成人謎語范文

導語：如何才能寫好一篇成人謎語，這就需要搜集整理更多的資料和文獻，歡迎閱讀由公務員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

大有人在，漢語成語，拼音是dà yǒu rénzài，指某類人數量很多。兼語式;作謂語;同“不乏其人”。這里給大家分享一些關于成語大有人在的謎語，供大家參考。

一、大有人在成語謎語矢 …… 打一成語

二、大有人在成語解析形容某一種人為數不少。《資治通鑒·隋紀煬帝大業十一年》：“帝至東都，顧眄街衢，謂侍臣曰：‘猶大有人在。’意謂向日平楊玄感，殺人尚少故也?！?/p>

三、大有人在成語造句1.只要你肯學,師傅大有人在。

2.我們這個時代,風流倜儻的青年大有人在。

3.這些人攬轡澄清、志在治國安邦的,也是大有人在。

4.像他這樣的貪污犯現在大有人在。

5.在解放軍戰士中，能百步穿楊的大有人在。

6.像他這樣愛占便宜的人大有人在。

7.舊社會，煙館賭局到處都是，在這些伐性之斧下喪生的大有人在。

8.在中青年教師隊伍中殫見洽聞之士是大有人在的。

9.至今，不相信自己，只按教條辦事，像鄭人買履的人還大有人在。

10.不怕你笑，我們團裡濫竽充數者大有人在。

11.穿著奇裝異服招搖過市的大有人在。

12.即便是今天,小富即安、不思進取的仍大有人在,就是很好的證明。

13.一邊呵佛罵祖,一邊割肉飼鷹者大有人在。

14.但,修煉界之中,忌才的人也大有人在,如若無法拉攏,那就出手毀去,也不愿這樣的人投入到別的勢力之中。

15.但是因為分布區域狹窄,所以野生數量奇缺,捕捉出售大有人在,價格比起三棱閉殼龜,也就是俗稱的金錢龜還要高昂的多。

16.武藝高強者被拜將封侯者,也大有人在。

17.再看某些知名專家學者和教授，一切向錢看，在其位不謀其政者不乏其人，滔滔不絕卻不著邊際者大有人在，能解決實際問題者顯得彌足珍貴。

18.盡管對她那行云流水般富有表現力的動作持嘲笑態度的批評家大有人在，但伊莎多拉卻為死板的古典舞蹈界帶來了靈動性和自我表現力。

19.另外一家銀行沈河支行的信貸員告訴記者，現在等了三四個月的大有人在，年前獲得貸款的希望很渺茫。

20.早期移民到加利福尼亞的錫克教信徒與墨西哥裔美國婦女通婚甚為普遍，而第二、第三代日裔與外族通婚也大有人在。

21.可事實上世人多半受寂寞所致,著急開始,然后不了了之的人大有人在,感情猶如泛濫之河水,分文不值也。

22.麥克納斯伯爵是紫荊花帝國名將,威名赫赫,麾下能征慣戰者大有人在,武技高明的騎士多如牛毛,杜昂要學武技很方便,根本就不用到外面另請老師。

23.佩服佩服,要知道,當今天下,能做出‘百尺竿頭’詩句者,大有人在,但是能做出‘百尺竿頭’戰詩者,少之又少。

24.齊風興奮的說道,這三天里他們經常聽到有人在不遠處廝殺,一言不和便殺個你死我活的大有人在,更有甚者只是剛碰面便直接打起來的。

25.準提是善人,那和準提作對的白云就是大大的惡人了,其中中長舌男女大有人在,好事不出門,惡事傳千里,一時之間牛豪惡名傳遍洪荒。

26.我可是提醒過你的,交完錢跟進不進得來可是兩碼事,每年因為不能通過入學測驗而給學院白送錢的冤大頭可是大有人在。

27.藩鎮將領一心保唐的在少,保存實力懷不臣之心的在多,又深懼我軍之威,堅守不出的必大有人在,剩下不聽勸告的,可遣大將痛擊,如此一來,聯軍之?？山?。

28.袁紹只覺得自己都快被所氣爆了,這幫諸候真是成事不足,敗事有余,聞功則喜,聞過則責,出謀劃策未見有人,落井下石更是大有人在。

29.知道緣由后,更似已經有人開始在楚墨的背后指指點點,甚至有的破口大罵楚墨的惡劣行徑了,而為徐陽抱打不平的更大有人在,局面朝著楚墨不利的情形發展著。

30.那些人倒了,但是,在他們的鼓噪聲中,火中取栗者、投機取巧者、陰謀家野心家、各色殘渣余孽等等,在臺上的仍然大有人在。

31.陰天樂突然問道,現在田中財團內部為了繼承權打得一塌胡涂,身為首位繼承人的田中麗奈自然成為了多方的眼中釘、肉中刺,想必妄想要她命的大有人在。

32.還有就是到現在人們也沒有形成一個統一的意見,支持兩種意見的人都是大有人在,雙方各抒已見爭論不休。

33.民間的球迷愛屋及烏的認為蔡智的教練水平也到了國際級,希望朱廣滬讓出國家隊主教練位置的大有人在。

篇2

釋義：舊時神怪故事中形容兇神惡鬼的面貌，現形容人面貌極其兇惡。

出處：許仲琳《 封神演義》第六十三回：子牙見對營門一人， 三首六臂青面獠牙。

示例：魯迅《 吶喊·狂人日記》：那青面獠牙的一伙人，便都哄笑起來。

近義詞：呲牙咧嘴、 橫眉豎眼。

篇3

1、 針鋒：針尖。針尖對針尖。比喻雙方在策略、論點及行動方式等方面尖銳對立。

2、雙方爭執，寸步不讓 。

出處： 宋·釋道原《景德傳燈錄》卷二：“夫一切回答，如針鋒相投，無纖毫參差?！?/p>

篇4

在信息技術飛速發展和世界全球化的趨勢下，創造能力和創新意識是知識經濟和社會發展的需要。高校是傳承文化和培養人才的重要陣地，擔負著為國家培養德才兼備、國際一流、適應社會經濟發展需要的創新型人才的重任。如何使大學生的創新意識和創新能力得到良好的培養和訓練，從而適應社會經濟發展的需要，成為創新型人才，成為世界范圍內高等教育研究的重要課題[1]。 

現代密碼學課程實踐性要求很高，不僅需要掌握理論知識和前沿知識，還需要把所學的知識用到實踐中去，并在應用中不斷地發現問題，思考問題，解決問題[2]。傳統的教學過程中，學生自始至終處于被灌輸的地位，缺乏主動探索、主動發現的學習環境與空間，無法滿足現代信息社會對人才的需求[3]?！叭蝿镇寗邮健苯虒W模式，即引導學生在特定的任務驅動下進行自主地探究，建構起屬于自己的知識與能力。借助現代信息技術、網絡技術和多媒體技術所具有的超文本特性和網絡特性，基于任務驅動的教學模式改革有利于實現探究性和發現式學習，為學生發散性思維、創造性思維的發展和創新能力的培養提供了廣闊的空間和便利的條件。 

1 現代密碼學課程特點分析 

⑴ 學科面廣，知識點多 

現代密碼學是一門交叉學科，涵蓋內容廣泛，涉及到數學、情報學、圖象學、計算機、通信、物理、生物等多個學科[4-5]。現代密碼學的理論基礎是計算數論、抽象代數、概率論等基礎學科，是數學理論知識在信息學科中的應用。同時，現代密碼學又與計算機和通信學科緊密相聯，用于保證信息在計算機和通信中的安全性。另外，現代密碼學領域的一些新興技術又與圖形學、生物學等學科密切相關，比如數字水印是對圖象、視頻等載體信息的數據格式進行處理，DNA密碼利用生物技術對DNA分子進行計算研究。如何恰當地編排學科知識內容學習，又能合理地貫穿這些知識點是現代密碼學課程需要考慮的問題之一。 

⑵ 教材內容陳舊，教學內容不夠前沿 

目前大多數現代密碼學教材理論知識都采用經典算法，如DES、AES、RSA、MD5等比較有代表性的算法。雖然這些算法對學生了解相關密碼體制有著巨大的幫助，但無法使學生了解到最新的研究成果。比如公鑰密碼體制，通常書中對RSA、ELGamal、橢圓曲線、背包密碼等經典算法有詳細的算法描述和安全性分析，而對于基于身份的密碼體制、基于屬性的密碼體制這些新的研究熱點，卻很少有教材介紹，即使有，也是簡單介紹其概念和原理，缺少具體對算法的研究。學生無法從書中了解到前沿知識，學到的知識永遠落后于實際應用中的技術，容易產生所學知識無用的想法。 

⑶ 實踐性強，教學模式單一 

現代密碼學是一門實踐性很強的課程，但是大多數院校安排課時是以理論課時為主，實踐課時較少。以本校為例，現代密碼學理論課時40個學時，實踐課程僅有8學時。學生缺乏自己動手實踐的機會，普遍反映學習算法時比較吃力，比如RSA，DES，AES，ELGamal等算法原理在課堂上都能聽懂，但真正上機編寫卻無從下手，在實際中不知如何應用。 

因此，針對現代密碼學的課程特點，以任務驅動引導學生自主探究學習，強調學生的主體作用，有助于提高學生的學習興趣。把理論與實踐課程相結合，注重實踐環節，加強學生實踐能力的培養，可以讓學生更好地了解所學內容的實用價值。培養學生主動學習、獨立思考以及團隊合作的能力，從而提高教學質量。

   2 教學內容任務設計 

現代密碼學包括古典密碼、序列密碼、分組密碼、公鑰密碼、雜湊函數、數字簽名及密鑰管理等基礎內容，涉及內容比較多。將現代密碼學整個知識結構理清，認清各個章節的內在聯系，將大大提高效率。整體上以理論教學為引導，注重任務和實踐，將知識設計在一個或幾個任務之中，并且各個任務之間能有一定的聯系，幫助學生理清整體知識結構?；谌蝿镇寗拥慕虒W模式目標在于充分體現“教師主導作用，學生主體作用”的教學理念，引導學生發現問題、分析問題、解決問題。 

任務設計是實踐性教學關鍵的一步，每一節課都應該提前思考并設計好教什么、怎么教，通過什么樣的方式調動學生的學習積極性，設計什么樣的任務培養學生的邏輯思維能力等等。任務設計難度不能過大，使學生無法完成，也不能設計過于簡單，無法達到教學目標。因此，任務設計時不但要依據教學目標，還需要滿足學生的層次需求，更重要的是，任務要具有趣味性、知識性、實用性、挑戰性。①趣味性。該特性主要是借助Flash、視頻、PPT等多媒體引發學生的學習興趣，如任務一通過網購安全、手機隱私安全等問題作為切入點，使學生了解現代密碼學與信息安全的關系，掌握現代密碼學課程的內容，突出學習密碼學知識的必要性和重要性。②知識性。任務設計時要符合教學目標要求，能夠將需要學生掌握的知識涵蓋在任務中。通過任務，學生不但加深了對知識點的理解，而且更加清楚不同算法的優缺點及其之間的聯系。③實用性。通過將任務與理論相結合，通過將理論知識轉變為解決實際應用中的問題，使學生能夠運用所學的知識和自己的經驗提出解決方案，激發學生積極的學習態度，培養學生解決問題的能力。④挑戰性。每個班級中的學生學習程度都是有層次的，設計任務時應該考慮不同程度的學生，給每個學生多種選擇。對一些學有余力的學生，可設計具有挑戰性的任務，充分挖掘此類學生的潛力。 

3 基于任務驅動的教學方法實施 

教學內容實施過程中，重在發揮學生的主體作用，通過啟發引導、自主探究、協作交流、總結提高等具體的實施，提高學生自主學習能力。 

啟發引導。課堂內容與任務確定后，需要教師對任務場景進行分析，向學生提出若干啟發性的問題，引導學生深入思考，使學生快速找到問題的切入點，對問題進行分解、自主分析，提出解決方案。這個環節，教師的角色由傳統的“授”轉變為“引”，需要教師作好充分的準備工作，摸清楚學生的學習狀態、認知能力、興趣愛好等基本特點，以學生積極接受的方式引導學生。 

自主探究。該環節是基于任務驅動教學模式的重要環節，教師僅僅負責提供資料，由學生自主探討、解決訪問的方法，學生可以利用網絡獲取最新、最豐富的教育資源，結合Sakai網絡教學平臺中教學內容、多媒體教學課件、圖片集、教學視頻、學生作品等教學資源，將收集到的資料整理、消化、吸收、轉化為自己的東西，找出完成任務的最佳解決方案。該環節有助于增強學生自主學習意識，培養學生的主動創新精神，挖掘學生的挑戰能力。 

協作交流。經過自主探究學習后，協作交流可以作為學生思路交流、成果分享、觀點碰撞的平臺，學生之間相互交流自己的解決方案，通過互相補充與優化，進一步促進學習與合作。教師在此環節要做好組織引導工作，避免學生因爭論激烈而偏離主體，對一些疑難問題，適當的給予引導，以免學生進入死胡同。該環節重點在于培養學生溝通交流、思維發散、團隊合作能力，提升學生全面素質。 

總結提高。任務驅動的教學模式最后一個環節就是總結提高。首先，教師需要引導學生對任務進行總結，對學習過程中遇到的問題與解決方法進行總結，對學習成果進行歸納，完成學習研究報告。其次，以小組或個人的形式讓學生對學習報告進行陳述，引導學生分享自己的成果，欣賞他人的成果，學會反思與總結自己成果的優點與不足。最后，教師需要對所有學生的任務完成情況進行總結，對一些共性的問題給予指導和點評。此環節重點在于激發學生獲得進一步探究的興趣與愿望，獲取更深層次的學習體驗。 

4 課程考核方式改革 

傳統的課程考核方式通常是試卷，忽視了學生學習的過程。基于任務驅動的考核方式可以多元化，通過理論考試、實驗評價、過程考核等方式，考察學生對整門課程的掌握程度。這種多元化的評價模式，避免了片面的以學習結果評價學生的能力，全方位的考察學生整體水平，促進學生整體素質的提高。 

理論考試，重點考察學生對課堂上的理論知識點掌握情況，包括密碼算法的基本原理、應用等。實驗評價，是對學生完成任務的情況進行評價，考慮是否按規定獨立完成或者團隊合作完成、是否提交研究報告等因素進行評價。過程考核，是對學生在整個教學活動各個環節的表現給予評價，比如能否積極的思考并提出問題，能否自主地搜索資料，能否創新的解決問題，團隊合作中所表現出來的協作能力，表達能力，執行能力等等。 

5 總結 

現代密碼學是一門理論與實踐并重的多學科交叉的課程，其實踐教學涉及領域較廣，要求也相對較高。現代密碼學課程教學模式的改革，將對信息安全發展、課程建設及人才培養產生積極意義。本文主要從教學內容設計、教學方法實施和考核評價三部分著手，結合現代密碼學的課程特點，探索基于任務驅動的教學模式?；谌蝿镇寗拥慕虒W模式在密碼學課程實踐中取得了良好的效果，提高了學生自主探究學習的能力，拓寬了學生的專業視野，提升了學生的創新能力。希望這一教學模式的改革能對同行有借鑒作用。 

參考文獻（References）： 

[1] 杜紅樂，張燕，辛建軍.計算機網絡實踐課研究性教學的探討 

與實踐[J].微型電腦應用，2014.30（10）：32-34 

[2] 羅銘，盧曉勇.基于行動導向的現代密碼學理論與實踐課程 

教學改革[J].計算機教育，2014.13：39-43 

[3] 董理君，武進霞，康曉軍.信息安全專業開放式實踐教學模式 

探討[J].計算機教育，2013.15：57-60 

[4] 張琿，王劍，劉儉.“密碼學與網絡安全”課程研討式教學[J].電 

氣電子教學學報，2013.35（6）：63-65 

篇5

【 關鍵詞 】 口令；對稱密鑰；雙向；身份認證

【 中圖分類號 】 TN

【 Abstract 】 This paper proposes a two-way identity authentication scheme based on the password and symmetric key system.Under the assumption that communication on both sides for electronic wallet client and electronic wallet server application environment，using symmetric key algorithm implements mutual authentication between the two sides of communication、the session key exchange and user anonymity.Finally， the solution of the security and performance were analyzed.

【 Keywords 】 password；symmetric key；two-way；the identity authentication

1 引言

由于移動網絡的快速發展，越來越多的人們開始使用手機等移動終端設備上網，各種電子服務與電子交易發展也十分迅速。而遠程用戶要獲得遠程服務器的服務或者進行電子交易，用戶與服務器之間在開放的網絡中確認雙方的身份是十分重要的。為了讓人們更加安全地在網絡上進行交易，基于網絡的安全問題已經成為信息社會急需解決的問題之一。項金萍提出的基于口令的兩方認證和密鑰交換協議的研究，實現了用戶和遠程系統的相互認證，但是因為采用了智能卡和讀卡器，并不適合應用于手機等移動設備。楊a涵提出的可證安全的口令認證密鑰交換協議研究，因為采用了公鑰算法，對移動終端的資源需求較大。萬泓伶提出的基于口令的認證系統設計與實現，運用了計算量較大的模運算。林遠輝提出的基于口令的三方認證密鑰交換協議研究，采用了開銷較大的公鑰算法。由徐會艷提出的基于口令的身份認證方案的研究，運用了開銷較大的簽名運算。李曉偉提出的可證明安全的認證與密鑰協商協議研究，也采用了開銷較大的公鑰算法。本文提出的身份認證方案，因為采用了對稱密鑰算法，對系統資源需求較低，適合應用于手機設備等移動終端環境。

2 方案設計

2.1 用戶注冊

用戶A設定使用電子錢包的賬戶名IDA和口令pwA。服務器將一個共享的對稱密鑰kA和對應IDA的匿名標識snA存入到客戶A的電子錢包客戶端中，服務器保存了snA與IDA及h（pwA）的映射關系，用戶A下載并安裝電子錢包客戶端，用戶不能訪問存儲kA和snA的區域。

2.2 認證流程

方案的具體認證流程如圖1所示。

（1）用戶輸入用戶名IDA和口令pwA登陸電子錢包客戶端。

（2）客戶端選取隨機數r1并作存儲，用對稱密鑰kA加密r1 || IDA為E（r1 || IDA），把E（r1 || IDA），snA打包為MA發送至服務器。

（3）服務器收到MA后，檢測snA是否存在于數據庫，若存在則查找對應的IDA，否則拒絕認證。通過snA查找到對應IDA的共享對稱密鑰kA，用對稱密鑰kA解密E（r1 || IDA）得到r1 || IDA，存儲r1。服務器選取隨機數r2、會話密鑰k'并作存儲，用對稱密鑰kA加密IDS || k' || r1 為E（IDS || k' || r1），把E（IDS || k' || r1），r2打包為MS發送至客戶端。

（4）客戶端收到MS后，用對稱密鑰kA解密E（IDS || k' || r1）得到IDS || k' || r1，比較解密得到的隨機數r1'與客戶端已存儲的r1是否相同，相同則存儲會話密鑰k'和隨機數r2，否則拒絕認證?？蛻舳擞脮捗荑€k'加密r2 || h（pwA）為M0，然后發送M0至服務器。

（5）服務器收到M0后，用會話密鑰k'解密M0得到r2 || h（pwA），比較解密得到的隨機數r2'、h（pwA）'與服務器端已存儲的r2、h（pwA）是否相同，相同則認證成功，否則拒絕認證。認證成功后，服務器更新snA為sn'A。用會話密鑰k'加密IDS || sn'A為M1，然后發送M1至客戶端。

（6）客戶端收到M1后，用會話密鑰k'解密M1得到IDS || sn'A，存儲匿名標識sn'A，用作下一次用戶的登錄認證。

3 安全性和性能分析

3.1 方案的安全性

性質1：認證方案可以實現會話密鑰的安全交換。

證明：步驟（3）中服務器通過匿名標識snA查找到對應IDA的共享對稱密鑰KA，從而解密了E（r1 || IDA），確認了消息MA的真實性以及用戶的真實身份IDA。服務器選取會話密鑰k'，用對稱密鑰KA加密IDS || k' || r1為E（IDS || k' || r1）傳輸至客戶端，保證了會話密鑰k'的安全傳輸。步驟（4）中客戶端用對稱密鑰KA解密E（IDS || k' || r1）得到IDS || k' || r1，通過比較解密得到的隨機數r'1與客戶端已存儲的r1是否相同，從而確認了消息MS以及隨機數r1的真實性，客戶端存儲會話密鑰k'，因此會話密鑰的安全交換得以實現。

性質2：認證方案可以保證用戶與服務器之間的可認證性。

證明：步驟（3）中服務器通過匿名標識snA查找到對應的IDA共享對稱密鑰kA，解密E（r1 || IDA）得到r1 || IDA，通過比較解密得到的ID'A與服務器已存儲的IDA是否相同，從而確認了用戶身份的真實性，用戶身份得以認證。步驟（4）中客戶端用對稱密鑰kA解密E（IDS || k' || r1）得到IDS || k' || r1，通過比較解密得到的隨機數r'1與客戶端已存儲的r1是否相同，從而確認了消息MS以及隨機數r1的真實性，服務器身份得以認證。步驟（5）中服務器用會話密鑰k'解密M0得到r2 || h（pwA），通過比較解密得到的隨機數r'2 、h（pwA）'與服務器端已存儲的r2 、h（pwA）是否相同，實現了用戶口令的認證，因此用戶與服務器之間的可認證性得以保證。

性質3：認證方案可以保證用戶的匿名性。

證明：步驟（2）中客戶端通過匿名標識snA隱藏用戶的真實身份IDA，snA僅在用戶向服務器發起認證的消息MA中。步驟（3）中服務器發給用戶的應答是含有隨機數r1的消息MS，除用戶本人外，任何人都不知道該報文是發給誰的，保證了用戶身份的機密性。步驟（5）中用戶與服務器認證成功后，服務器更新snA為sn'A，因此有效地保證了用戶的匿名性。

3.2 性能分析

3.2.1 客戶端

計算開銷：用H代表一次hash計算，E代表一次對稱加密計算，D代表一次對稱解密計算，用λ代表hash函數輸出的位長。

步驟（2）中客戶端用對稱密鑰kΑ加密r1 || IDA為E（r1 || IDA），需要一次對稱加密計算，步驟（4）中客戶端用對稱密鑰kΑ解密E（IDS || k' || r1）得到IDS || k' || r1，需要一次對稱解密計算，用會話密鑰k'加密r2 || h（pwA）為M0，需要一次對稱加密計算和一次hash計算，步驟（6）中客戶端用會話密鑰k'解密M1得到IDS || sn'A，需要一次對稱解密計算，客戶端的計算開銷總計為H+2E+2D。

步驟（2）中客戶端發送消息MΑ至服務器、步驟（4）中客戶端收到消息MS、發送消息M0至服務器、步驟（6）中客戶端收到消息M1需要的通信開銷大致為2| r1 | + | IDA | + | snA | + 2| IDS | + | k' | + 2| r2 | + | λ | + | sn'A | 。

| r1 | 、 | IDA | 、 | snA |、| IDS | 、 | k' |、| r2 |、 | sn'A |分別代表 r1 、 IDA 、 snA 、IDS 、 k' 、 r2 、sn'A 的標準位長。

3.2.2 服務器

步驟（3）中服務器用對稱密鑰kΑ解密E（r1 || IDA）得到r1 || IDA，需要一次對稱解密計算，用對稱密鑰kΑ加密IDS || k' || r1為E（IDS || k' || r1），需要一次對稱加密計算，步驟（5）中服務器用會話密鑰k'解密M0得到r2 || h（pwA），需要一次對稱解密計算，用會話密鑰k'加密IDS || sn'A為M1，需要一次對稱加密計算，服務器的計算開銷總計為2E+2D。

步驟（3）中服務器收到消息MA、發送消息MS至客戶端、步驟（5）中服務器收到消息M0、發送消息M1至客戶端需要的通信開銷大致為2| r1 | + | IDA | + | snA | + 2| IDS | + | k' | + 2| r2 | + | λ | + | sn'A |。

4 結束語

本文通過運用口令和對稱密鑰算法，實現了客戶端和服務器的雙向身份認證，不僅完成了會話密鑰的安全交換，而且也保證了用戶的匿名性，用戶的隱私得到了有效保護。在安全性得到保障的同時，也獲得了較好的性能。

參考文獻

[1] 項金萍.基于口令的兩方認證和密鑰交換協議的研究[D].杭州師范大學，2011.

[2] 楊a涵.可證安全的口令認證密鑰交換協議研究[D].中國礦業大學，2013.

[3] 萬泓伶.基于口令的認證系統設計與實現[D].電子科技大學，2013.

[4] 林遠輝.基于口令的三方認證密鑰交換協議研究[D].山東大學，2014.

[5] 徐會艷.基于口令的身份認證方案的研究[D].南京理工大學，2010.

[6] 李曉偉.可證明安全的認證與密鑰協商協議研究[D].西安電子科技大學，2013.

基金項目：

國家自然科學基金資助項目（61472343）。

作者簡介：

李純（1992-），男，漢族，江蘇徐州人，揚州大學信息工程學院，碩士，研究生；主要研究方向和關注領域：信息安全。

篇6

1國內文秘專業建設現狀分析與規律探索

1.1國內文秘專業建設現狀分析

從總體來說，目前國內的文秘專業特色不明顯。這主要表現在下列幾個方面：

第一、培養目標雷同。目前，國內有上百所院校開辦了文秘專業，大多是將文秘專業人才的培養目標定位于從事辦公室事務、為領導決策服務的人才。若說有不同，有的秘書專業強化了英語教學，注重涉外秘書人才的培養。

第二，崗位定位相似。大多數秘書專業定位于各種行業從事行政秘書、涉外商務秘書、文書處理員、接待員、資料管理員、檔案管理員等崗位的工作。

第三，課程體系差別不太。由于培養目標和崗位定位的相似，導致課程體系趨同。專業技能課程主要為秘書技能模塊，計算機操作模塊和商務模塊，涉外秘書專業會有英語技能模塊。

由于上述關鍵因素沒有明顯的秘書專業特色，文秘專業至今沒有國家示范建設專業，省級示范建設專業也屈指可數。同時由于缺乏特色，在許多地區秘書專業學生就業出現結構性困難。

為什么文秘專業難以辦出應有特色呢?通過分析主要有下列幾方面的原因：

第一，對文秘專業的研究不夠深入。從78年南開大學首次開辦秘書專業以來，在相當長時間內文秘專業主要培養行政單位寫作型秘書，后來隨著我國政治經濟改革的深入，行政機關對秘書人員的需求不斷減少，而企業、團體對文秘人才的需求不斷增加，為了適應這種變法，許多院校的文秘專業進行了自我改造，即從培養以寫作能力為核心的體系，轉到培養以會議組織、接待等實務和辦公自動化能力為核心的體系上，當新體系建立后，文秘專業如何繼續適應社會經濟對文秘人才的變化，沒有作進一步的探索。這就導致了文秘專業定位和課程體系相似。

第二，文秘職業的需求特點導致形成自己特色比較困難。文秘職業需求具有分散性，一個單位即使需要也往往只是一兩個，不像有些專業的職業需求是批量的。職業的分散性導致文秘專業在人才培養規格上求全求大，就業崗位定位于所有行業的秘書崗位，課程體系以訓練秘書崗位共性的能力為主，因此專業特色很難形成。

第三，文秘教師的現狀在一定程度影響文秘專業特色的形成。目前從事文秘教學的教師多是由原來教語文或中文的教師轉過來的，大多數教師沒有實際秘書工作經驗，對秘書崗位要求不熟悉，加上目前對秘書教師的培訓機會很少，秘書專業的不“專業”，在一定程度上導致文秘專業難出彩。

1.2專業特色形成規律探索

專業沒有特色就沒有生存空間，沒有生存空間的專業就沒有競爭的優勢，而沒有競爭優勢的專業就不能得到發展。促進專業特色的形成，已經成為許多高職院校專業獲得生存和發展的重要戰略手段。

通過研究那些專業特色明顯的案例，我們發現，一個專業的特色形成應遵循下列規律：

①專業建設與地方經濟發展趨勢相一致。

專業建設方向首先要面向地方經濟，為地方經濟服務。因此，一個特色專業的建設必須與當地的社會背景、產業背景、職業崗位背景及其發展趨勢密切聯系在一起，專業建設只有把握住這種需求特點和變化趨勢，有針對性地培養人才，才能實現專業和社會發展的雙贏。落實在專業建設具體實施過程中，就是要對專業的培養方向、培養目標和培養模式靈活把握，隨著社會需求的狀況和變化確定自己的專業方向、特色和定位。比如深圳職業技術學院，由于深圳的物業管理一直走在全國前面，該學院隨之設立了樓宇設備與智能化技術、制冷空調、建筑工程、城市環境工程、城市園林等物業管理專業群。再比如，伴隨著深圳建設花園城市的步伐和深圳花卉園林業的發展，該學院開設了城市園林專業，等等。這些專業(群)之所以能形成特色，無不是圍繞深圳的社會經濟發展來建設的。

②專業建設與學院專業的整體發展規劃與布局相一致。

一個專業要辦出特色，需要整合院內資源，在一個學院總資源有限的情況下，如果專業建設不與學院專業的整體發展規劃和布局相一致，不與本校的辦學方向和學院特色相適應，就很爭取到更多資源。因此，專業建設的執行者要研究本院辦學特色，把握本院特色專業建設的戰略方針、總體目標，然后結合自身特點將專業辦出特色。比如北大方正軟件技術學院，本身是一所主要培養IT人才的學院，它的文秘專業也圍繞學院特色進行專業建設，目前已經成功地形成了信息化商務文秘的特色。

③專業特色的形成需要相對穩定的環境和時間的沉淀

“冰凍三尺，非一日之寒”。一個專業要形成自己的特色，需要相對穩定的環境，需要一定的時間進行科學研究，進行教學經驗交流與總結。同時，保持專業相對穩定性，也有助于師資隊伍建設和教學資源的積累。比如湖南城建職業技術學院有11個特色專業、湖南民政職業學院的文秘專業殯儀專業都是經過長時間積累與建設而成的。

④專業特色的形成要充分發揮自身的優勢

一個特色專業的形成是專業長期發揮自身優勢的結果。比如廣東科學技術職業學院文秘專業之所以能建出特色，與它長期重視發揮自身優勢密切聯系。該院文秘專業的專業帶頭人楊文豐是一位作家，同時擔任該學院人文分院的領導，因此文秘專業中應用寫作課程得到很好的發展，經過長期的積累與建設，該院的文秘專業寫作教學獲得了多項國家與省級的教學獎，同時也促成了專業特色的形成。

1.3關于我院文秘專業形成特色思考

品牌就是特色，如何將我院文秘專業建設成特色專業，我們認為，文秘專業要辦出特色必須抓住深港合作機遇，結合我院的信息特點，通過提升現有的優勢讓本院文秘專業形成自身特點。

1.3.1關于我院文秘專業人才培養規格的定位

專業定位是專業建設的核心問題，也是專業形成特色的關鍵。依據專業形成特色的規律，專業定位必須立足于地方經濟，為地方經濟服務，同時注重專業的前瞻性。因此我們課題組認為，我院文秘專業應立足于為深圳經濟發展服務。

1.3.2為培養熟悉深港企業業務運作的秘書人才所具有的條件和優勢

篇7

【關鍵詞】 黑色素瘤抗原；發酵；大腸桿菌

【Abstract】 AIM: To realize high celldensity fermentation of MAGE3/HSP70 engineered E.coli，and to evaluate the antitumor immunity of MAGE3/HSP70 fusion protein in vivo. METHODS: High celldensity fermentation of MAGE3/HSP70 enginered E. coli was carried out with constant soluble oxygen and continuous cultivation in selfcontrol fermentor. The mouse was immunized by purified MAGE3/HSP70 fusion protein in E.coli， and the antitumor immunity was detected by ELISPOT and LDH release assay. RESULTS: High celldensity fermentation of MAGE3/HSP70 engineered E.coli was successful， and the expression of MAGE3/HSP70 in fermented bacterial was the same as the flask culture. The results of ELISPOT and LDH release assay showed that MAGE3/HSP70 generated tumor specific cytotoxic T lymphocyte (CTL) to damage tumor cel1. CONCLUSION: High celldensity fermentation of MAGE3/HSP70 engineered E.coli was realized and MAGE3/HSP70 fusion protein can generate specific CTL to kill tumor cel1.

【Keywords】 Melanoma antigen; fermentation; E.coli

【摘要】 目的：實現重組人黑色素瘤抗原MAGE3/HSP70融合蛋白工程菌的高密度發酵，并測定MAGE3/HSP70融合蛋白在體內的抗腫瘤免疫效應. 方法：利用自控發酵罐發酵，采用溶氧反饋，分批補料的方法對MAGE3/HSP70融合蛋白工程菌進行了高密度發酵，從菌體中純化MAGE3/HSP70融合蛋白，并用所純化的MAGE3/HSP70融合蛋白免疫小鼠，運用酶聯免疫斑點法(ELISPOT)和細胞毒性殺傷實驗(LDH)檢測了融合蛋白激活機體細胞免疫反應的狀況. 結果：高密度發酵取得成功，發酵菌中MAGE3/HSP70融合蛋白的表達量與搖瓶中的相當，摸索出發酵水平純化MAGE3/HSP70融合蛋白工藝，ELISPOT和LDH顯示MAGE3/HSP70可以激活機體免疫反應，并產生針對MAGE3的CTL，特異性殺傷表達MAGE3的腫瘤細胞. 結論：MAGE3/HSP70融合蛋白工程菌成功實現高密度發酵，MAGE3/HSP70融合蛋白可以有效激活機體免疫反應，產生針對特異性抗原MAGE3的CTL，免疫學活性良好，為新型抗腫瘤疫苗臨床前研究奠定了良好基礎.

【關鍵詞】 黑色素瘤抗原；發酵；大腸桿菌

0引言

黑色素瘤抗原（melanoma antigenassosiated gene，MAGE）是第一類被發現的腫瘤排斥抗原［1-2］，MAGE3是MAGE家族成員之一，不僅在黑色素瘤表達，同時在其它多種腫瘤中均有不同程度的表達，能夠誘導機體特異性的CTL反應，更重要的是在除和胎盤外的正常組織中均不表達，人們認為它是腫瘤特異性免疫治療理想的靶分子之一［3-4］. 重組人黑色素瘤抗原MAGE3/HSP70融合蛋白(專利申請號：ZL03134626.X)是我室研制和開發的一種新型腫瘤疫苗［5］，它對肝癌、胃癌、乳腺癌等常見惡性腫瘤具有良好的治療效果和預防效果，在腫瘤的治療方面具有潛在的臨床應用價值［6］. 本研究目的是實現重組人黑色素瘤抗原MAGE3/HSP70融合蛋白工程菌的高密度發酵，并用從發酵菌中純化的目的蛋白，測定其在體內的抗腫瘤免疫效應，為通過動物腫瘤模型研究MAGE3/HSP70融合蛋白在腫瘤免疫治療中的作用奠定基礎.

1材料和方法

1.1材料含MAGE3/HSP70基因的重組表達質粒pET28a／MAGE3HSP70由本室構建，宿主菌BL21（DE3）本室保存. NBS Bioflo Ⅳ20L自動發酵罐(NBS公司)；J6B型大容量冷凍離心機(Beckman公司)；微量蛋白電泳儀(BioRad公司)；KTA explorer 100層析系統(Amersham Pharmacia Biotech公司);實驗動物是由第四軍醫大學實驗動物中心引進繁殖的4～6 wk齡二級C57BL/6小鼠40只，體質量18～20 g，均為雌性，在SPF級飼養條件下進行試驗. 轉MAGE3基因的小鼠黑色素瘤細胞B16MAGE3由本實驗室馬家海博士構建，MAGE3蛋白和HSP70蛋白由本實驗室馬家海博士提取并鑒定. 小鼠IFNγ ELISPOT系統(法國Diaclone公司); Cytotox96檢測試劑盒(Promega公司); Ficoll淋巴細胞分離液(Sigma公司); 蛋白胨、酵母抽提物(Oxoid公司); SOURCE 30Q及Sephacryl S200HR (Pharmacia公司); IPTG (Sigma公司); 抗MAGE3多克隆抗體(R&D公司);其余試劑均為國產分析純試劑.

主要溶液的配制①種子液：1000 mL種子液中含蛋白胨16 g，酵母提取物10 g，甘油20 mL，NaCl 5 g，用5 mol／L NaOH將pH值調至7.0；②發酵液：每升發酵液中含有蛋白胨20 g，酵母抽提物9 g，甘油5 mL，十二水磷酸氫二鈉6 g，磷酸二氫鉀1.5 g，硫酸銨1.5 g，氯化銨1 g，七水合硫酸鎂0.25 g，氯化鈣0.02 g，硫酸亞鐵0.04 g，甘氨酸0.5 g. 每升補料基質含有：甘油120 mL，蛋白胨80 g，酵母抽提物40 g，七水合硫酸鎂5 g.

1.2方法

1.2.1種子培養取-70℃，100 g/L甘油保存的pETHM/BL21(DE3)菌種1支，從中挑取1環，劃含卡那霉素(Kan)的LB平板，37℃培養過夜，次日挑取一個邊緣整齊、生長良好的單菌落接種到10 mL LB培養基中(含35 mg/L Kan)，37℃振蕩培養12 h，以50 g/L接種量轉接1次，37℃繼續培養4 h左右，使其生長至對數生長期，以1%接種量轉接至200 mL種子液中，37℃振蕩培養過夜.

1.2.2發酵采用20 L NBS Bioflo IV自控發酵罐，發酵總體積12 L (0.6 L種子液，0.74 L發酵液，1.2 L緩沖液，9.48 L H2O)，含Kan (35 mg／L). 以AFSBioCommand Bioprocessing Software(Version 2.61)軟件對其進行數據采集(每30 s采集數據1次)，實現計算機在線控制，全過程共10 h. 控制參數為：①空氣流量設定為12 L/min，溶氧控制在40%，達到最大轉速后，通入純氧；②溫度控制為37℃；③pH值設定為7.0，自動流加濃氨水以保持恒定；④攪拌速度：設定攪拌速度下限為200 r/mim，上限為1200 r/min. 生長過程中當溶氧低于設定值時通過計算機由AFSBioCom mand Bioprocessing Software(Version 2.61)軟件控制每分鐘增長5轉. 誘導過后，攪拌速度改為由NBS Bioflo IV發酵罐自動溶氧反饋控制. ⑤補料流加：在生長階段，當溶氧率在3 min內持續高于60％時補料泵以5％的速率進行補加營養. 誘導階段當溶氧值在3 min內持續高于50％時補料泵以100％的速率進行補加營養1 min. 每1 h取樣測定A600 nm值，當培養至A600 nm=12時IPTG誘導目的蛋白表達，誘導4 h后收集菌體，取小量進行SDSPAGE檢測蛋白表達水平，其余菌體保存于-70℃用于純化目的蛋白.

1.2.3目的蛋白的純化4℃離心收菌，3 mL/g菌體重懸于Lysis Buffer（50 mmol／L NaH2PO4，300 mmol／L NaCl，10 mmol／L imidazole，pH 8.0)；加入溶菌酶至終濃度為10 g/L，冰浴30 min；超聲裂解，功率2 kW，超聲10 s，間隔10 s，共30 min；12 000 g，4℃離心15 min，取上清，0.45 μm針頭濾器過濾；上NiNTA Superflow柱， Wash Buffer(50 mmol／L NaH2PO4， 300 mmol／L NaCl， 20 mmol／L imidazole， pH 8.0)沖洗后Elution Buffer(50 mmol／L NaH2PO4， 300 mmol／L NaCl， 250 mmol／L imidazole， pH 8.0)；洗脫，收集洗脫峰；SDSPAGE分析；以50倍體積的A液(20 mmol／L Tris?HCl， pH 8.0)透析24 h，中間換3次透析外液，透析后上清過用A液充分平衡的SOURCE 30Q柱，用B液(20 mmol／L Tris?HCl， 0.5 mol／L NaCl， pH 9.0)連續梯度洗脫4～5個柱床體積，收集洗脫峰，SDSPAGE分析；收集目的蛋白峰，以50倍體積的C液(20 mmol／L Tris?HCl， pH 7.4)透析24 h，中間換3次透析外液，透析后上清過用D液（137 mmol／L NaCl， 1.4 mmol／L KH2PO4， 1.7 mmol／L KCl， 4.3 mmol／L Na2HPO4?12H2O，pH 7.4）液充分平衡的Sephacryl S200HR柱，收集洗脫峰；SDSPAGE及Western Blot鑒定. Bradford法測定蛋白的含量，凍干，-70℃保存.

1.2.4動物免疫和小鼠脾淋巴細胞的分離與活化C57BL/6小鼠30只，隨機分為5組，每組6只，各組分別于第1，10，20日腹腔注射蛋白免疫，MAGE3組注射MAGE3蛋白3.2 μg（200 pmol）；HSP70組注射HSP70蛋白15.8 μg（200 pmol）；MAGE3/HSP70組注射融合蛋白18.6 μg（200 pmol）；HSP70＋MAGE3組注射HSP70蛋白7.9 μg（100 pmol）和MAGE3蛋白1.6 μg（100 pmol），對照組注射PBS，100 μL/(只?次). 末次免疫后10 d，小鼠球后動脈取血，斷頸處死，無菌取脾臟，毛玻璃片輕輕捻碎脾臟，10號針頭輕輕吹吸數次，用Ficoll淋巴細胞分離液分離淋巴細胞. 計數后，用AIMV培養液培養1 d后用于后續試驗.

1.2.5MAGE3特異性T細胞的檢測采用IFNγ ELISPOT方法： 依照法國DIACLONE公司ELISPOT檢測試劑盒使用說明，用稀釋好的捕獲抗體（Capture Antibody）100 μL/孔包被PVDF板， 4℃靜置16 h. 20 g/L脫脂乳PBS室溫封閉2 h，加入PBS，MAGE3，HSP70，MAGE3/HSP70和MAGE3＋HSP70免疫小鼠得到的脾細胞細胞1×104個/孔，同時加入轉MAGE3基因的小鼠黑色素瘤細胞B16MAGE3細胞5×104個/孔，每個實驗組設置3個復孔，50 mL/L CO2納胞培養箱靜置培養20 h. 用PBS充分沖洗后加入檢測抗體（Detection Antibody），于37℃孵育2 h，洗板，再加入堿性磷酸酶標記的鏈霉親和素，同上孵育洗板，加入底物顯色液. 避光顯色20 min，1200 dpi掃描讀取斑數，統計學分析.

1.2.6LDH釋放法測定細胞殺傷效率方法參照文獻［5］，主要步驟如下：以PBS，MAGE3，HSP70，MAGE3/HSP70和MAGE3＋HSP70免疫小鼠得到的脾細胞為效應細胞，以MAGE3基因的小鼠黑色素瘤細胞B16MAGE3細胞為靶細胞，以小鼠黑色素瘤細胞B16為對照，進行體外殺傷實驗. 靶細胞濃度為1×104個/孔，效靶比分別為5∶1，10∶1和50∶1，37℃共育4 h，離心后，每孔吸取50 μL上清液進行LDH檢測. 實驗同時設立效應細胞自發釋放孔，靶細胞自發釋放孔，靶細胞最大釋放孔和培養液背景孔. 每個實驗組設3個復孔，用AIMV無血清培養液洗滌重懸細胞，所有檢測孔所測得吸光度值減去培養液背景即為實際值. 按下公式計算：殺傷率=(實驗組A-效應細胞自發A-靶細胞自發A)/ (靶細胞最大A-靶細胞自發A)×100％.

統計學處理：統計資料均采用x±s表示，分析采用JMP統計軟件（V5.0.1.2SAS Institute Inc.）進行，組間比較采用方差分析處理，P

2結果

2.1工程菌的發酵為了獲取足量的菌體進行研究，我們對工程菌進行了高密度發酵. 用溶氧反饋、分批補料的方法，采用20 L NBS Bioflo IV發酵罐進行高密度發酵. 接入種子液時菌體密度為A600 nm=0.01，6 h后達A600 nm=12.8. 200 μmoL/L IPTG誘導表達目的蛋白， 于誘導后4 h終止發酵， 發酵結束時A600 nm=48.2， 每升發酵液收濕菌70 g， 發酵曲線如圖1.

圖1pETMH/BL21(DE3)工程菌的發酵曲線（略）

2.2MAGE3/HSP70融合蛋白的表達及純化結果顯示，在誘導4 h后，發酵菌體的重組蛋白表達量同搖瓶培養表達水平相當(圖2A). 發酵菌體裂解后取上清，經過NiNTA Superflow，SOURCE 30Q及Sephacryl S200HR純化后，純度可達90％以上(圖2A). Western Blot結果顯示，純化后的目的蛋白能夠與抗人MAGE3多克隆抗體特異性結合(圖2B).

AM: 低分子質量蛋白標準;

1: 未誘導pETMH/BL21(DE3);

2: 搖瓶IPTG誘導pETMH/BL21(DE3);

3: 發酵罐IPTG誘導pETMH/BL21(DE3);

4: 純化MAGE3/HSP70融合蛋白. B1: 低分子質量蛋白標準;

2: 未誘導pETMH/BL21(DE3);

3: 純化MAGE3/HSP70融合蛋白;

4: 發酵罐IPTG誘導pETMH/BL21(DE3).

圖2MAGE3/HSP70的原核表達與分離純化（A）及Western Blot（B）結果（略）

2.3體外腫瘤免疫學試驗

2.3.1ELISPOT檢測分泌IFNγ的MAGE3特異性T細胞數量與PBS組比較，HSP70組、MAGE3+HSP70組小鼠脾淋巴細胞中分泌IFNγ的T淋巴細胞頻數沒有明顯變化，MAGE3組和MAGE3/HSP70組頻數顯著增加（P

2.3.2細胞毒性實驗采用LDH釋放實驗，結果顯示，效靶比為5∶1，10∶1和50∶1時，HSP70組及PBS組誘導的CTL對B16MAGE3細胞無特異性殺傷作用；MAGE3組、MAGE3+HSP70 和MAGE3/HSP70組特異性殺傷作用顯著增強，而且MAGE3/HSP70組特異性殺傷作用顯著大于MAGE3組、MAGE3＋HSP70組（P

bP

圖3ELISPOT檢測蛋白疫苗免疫小鼠分泌IFNγ的T淋巴細胞頻數（n=5， x±s）（略）

bP

圖4蛋白疫苗免疫的小鼠脾淋巴細胞對B16MAGE3細胞的特異性殺傷（n=5， x±s）（略）

3討論

腫瘤免疫治療在預防腫瘤復發、轉移及治療微小殘留腫瘤病灶等方面有其獨特的優勢，是腫瘤綜合治療的重要組成部分. 腫瘤免疫治療的分子基礎是腫瘤抗原可以激活機體特異性CTL殺傷腫瘤細胞. 黑色素瘤抗原(MAGE)是一種腫瘤特異性抗原，是腫瘤特異性免疫治療理想的靶分子［1-2］. 其中MAGE3可以激活機體的細胞免疫系統，活化CTL特異性地識別并殺傷表達MAGE3的腫瘤細胞［3-4］. 重組人黑色素瘤抗原MAGE3/HSP70融合蛋白是我室研制和開發的一種新型腫瘤疫苗［5］，實驗表明，它對肝癌、胃癌、乳腺癌等常見惡性腫瘤具有良好的治療效果和預防效果，在腫瘤的治療方面具有潛在的臨床應用價值［6］. 作為廣譜抗腫瘤藥物的研究，其用量較大，為了得到大量的重組MAGE3/HSP70蛋白，就需要大量的誘導表達MAGE3/HSP70蛋白的基因重組菌體，而高密度發酵是獲取大量基因重組菌體重要策略之一［7］.

基因工程菌的兩階段培養法是基因工程的一大進步，它是通過合適的誘導條件將工程菌的發酵過程分為菌體生長與產物表達兩階段，為了增加基因產品的時控產率，不僅需要提高工程菌的表達水平，同時必需增高菌體增殖密度［8-9］. 對于通過化學誘導表達目標蛋白的工程菌，誘導時機和誘導時間對菌體的生長密度和比生產率有較大影響. 在細菌的對數生長中期誘導比早期和后期誘導產率高，而且只有工程菌處于對數生長時期，目標蛋白的表達水平才最高，一旦工程菌進入穩定生長期，目標蛋白的表達水平迅速下降，可能與菌體內的酶體系有關. 在對數生長期菌體內的各種酶體系代謝旺盛，尤其是轉錄、翻譯酶體系很活躍，而進入穩定生長期后，該酶體系活性減弱或代謝速度減慢，只能勉強進行轉錄和翻譯，從而引起細菌生長狀態下降，表達外源基因的能力也隨之降低［10-11］， 所以應在對數中期進行誘導. MAGE3/HSP70工程菌活化6 h，A600 nm為12.3時處于對數生長期中，此時進行IPTG誘導，收菌量與目標蛋白的表達量都達到較高水平. 研究雖然對MAGE3/HSP70工程菌進行成功的發酵，但是收菌量還有待進一步提高，發酵條件還要進一步優化，以達到中試生產的要求. 在下步純化過程工作中我們一方面要提高MAGE3/HSP70蛋白的可溶性表達，另外還要摸索包涵體的復性條件，以期提高蛋白的最后得率.

為了進一步明確發酵表達并純化的MAGE3/HSP70在體內的抗腫瘤免疫活性，我們利用檢測細胞免疫反應的通用方法，酶聯免疫斑點法(ELISPOT)和細胞毒性殺傷實驗(LDH)檢測了MAGE3/HSP70激活機體免疫反應的情況. 結果發現用MAGE3/HSP70免疫小鼠，刺激機體產生分泌IFNγ的T淋巴細胞頻數顯著高于PBS組，HSP70組，MAGE3+HSP70組以及MAGE3組. 同時LDH殺傷實驗表明MAGE3/HSP70可以激活機體免疫系統產生特異性CTL殺傷表達MAGE3的腫瘤細胞，且顯著高于其他各組，而對不表達特異性抗原的細胞沒有殺傷作用. 說明MAGE3/HSP70在制備過程中保持了藥物的性能. 本實驗為MAGE3/HSP70的進一步應用奠定了基礎.

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篇8

對于一流高校理科專業的學生來說，在本專業繼續深造是比較保險的出路，也是大多數人的選擇，除此之外的舉動，例如工作、轉系等等，都被視為冒險項目。

與李杰的清閑相比，在上海，4歲孩子的父母們忙碌起來，5月和6月是幼兒園報名的高峰期，一些名牌幼兒園的名額早早就會被一搶而空，為了能在9月開學時給孩子尋找一條“金色起跑線”，家長必須提前數月打聽情報、盡早在網上登記，“通路子”、找關系，有的家庭一家六口悉數出馬，清早起床分赴不同幼兒園拿號排隊，以便能讓孩子在多家幼兒園得到“面試”機會?！昂透呖继钪驹敢粯?。”有家長在幼兒論壇的擇園版抱怨，他們心力交瘁，同時也暗自擔憂，如果從4歲起就如此疲于奔命。那未來的十幾年學習生涯，甚至畢業后孩子的工作出路，都像是一副枷鎖，牢牢束縛住他們的生活和希望。

“名牌大學”VS“理想的大學”

威爾?肖茨是世界上唯一一個擁有“謎語學’學位的人，1974年，他進入印第安納大學學習，該大學有一條規定――本科生可以自行設計學位課程，專業方向不限，只需要滿足基礎課及學分要求。這在很多高校是想都不敢想的規定，可是給了威爾一個機會，這個喜歡猜謎的年輕學生試著提交了一份謎語學學位課程計劃。教授們雖然吃驚，最終還是批準了，于是他讀完自己設計的謎語學課程，提交西方謎語史論文，隨后考取弗吉尼亞大學法學院，三年后放棄考律師(美國律師的吃香程度相當于如今中國的公務員)，進了一家雜志社編寫字謎。

如今，威爾的“成功業績”包括《紐約時報》的縱橫填空字謎和NPR周日字謎節目；家藏兩萬種古今謎語文獻，包括十六世紀珍本；還創辦了全美字謎大賽和萬國謎語錦標賽，擔任世界各地的謎語賽事的主席、評委或特邀顧問。

作家馮象在《理想的大學》一文中寫道：“我在威爾身上看到了理想的大學，那里，學生可以自由發展個性與才智，而不必套進同樣的模子，試圖長成或裝扮同樣的人材。千人一面，一個腦袋?！?/p>

李杰談論他們班那個“唯一去找工作的同學”時說：“他是一個比較有想法的人。已經直接保博了，可是想到未來5年都待在高校研究所里，而研究的項目又不一定是自己想做的，與其浪費青春，不如干脆進入社會鍛煉。”

1986年12月出生的李杰是江蘇前黃高級中學保送至清華的學生。當年在那個省重點學校，他排名年級前五，父母對他報考化學系有意見，希望他讀一個例如計算機那樣的專業?！吧鐣纤^熱門專業，好找工作，都是錯誤的。10年前計算機那么火，都去讀，現在畢業的學生不過也就是當個底層IT人士罷了?！崩罱苜M了一番口舌說服文化程度不高的父母，他的父親后來覺得“學化學可以做藥，做化肥，人沒有計算機也能活，但生病了不吃藥不行”，便想通了。李杰認為自己也算是對出路想得比較明白的人――這是他的愛好，他愿意在這條路上一直走下去，而他的很多同學是“隨大流”，既然大家都走這條路，也很保險，那么就這樣吧。

去年從北大生物系畢業的吳玫選擇了一條截然不同的道路，她不盡然同意“保研―出國―直博”這一高校理科生的單一模式，畢業后當了一年古琴老師?！拔业耐瑢W都覺得我很奇怪?！彼┲鴣喡椴嫉囊路谇兖^過著彈琴、上課、喝茶這樣相對悠閑的日子，她的父母也希望她能夠繼續深造，或者回西安去找一份穩定的工作，她現在需要給父母一個留在北京的理由，因此也考慮如何重新規劃人生。跳出現有體制總要經歷陣痛，吳玫不否認壓力很大，雖然覺得在琴館或許是一種逃避面對“模式化人生”的方式，可是她的眼神看上去頗為堅定，并不為自己的決定感到后悔。

“成人”VS“成功人士”

過了22歲這個坎，李杰和吳玫結束必要的學業，做出了自己對人生的選擇，完成了沒有儀式的成人禮，進入真正“成人’’階段，“自己對自己的決定負責”，他們都提到了同樣的一句話，然而卻離目前社會價值觀中“成人”的光環還很遠。

李杰算了一筆賬，如果去國外讀博士，那么一年獎學金就有2萬2千美元至2萬5千美元不等，通常開銷1萬至1萬5肯定夠了，剩下的1萬美元是“凈賺”，5年下來也有5萬美元的積蓄，按照現在的匯率計算，相當于30萬人民幣左右，“等拿到博士學位回來，買一套房子的首付算是有了?！?/p>

那些指望孩子將來上名牌大學，賺大錢的父母恐怕要失望了，“成人”與“成功人士”之間不劃等號，22歲出國，讀完博士已經29歲，該談婚論嫁了，“沒房沒車誰要你々”李杰說。而如今家長的投入，光是屬于非義務制教育的學前教育，費用已經不成比例的高。根據上海市的一項統計，幼兒園有“六大費用”是逃不了的：公辦幼兒園伙食費4元／天；托管費在公辦的示范幼兒園收費1200元左右／月，一般中等私立幼兒園的托班管理費是每月800多元，而收費高的則在1200元以上，有臺、港地區投資背景的幼兒園一般是每月2000元，更有以美元收費的，折合人民幣每月上萬元；代辦費用于幼兒園訂閱幼兒教育類書籍、購買文具用品和衛生用品的支出，一般每學期收100至120元；中午睡覺要購買的被褥費80至400元左右，有些幼兒園還會要求購買校服，置裝費大多在200元以上；休閑活動費，根據活動成本計算；特長興趣班，這個收費過雜，無法計算。此外不包括贊助費。

問題在于，李杰的同學中，他很少聽說有人上過課外補習班的，吳玫也如此。李杰的一個室友，初中二年級幾乎沒上過學，因為“他上初一時把初二和初三的教材都看了，說很簡單嘛，沒什么難的，他媽媽也管不了他，差點退學了?！笔聦嵣线@名室友照樣輕松考上了清華。巧立名目的補習班，頓時成了一種悖論。

“好好學習”VS“好好做人”

2009年6月2日，教育部學生司副司長姜鋼透露，今年高考報名人數約為1020萬名，比去年約減少40萬，將有84萬應屆畢業生不參考。幼教熱與高考“遇冷”形成可笑的反差。從4歲到22歲的成長期，中國人承受著冰火兩重天的考驗，這段時間里教育成為一個家庭唯一的重頭戲，中國青少年研究中心的調查顯示，54.7％的父母要求孩子讀到博士，83.6％要求孩子考試考前15名，2005年全國婦聯的一項調查顯示，母親對孩子說得最多的一句話是，“好好學習”，排在其后的是“功課做了沒有”。中國青少年研究中心副主任孫云曉認為，這樣容易造成“情感荒漠化”，即只將注意力集中在知識和技術等狹窄的領域，為實現個人目標而很少考慮可能帶來的惡劣后果等。

篇9

摘要：實踐證明，只要學生有興趣識字，并且掌握一定的識字方法，再通過少寫多認多復現進行鞏固，他們就可以輕松完成新《課標》提出的識字要求，為閱讀奠定良好基礎。本文結合自己的教學實際，介紹了一些識字教學的方法，僅供參考。

關鍵詞：識字教學；拓寬渠道；激發興趣

《語文課程標準》指出：“語文是一門實踐性很強的課程，應著重培養學生的語文實踐能力，而培養這種能力的主要途徑也應是語文實踐?！弊R字寫字是第一學段語文教學的重點，而要提高識字教學的效率，關鍵的因素還是培養學生的自主識字能力，這種能力的培養不是一蹴而就的，需要老師花很大的功夫，想很多的辦法。

一、幼兒園要努力為幼兒創設一個認讀漢字的環境

首先，幼兒在一日活動中，同樣也會碰到、看到各種東西。比如門窗、墻壁、桌椅、鋼琴、玩具……凡是能用漢字標明的實物上都盡可能與漢字掛鉤，讓孩子們識物的同時就能見到與之對應的漢字。讓幼兒在不知不覺中，自然而然地把圖像、聲音、語義、符號整合在一起，從而認識漢字。其次，教師在與幼兒交往中，也要注意營造一個認讀漢字的環境?，F在，不少幼兒園實行了在胸前佩帶標志的制度。這不但能標明每個人的身份，而且具有教兒童識字的功能。我們只要把人名寫入標志，在幼兒與教師和小朋友的交往中，他們就能認讀其上面的漢字。最后，教師通過組織幼兒開展多種多樣的活動，充分拓展他們識字的空間。也可以在區域活動中，向幼兒提供字典、圖文并茂的圖書，各類看圖識字卡片等，供幼兒自己去查找感興趣的文字。

二、拓寬識字渠道，鼓勵學生生活識字

生活是語文學習的最好資源，識字也不例外，學生學習漢語有別于學習其他語言，它具有母語學習的優勢，因此我們必須充分發揮這一優勢，鼓勵學生在生活中識字。放開手，讓學生自主識字。孩子有孩子的年齡和心理特點，他們最知道自己喜歡什么樣的學習方式，最會尋找符合自己個性的學習識字的方法，而這些學習方式一旦被鼓勵和激發，就會變成孩子寶貴的學習資源，成為方法性的資源，而且這些資源不僅不會遺忘，而且會隨著時間的積累而越來越熟練和提高。

三、制作生字卡片是一種很好的學習識字的方式

學生自做的卡片雖然沒有買來的好看規范，但正是這些各具特色的卡片才體現了學生的個性，培養了學生的創造能力。它至少可以起到這樣一些作用：1、可以讓學生在預習課文時提前與生字見面，在課后做卡片則可以起到鞏固生字的作用，增加學生與生字見面的機會；2、在做卡片的過程中，可以抄寫，可以剪貼，也可以配插圖，勾花邊，學生的動手操作能力得到了很好的培養；3、好動是孩子的天性，多樣化的活動既符合孩子喜愛動手的特點，又避免了單純抄寫生字的枯燥和無聊，讓學生真實地感受到學習生字是一項愉悅的活動，可以想象，這樣的家庭作業是受孩子喜愛的。4、人手一套的生字卡片便于學生在小組學習中合作學習。孩子們拿著自己的小卡片，可以自己拼讀，可以讓同伴欣賞，也可以當小老師拿卡片來考考小組內的同學?？梢?，這小小的識字卡片真是為學生獨立識字能力的培養插上了翅膀。

四、從課中遵循規律識字

低年級學生的注意力保持時間短，每節課所學的字不多，指導學生小組合作學習生字，并在全班舊了交流識字方法，再當堂采取多種方法復現，及時鞏固要求認識的字。根據兒童“先快后慢”的遺忘規律，在識字教學課后兩三天內進行復習、鞏固尤為重要。我利用學生在合作中、游戲中、活動中鞏固識字。我在生字教學中利用摘蘋果、走迷宮、找朋友、巧配對等游戲的方式在興趣盎然中加深印象。我鼓勵兒童自編句子、兒歌、謎語，鼓勵學生從身邊，從書報上找到剛識的字，在語言環境中及時鞏固識字，并和學生一起參與。例如，我教學“叢”字，順口說了一個謎語：“兩人橋上走”，馬上就有學生說出了“江”“照”“日”“田”等字的謎語，學生們根據謎語很快就記住了生字。我還鼓勵學生“異想天開”，找一些不相關的字詞連成自認為覺得有趣的一句話或一段話，這樣既鞏固了生字，同時又訓練了學生的想象能力、思維能力和表達能力，學生們都很樂意做這樣的“發明創造”。每一課識字完畢，我還讓學生總結自己喜歡的識字方法，如：記部件、熟字加偏旁部首、熟字換偏旁部首、找形近字、找同音字、找相關字等等，學生們總會找到適合自己的識字方法。

五、引導學生發揮想象，激發識字興趣

開始識字時，為了提高學生的學習興趣，我告訴小朋友：我們中國的漢字很奇妙，一個漢字可以是一首詩、一幅畫、一首兒歌、一個故事。小朋友聽了便十分有興趣。開始教生字時我有意識地把一些生字編成謎語，故事講給他們聽。小朋友聽了之后很感興趣，一下子就把生字記往了，之后，我便鼓勵他們自己來給生字編編謎語，講講故事。小朋友的情緒很高漲，有的小朋友編得謎語相當出色，連老師都不曾想到，如“底”字，小朋友說：“有個小不點來到廣場下買了一瓶樂百氏奶，‘底’字下面的一點代表小不點，不能漏掉?！钡诮虒W時應適時點撥，引導，避免學生為了編個謎語，講個故事就硬性把字拆開，強行把各部件編成沒有任何聯系的故事、謎語。

六、周期復現鞏固識字

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“定位”這個詞是我們電視工作者經常掛在嘴邊的一個詞?！岸ㄎ弧钡囊饬x在于以明確的方向、目標給自己以與眾不同的個性形象，從而受到社會的承認與關注。歸納起來，節目定位的依據大體有三個：一是根據受眾對象定位；二是根據節目內容定位；三是根據節目形式定位。任何一個電視節目要想辦出特色，受觀眾歡迎，定位的準確與否是關鍵，兒童節目也不例外。

一、兒童節目定位的依據

電視節目的準確定位取決于節目的基本屬性，兒童節目顧名思義是做給兒童看的節目。兒童節目定位的依據主要就是它的受眾對象即觀眾，在電視事業日益發展的今天，兒童電視節目應該成為孩子們課余的伙伴，家庭的課堂，這一點已成為人們的共識。

二、兒童節目的定位與節目內容、形式的統一

對于兒童節目來說，定位容易，但具體操作起來卻難，容易出現節目內容、形式與定位不相符的錯位情況。兒童節目是做給孩子們看的，但做節目的卻多是成年人，制作者往往帶著成人的視角來想象兒童的喜怒哀樂和興趣點，把成年人的主觀思想強加給孩子。

為此，作為成年人的編導應該做到：

1.學會尊重。這里的尊重包括兩方面內容：一是指要尊重兒童成長發展的客觀規律。兒童的年齡特點決定了他們心理發展的特征，所以兒童電視節目制作者必須要根據兒童的心理特征和年齡特點來策劃節目；二是指要尊重兒童本身。兒童有自己獨特的情感世界，對外部世界有著獨特的感知能力，觀察問題、思考問題也有其獨特的視角和方法，我們要平等地對待他們，把他們當做完整的、獨立的一個人，深入地感受他們真實而豐富的心靈。

2.學會溝通。學會溝通，就是要以它們的視角觀察世界，以它們的思維方式去思考問題。要走進他們的世界里，了解他們喜歡什么、討厭什么、關心什么、害怕什么，這樣他們才能接納你，把你當成他們的朋友。在尊重兒童的基礎上，與他們進行很好的溝通，孩子們就會很愿意把他們的心里話，把他們的喜好告訴我們，我們做出的節目也就能更加受到兒童的歡迎。