較無顯著差異（P > 0.05），說明本研究結果不支持rhG-CSF與免疫抑制法聯用時增加克隆性疾病發生率的觀點。另外在本研究中，治療后，實驗組外周血象WBC、PLT、Hb升高幅度優于對照組，且T細胞亞群CD3+、CD4+、CD8+改善幅度優于對照組，與相關研究結果一致[20-21]。進一步表明，rhG-CSF聯合環孢霉素較單獨采用環孢霉素治療效果更為顯著，更能有效提高AA并感染患者的免疫力，這可能與rhG-CSF加快造血功能恢復有關。

綜上所述，采用免疫抑制法聯合rhG-CSF對AA并感染患者進行治療，能有效提高治療效果，降低感染導致死亡的發生率，且克隆性疾病的發生率增高不明顯，從而促進免疫功能恢復，對臨床進一步推廣使用具有一定價值。

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寒假學習計劃內容

一、閱讀計劃

一個寒假有30天，那么30天讀2-3本書就可以了。當然，也可以選擇讀一個系列的書。

讀書筆記和讀后感是一個方面，另一方面，可以把讀過的書籍做一個總結，以思維導圖或者畫報的形式呈現出來。

二、復習計劃

每科都是滿分的忽略此條。

期末考試了，為什么還要復習?

期末考試，是一次總結性的考試。不少學校考完試之后，還要校對試卷才能放寒假。不過，大部分的學校并沒有這樣做。

通過考試，能夠發現孩子知識掌握得不牢固的地方。如果期末考試考得不太好，那寒假的時候，就很有必要對薄弱的地方進行鞏固和提高。

一二三年級的內容，我們更新得比較全面了。

只要找到不會的點，回去看看視頻，做做對應的練習就可以了。

三、預習計劃

一二年級的語文數學視頻和一課一練都已經更新完了，如果孩子的基礎比較扎實，完全可以自學。

在預習的時候，語文以生字的學習為主，包括生字的讀音、字形、部首、筆畫數、組詞、造句。三年級的還要自己查字典，分不同的字義組詞，再造句。

除此之外，還可以先背誦古詩。

寒假的時候，我們還會同時更新三年級的語文數學同步學習視頻。

四、寫作

一年級的小朋友，下學期就要正式開始學習看圖寫話了。那么，在寒假的時候，先接觸一下，到時候就不會說跟不上教學進度。

二年級的小朋友，看圖寫話不能滿足于寫2-3句話。需要學習一些寫作的方法，把內容寫得更加充實。

我們陸續更新了不少看圖寫話，有需要的家長可以打印出來給孩子練習。

三年級的小朋友，我們建議一周寫2-3篇日記，可以把春節里的習俗都寫下來。

學習計劃實施方式：

合理制定大目標和小目標

學習規劃首先要制定學習目標，大目標是整個學期所要達到的成果，小目標可以具體到一周，每個周末回顧一下本周的學習規劃是否完成，再定下新的目標。一個看得見的目標能給孩子提供源源不斷的動力。另外，家長不要拿自己的孩子和別人家的孩子比較，如果真的要比較，就拿本周的孩子和上一周的孩子作比較吧。

篇10

一、活動目的：

1、中秋節是中國的傳統節日，通過中秋節讓學生初步理解中國傳統節日中所蘊涵的文化內核，真正了解節日，了解中國傳統文化，幫助青少年增強科學節日文化理念，弘揚創新節日文化。

2、介紹中秋節的來歷，了解中國各地過中秋的風俗。

3、增強學生愛父母愛家鄉愛祖國的感情，讓節日真正給我們帶來快樂與幸福。

二、活動時間：2012年9月25日

三、活動準備：蘇軾的《水調歌頭》ok帶、中秋燈謎、圖畫、月餅

四、活動地點：八(7)班教室

五、活動過程：

老師導入：中秋節，是中國的傳統節日。從去年開始，國家把這個節日定為法定節日，休息一天。從而可以看出，中國逐漸對傳統文化和民俗越來越重視。今天我們一起來走進中秋佳節，一起來感受中秋佳節。

一 、中秋節的來歷和風俗

1、 中秋節的由來

(1)老師：同學們，每當天氣晴朗的夜晚，天空上有什么?月亮像什么?(有月亮。月亮像玉盤、像圓餅。)

(2)、出示圓形月餅，讓學生比較。

老師：月亮在最圓的時候是什么日子?(每個月的十五日左右。)

(3)、說中秋節的由來。

老師：誰知道中秋節的來歷?

(4)、小結：同學們都說得很好，八月十五中秋節的時候月亮圓滿，象征團圓，所以也叫團圓節。它起源于魏晉時期，在唐朝初年成為我們國家固定的節日，這也是我國僅次于春節的第二傳統節日。中秋的另一個說法是：農歷八月十五這一天剛好是稻子成熟的時刻，每家都拜土地神，中秋可能是秋報的遺俗。

2、中秋節的傳說與民間故事

(1)老師引：中秋節在我們中國人眼里，可是非常重要的佳節。“月圓人團圓”，

那是一個溫馨和諧、及富詩情畫意的節日。中秋節最有名的傳說故事就是嫦娥奔月了

老師：有誰能來講講有關中秋節的傳說，中秋節的起源及一些民間故事? 生：嫦娥奔月(后羿射日)：

(2)指名講述嫦娥奔月的故事。

(3)引導學生講述不同版本的傳說，吳剛伐桂;玉兔搗藥等等。

老師(小結)：看來中秋節是最有人情味、最詩情畫意的一個節日。

3、學生介紹中秋節的習俗

老師引：好，聽了我給你們講的故事，你們一定意猶未盡吧。現在我們請嫦娥姑娘來給我們介紹中秋節有趣的傳統習俗。(《拜月娘》、《拜土地公》)

二、中秋詩詞佳句知多少

老師：有人說，每逢佳節倍思親，團圓節這份思念當然會更密切，尤其是一輪明月高高掛的時期，詩人就會用詩詞來表達對家鄉、親人的思念。

(1)、出示圖片1

老師問： 我們來看這幅畫，同學們腦中有沒有最佳的詩句來配這幅畫中的情景。 ——(李白的《靜夜思》)

學生齊背《靜夜思》。

(2)、老師：中國畫詩書畫印融為一體，這幅中國畫書畫印都有，惟獨缺詩，我們給它題首詩，使它變得更完整。

(學生發言)(舉杯邀明月，對影成三人。選自李白《月下獨酌》)(你們知道 “但愿人長久，千里共嬋娟” 這句話出自誰人之口嗎?

(3)對了，幾百年前丙辰中秋的一個夜晚，正是大文豪東坡先生寫下了著名的中秋詞《水調歌頭?明月幾時有》，“但愿人長久，千里共嬋娟”就出自這首詞。老師：今天，我們就一起來欣賞這首絕妙好詞。

(4)有感情朗讀：蘇軾的《水調歌頭》，劉禹錫的《八月十五夜桃源玩月》

(5)學唱蘇軾的《水調歌頭》

我國的詩人大多是憂國憂民的，又大多是命運坎坷的，他們經常流浪在外，客居他鄉，思鄉成了他們生活中重要的一部分，因此有了許多以思念故鄉為題材的詩作，你還知道哪些呢?

(6)指名背誦《泊船瓜洲》、《九月九日憶山東兄弟》等。

三、 中秋佳節話月餅

1、品嘗月餅，感受月餅的香甜。

老師：學生們每年是怎樣過中秋的呢?(隊員講出各種賀中秋的民俗活動)

(1) 引出——吃月餅、送月餅

月餅的外形——圓，象征團圓，表達合家團圓。

餅中有餡，表面有花紋，花紋主要有月亮、桂樹、玉兔等在圓中表達美好的愿望。現代的花紋設計更是各異，別致。(欣賞月餅圖片若干張)

老師：展示月餅事物，并簡單介紹圓形設計的格式。(對稱、均衡)

(2) 動動手，設計一個別致、精美的月餅圖案。(背景播放輕快的音樂)

(3)學生作品欣賞。由學生講解自己的設計意圖。

2、舉辦月餅宴

老師：中秋節，為什么要和家人一起吃月餅?往年你和誰一起吃月餅?(吃月餅表示團圓;和家里人一起吃;還和好朋友一起吃。)

師：你吃的月餅是買的呢，還是別人送的?誰送的?

老師：為什么要送月餅?(過團圓節，送月餅表示和家人團圓。)咱們班級也是一個大家庭，我們都是這個家庭的成員，你們愿不愿意和全體同學一起過這個中秋節?(板書課題)

① 送月餅：

② 吃月餅(大家一起吃月餅，體驗班級大家庭的溫暖和團圓)

四、中秋燈謎

1、老師：在許多地方八月十五這天會有燈會，其中一項就是猜燈謎。得月樓前先得月。猜一字(棚)

2、重逢。猜一字(觀)

3、舉杯詢包拯。打一句宋詞(把酒問青天)

4、十五的月亮。打一成語(正大光明)

五、游戲：“月”字組詞接龍。

要求：以“月”字開頭組詞，以“中秋節”收尾。

優勝：組詞過程短者獲勝。 六、老師總結

同學們了解了那么多關于中秋節的知識，又為過今年的中秋節出了那么多好主